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蛋白激发子PebC1及其复合体的表达纯化及初步结构解析

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 引言第14-29页
   ·激发子的种类和性质第14-15页
     ·非生物源激发子第14页
     ·生物源激发子第14-15页
   ·蛋白质的表达与分离纯化第15-18页
     ·蛋白表达系统第15-16页
     ·蛋白质的分离纯化方法第16-18页
   ·蛋白质结构研究方法第18-27页
     ·冷冻电子显微镜技术第18-19页
     ·小角散射第19页
     ·圆二色谱第19-20页
     ·核磁共振第20页
     ·X-射线晶体学第20-26页
     ·同源建模第26-27页
   ·研究目的和意义第27-28页
   ·技术路线第28-29页
第二章 蛋白激发子PebC1 序列的信息学分析第29-31页
   ·使用的软件和算法第29页
   ·结果第29-31页
第三章 重组PebC1 及bcβNAC单体的表达与纯化第31-50页
   ·实验材料、试剂和仪器第31页
   ·重组PebC1 及bcβNAC单体的原核表达与纯化第31-37页
     ·PebC1 及bcβNAC原核表达载体的构建第33-35页
     ·PebC1 及bcβNAC的原核表达第35页
     ·PebC1 的纯化第35-36页
     ·bcβNAC的纯化第36页
     ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测第36-37页
   ·重组PebC1 及bcβNAC单体的真核表达与纯化第37-41页
     ·重组pFastBac donor载体的构建第37-39页
     ·重组Bacmid质粒的制备第39-40页
     ·转染及病毒扩增第40页
     ·表达第40-41页
     ·纯化第41页
     ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测第41页
   ·结果第41-48页
     ·原核表达系统第41-46页
     ·真核表达系统第46-48页
   ·讨论第48-50页
第四章 重组PebC1 与bcβNAC复合体蛋白的表达与纯化第50-58页
   ·原核表达系统表达重组PebC1 与bcβNAC复合体蛋白第50-52页
     ·实验材料与试剂第50页
     ·bcβNAC重组载体的构建第50-51页
     ·PebC1 重组载体的构建第51-52页
     ·复合体蛋白的原核表达第52页
     ·复合体蛋白的纯化第52页
     ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测第52页
   ·真核表达系统表达重组PebC1 与bcβNAC复合体蛋白第52-53页
     ·实验材料和试剂第52页
     ·病毒的制备第52页
     ·复合体蛋白的真核表达第52-53页
     ·复合体蛋白的纯化第53页
     ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测第53页
   ·结果第53-57页
     ·重组PebC1 和bcβNAC复合体原核表达系统的表达及纯化第53-56页
     ·重组PebC1 和bcβNAC复合体真核表达系统的表达及纯化第56-57页
   ·讨论第57-58页
第五章 PebC1 及其复合体蛋白结构的初步解析第58-68页
   ·复合体蛋白晶体生长条件的研究第58-59页
     ·材料和试剂第58页
     ·晶体生长条件筛选第58页
     ·结晶条件的优化第58页
     ·结果第58-59页
     ·讨论第59页
   ·小角散射第59-63页
     ·实验材料和器材第59页
     ·样品的预处理与上样第59-60页
     ·样品检测第60页
     ·数据处理第60-61页
     ·结果第61-63页
     ·讨论第63页
   ·同源建模第63-66页
     ·模板的选择第63-64页
     ·模板间的比对第64页
     ·序列与模板的比对第64页
     ·建模第64页
     ·模型的检查和评价第64-66页
   ·模型的分析第66-67页
   ·讨论第67-68页
第六章 全文总结第68-69页
参考文献第69-74页
附录一 仪器设备第74-75页
附录二 试剂第75-76页
附录三 溶液及配置方法第76-78页
致谢第78-79页
作者简历第79页

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