| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-23页 |
| ·细胞壁降解酶 | 第16-20页 |
| ·细胞壁降解酶概述 | 第16页 |
| ·纤维素酶 | 第16-17页 |
| ·半纤维素 | 第17-18页 |
| ·果胶酶 | 第18-19页 |
| ·角质酶 | 第19页 |
| ·其他酶类 | 第19-20页 |
| ·嗜酸菌 | 第20-22页 |
| ·嗜酸菌的来源 | 第20页 |
| ·嗜酸菌的分类 | 第20页 |
| ·嗜酸菌的应用 | 第20-21页 |
| ·嗜酸真菌 Bispora sp. MEY-1 的研究现状 | 第21-22页 |
| 本研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 嗜酸真菌 Bispora sp. MEY-1 三种嗜酸糖苷水解酶的基因克隆 | 第23-42页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第23页 |
| ·引物合成和核酸序列测序 | 第23页 |
| ·工具酶、生化试剂和试剂盒 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·溶液 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·Bispora sp. MEY-1 基因组 DNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·第7 家族β–葡聚糖酶基因同源克隆简并引物的设计 | 第24页 |
| ·第7 家族β–葡聚糖酶基因部分序列的获得 | 第24页 |
| ·木聚糖酶XYLD 及多聚半乳糖醛酸酶PGA1 部分序列的获得 | 第24-25页 |
| ·三个糖苷水解酶基因完整序列的获得 | 第25-26页 |
| ·所获得完整序列的分析 | 第26-27页 |
| ·三种糖苷水解酶cDNA 的克隆 | 第27-28页 |
| ·三个糖苷水解酶cDNA 序列分析 | 第28页 |
| ·三个糖苷水解酶三级结构的预测 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-40页 |
| ·三个糖苷水解酶部分基因序列的获得 | 第28-29页 |
| ·第 7 家族 β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因 bgl7A cDNA 的获得及序列分析 | 第29-32页 |
| ·木聚糖酶基因xylD cDNA 的获得及序列分析 | 第32-36页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶基因pga1 cDNA 的获得及序列分析 | 第36-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 嗜酸真菌 Bispora sp. MEY-1 β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因 bgl7A 在毕赤酵母中的表达及性质分析 | 第42-54页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·菌株和质粒 | 第42页 |
| ·引物合成 | 第42页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·培养基配制 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-46页 |
| ·重组表达载体 pPIC9-bgl7A 的构建 | 第42-44页 |
| ·β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性的测定 | 第44页 |
| ·β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因 bgl7A 在毕赤酵母中的表达 | 第44-45页 |
| ·β-1,3-1,4-葡聚糖酶BGL7A 的酶学性质测定 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-51页 |
| ·β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因 bgl7A 在毕赤酵母中的表达 | 第46-47页 |
| ·β-1,3-1,4-葡聚糖酶BGL7A 的纯化 | 第47-48页 |
| ·表达产物的序列测定及脱糖基化 | 第48页 |
| ·β-1,3-1,4-葡聚糖酶BGL7A 的性质分析 | 第48-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| 第四章 嗜酸真菌Bispora sp. MEY-1木聚糖酶基因xylD在毕赤酵母中的表达及性质分析 | 第54-63页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-57页 |
| ·重组表达载体pPIC9-xylD 的构建 | 第54-55页 |
| ·木聚糖酶活性的测定 | 第55页 |
| ·木聚糖酶基因xylD 在毕赤酵母中的表达 | 第55-56页 |
| ·木聚糖酶XYLD 的酶学性质测定 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-61页 |
| ·木聚糖酶基因xylD 在毕赤酵母中的表达 | 第57-58页 |
| ·木聚糖酶XYLD 的纯化 | 第58页 |
| ·表达产物的序列测定及脱糖基化 | 第58-59页 |
| ·木聚糖酶XYLD 的性质分析 | 第59-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 嗜酸真菌 Bispora sp. MEY-1 多聚半乳糖醛酸酶基因 pga1 在毕赤酵母中的表达及性质分析 | 第63-73页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-67页 |
| ·重组表达载体pPIC9-pga1 的构建 | 第63-64页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶活性的测定 | 第64页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶基因pga1 在毕赤酵母中的表达 | 第64-65页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶PGA1 的酶学性质测定 | 第65-66页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶PGA1 在果汁澄清中的应用 | 第66-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-71页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶基因pga1 在毕赤酵母中的表达 | 第67页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶PGA1 的纯化 | 第67-68页 |
| ·表达产物的序列测定及脱糖基化 | 第68页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶PGA1 的性质分析 | 第68-71页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶PGA1 在果汁澄清中的应用 | 第71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| 第六章 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 附录 | 第81-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 作者简介 | 第87页 |
