| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-36页 |
| 1 异柠檬酸脱氢酶的进化 | 第10-12页 |
| ·β-脱羧脱氢酶家族及进化 | 第10-11页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶家族的进化 | 第11-12页 |
| 2 IDH 的空间结构 | 第12-16页 |
| ·NADP-IDH 的结构 | 第12-15页 |
| ·NAD-IDH 的结构 | 第15-16页 |
| 3 IDH 的酶学性质 | 第16-20页 |
| ·IDH 的辅酶特异性和底物特异性 | 第16-18页 |
| ·IDH 的最适pH 和最适pH 范围 | 第18-19页 |
| ·IDH 的最适温度和热稳定性 | 第19页 |
| ·金属离子对IDH 的影响 | 第19-20页 |
| 4 异柠檬酸脱氢酶的生物学功能 | 第20-22页 |
| 5 枯草芽胞杆菌及枯草芽胞杆菌异柠檬酸脱氢酶 | 第22-25页 |
| ·枯草芽胞杆菌 | 第22-23页 |
| ·枯草芽胞杆菌异柠檬酸脱氢酶 | 第23-25页 |
| 6 脱氢酶类的辅酶特异性改造 | 第25-28页 |
| ·脱氢酶的辅酶特异性改造简介 | 第25-26页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶的辅酶特异性改造实例 | 第26-28页 |
| 7 实验意义及展望 | 第28页 |
| 参考文献 | 第28-36页 |
| 第二章 枯草杆菌异柠檬酸脱氢酶的酶学性质分析 | 第36-58页 |
| 1 材料与方法 | 第37-46页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·实验方法 | 第39-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-52页 |
| ·重组质粒pET-BsIDH、pET-EcIDH 和pET-EmIDH 的构建 | 第46-47页 |
| ·蛋白质的表达与纯化 | 第47-48页 |
| ·BsIDH、EcIDH 和EmIDH 的酶学性质研究 | 第48-52页 |
| 3 讨论 | 第52-58页 |
| ·辅酶及底物特异性 | 第52-53页 |
| ·最适反应pH | 第53-54页 |
| ·金属离子对异柠檬酸脱氢酶活性的影响 | 第54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 第三章 枯草杆菌异柠檬酸脱氢酶的辅酶特异性改造 | 第58-79页 |
| 1 材料与方法 | 第59-65页 |
| ·材料 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-71页 |
| ·突变位点的选择 | 第65页 |
| ·含突变位点的重组质粒的构建与克隆 | 第65-67页 |
| ·突变体酶的表达和纯化 | 第67-68页 |
| ·突变体酶的活性分析 | 第68-69页 |
| ·突变体酶的动力学参数测定 | 第69-71页 |
| 3 讨论 | 第71-77页 |
| ·与辅酶特异性有关的氨基酸位点 | 第71-73页 |
| ·突变体酶的辅酶特异性 | 第73-76页 |
| ·辅酶特异性改造的意义 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附：本人在读研期间发表和合作的科研论文情况一览表 | 第80页 |