| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-29页 |
| ·激发子的种类和性质 | 第14-15页 |
| ·非生物源激发子 | 第14页 |
| ·生物源激发子 | 第14-15页 |
| ·蛋白质的表达与分离纯化 | 第15-18页 |
| ·蛋白表达系统 | 第15-16页 |
| ·蛋白质的分离纯化方法 | 第16-18页 |
| ·蛋白质结构研究方法 | 第18-27页 |
| ·冷冻电子显微镜技术 | 第18-19页 |
| ·小角散射 | 第19页 |
| ·圆二色谱 | 第19-20页 |
| ·核磁共振 | 第20页 |
| ·X-射线晶体学 | 第20-26页 |
| ·同源建模 | 第26-27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| 第二章 蛋白激发子PebC1 序列的信息学分析 | 第29-31页 |
| ·使用的软件和算法 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-31页 |
| 第三章 重组PebC1 及bcβNAC单体的表达与纯化 | 第31-50页 |
| ·实验材料、试剂和仪器 | 第31页 |
| ·重组PebC1 及bcβNAC单体的原核表达与纯化 | 第31-37页 |
| ·PebC1 及bcβNAC原核表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·PebC1 及bcβNAC的原核表达 | 第35页 |
| ·PebC1 的纯化 | 第35-36页 |
| ·bcβNAC的纯化 | 第36页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第36-37页 |
| ·重组PebC1 及bcβNAC单体的真核表达与纯化 | 第37-41页 |
| ·重组pFastBac donor载体的构建 | 第37-39页 |
| ·重组Bacmid质粒的制备 | 第39-40页 |
| ·转染及病毒扩增 | 第40页 |
| ·表达 | 第40-41页 |
| ·纯化 | 第41页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-48页 |
| ·原核表达系统 | 第41-46页 |
| ·真核表达系统 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 重组PebC1 与bcβNAC复合体蛋白的表达与纯化 | 第50-58页 |
| ·原核表达系统表达重组PebC1 与bcβNAC复合体蛋白 | 第50-52页 |
| ·实验材料与试剂 | 第50页 |
| ·bcβNAC重组载体的构建 | 第50-51页 |
| ·PebC1 重组载体的构建 | 第51-52页 |
| ·复合体蛋白的原核表达 | 第52页 |
| ·复合体蛋白的纯化 | 第52页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第52页 |
| ·真核表达系统表达重组PebC1 与bcβNAC复合体蛋白 | 第52-53页 |
| ·实验材料和试剂 | 第52页 |
| ·病毒的制备 | 第52页 |
| ·复合体蛋白的真核表达 | 第52-53页 |
| ·复合体蛋白的纯化 | 第53页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-57页 |
| ·重组PebC1 和bcβNAC复合体原核表达系统的表达及纯化 | 第53-56页 |
| ·重组PebC1 和bcβNAC复合体真核表达系统的表达及纯化 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 PebC1 及其复合体蛋白结构的初步解析 | 第58-68页 |
| ·复合体蛋白晶体生长条件的研究 | 第58-59页 |
| ·材料和试剂 | 第58页 |
| ·晶体生长条件筛选 | 第58页 |
| ·结晶条件的优化 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59页 |
| ·小角散射 | 第59-63页 |
| ·实验材料和器材 | 第59页 |
| ·样品的预处理与上样 | 第59-60页 |
| ·样品检测 | 第60页 |
| ·数据处理 | 第60-61页 |
| ·结果 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63页 |
| ·同源建模 | 第63-66页 |
| ·模板的选择 | 第63-64页 |
| ·模板间的比对 | 第64页 |
| ·序列与模板的比对 | 第64页 |
| ·建模 | 第64页 |
| ·模型的检查和评价 | 第64-66页 |
| ·模型的分析 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 第六章 全文总结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录一 仪器设备 | 第74-75页 |
| 附录二 试剂 | 第75-76页 |
| 附录三 溶液及配置方法 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简历 | 第79页 |