拟南芥CBF1、CBF4基因及启动子的克隆与植物表达载体的构建
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-15页 |
| ·苜蓿转基因研究现状 | 第11页 |
| ·提高苜蓿抗非生物胁迫的研究 | 第11页 |
| ·提高苜蓿抗生物胁迫的研究 | 第11页 |
| ·基因与基因工程研究概况 | 第11-13页 |
| ·基因研究的发展 | 第11-12页 |
| ·基因工程的定义及其主要的研究内容 | 第12页 |
| ·基因操作的基本概念和技术原理 | 第12-13页 |
| ·CBF 基因家族 | 第13-14页 |
| ·CBF 基因家族的成员及其发现过程 | 第13-14页 |
| ·CBF 基因的特点 | 第14页 |
| ·CBF 基因在抗寒和抗旱中的交互作用 | 第14页 |
| ·CBF 转录因子在植物基因工程研究概况 | 第14-15页 |
| 2 目的与意义 | 第15页 |
| 3 材料和方法 | 第15-21页 |
| ·实验材料 | 第15-16页 |
| ·拟南芥菜简介 | 第15页 |
| ·拟南芥作为一种模式植物的优点 | 第15-16页 |
| ·大肠杆菌 | 第16页 |
| ·酶以及试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·常用溶液的配制 | 第16页 |
| ·溶液的配制 | 第16页 |
| ·实验试剂的配制 | 第16页 |
| ·PCR 反应 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-17页 |
| ·质粒DNA 的酶切验证 | 第16-17页 |
| ·DNA 测序 | 第17页 |
| ·从质粒上扩增所需要的片段 | 第17页 |
| ·连接反应体系 | 第17页 |
| ·主要实验方法 | 第17-21页 |
| ·引物的筛选 | 第17-18页 |
| ·从基因组中克隆目的基因 | 第18-19页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第19-20页 |
| ·质粒转化农杆菌的电击转化 | 第20-21页 |
| 4 结果与分析 | 第21-34页 |
| ·引物筛选结果 | 第21页 |
| ·CBF1 基因片段的克隆及序列分析 | 第21-22页 |
| ·CBF1-PRO 启动子片段的克隆及序列分析 | 第22-23页 |
| ·CBF1 启动子功能预测分析 | 第23-24页 |
| ·CBF4 基因片段的克隆及序列分析 | 第24-25页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第25-34页 |
| ·PBI121-CBF1 植物表达载体的构建 | 第25-27页 |
| ·PBI-PRO-CBF1 植物表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·PBI-CBF1-PRO 植物表达载体的构建 | 第29-32页 |
| ·PBI121-CBF4 植物表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 5 讨论 | 第34-36页 |
| 6 结论 | 第36页 |
| 7 展望 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 附图 | 第41-42页 |
| 作者简介 | 第42页 |
