摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-14页 |
第1章 引言 | 第14-28页 |
·茉莉素的概述 | 第14-18页 |
·茉莉素是一种新型的植物激素 | 第14-15页 |
·茉莉素与冠菌素 | 第15-16页 |
·茉莉素的生物学功能 | 第16-17页 |
·茉莉素的生物合成途径 | 第17-18页 |
·植物激素的信号识别及受体研究概述 | 第18-19页 |
·植物激素信号识别研究的重要意义 | 第18页 |
·植物激素受体的基本概念及特性 | 第18-19页 |
·植物激素受体研究现状 | 第19页 |
·茉莉素信号传导研究概论 | 第19-24页 |
·F-box 蛋白COI1 | 第19-21页 |
·负调控因子JAZ 蛋白 | 第21-22页 |
·SCF~(COI1)-JAZ 复合物 | 第22-24页 |
·本研究的主要内容和主要贡献 | 第24-28页 |
·研究目标 | 第24页 |
·研究策略 | 第24-25页 |
·各章内容简介及主要结论 | 第25-27页 |
·本文的创新性与主要贡献 | 第27-28页 |
第2章 拟南芥COI1 蛋白的结构模拟 | 第28-43页 |
·本章引论 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-32页 |
·同源建模 | 第29页 |
·植物材料及生长条件 | 第29页 |
·COI1-FH 转基因植株的构建 | 第29-30页 |
·拟南芥幼苗根长测定 | 第30页 |
·JAZ1 蛋白的表达与纯化 | 第30-31页 |
·拟南芥叶片总蛋白的提取 | 第31页 |
·Pull-down 测试 | 第31页 |
·SDS-PAGE 电泳及Western 转膜操作 | 第31-32页 |
·野生型拟南芥植物总蛋白中COI1 含量的测定 | 第32页 |
·COI1-FH 转基因植物总蛋白中COI1 含量的测定 | 第32页 |
·实验结果 | 第32-41页 |
·拟南芥COI1 蛋白结构模型的构建 | 第32-33页 |
·COI1 结构模型可靠性的理论证明 | 第33-35页 |
·COI1 蛋白结构模型的特征 | 第35-38页 |
·COI1 结构模型可靠性的实验证明 | 第38-41页 |
·本章小结 | 第41-43页 |
第3章 COI1 与茉莉素分子相互作用的分子模拟 | 第43-52页 |
·本章引论 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-44页 |
·茉莉素与COI1 相互作用的分子模拟 | 第43-44页 |
·MM-PBSA 分析 | 第44页 |
·实验结果 | 第44-50页 |
·JA、MeJA 以及OPDA 与COI1 相互作用的分子模拟 | 第44-46页 |
·JA-Ile 与COI1 相互作用的分子模拟 | 第46-48页 |
·COR 与COI1 相互作用的分子模拟 | 第48-50页 |
·本章小结 | 第50-52页 |
第4章 COI1 能够结合固相化的茉莉素分子 | 第52-61页 |
·本章引论 | 第52-53页 |
·实验方法 | 第53-56页 |
·Jasmonate-linked Sepharose 的制备 | 第53-54页 |
·Acetic acid-linked Sepharose 的制备 | 第54页 |
·Jasmonate-linked Sepharose 偶联率测定 | 第54页 |
·植物总蛋白的提取 | 第54-55页 |
·Jasmonate-linked Sepharose 结合测试 | 第55页 |
·Jasmonate-linked Sepharose 的柱层析 | 第55页 |
·竞争性洗脱测试 | 第55-56页 |
·实验结果 | 第56-59页 |
·总蛋白中的COI1 能够结合Jasmonate-linked Sepharose | 第56页 |
·COI1 与固相化茉莉素结合的柱层析测试 | 第56-58页 |
·JA-Ile 竞争COI1 与固相化茉莉素的结合 | 第58-59页 |
·本章小结 | 第59-61页 |
第5章 COR 的高活性来源于其CFA 部分的结构特点 | 第61-70页 |
·本章引论 | 第61-62页 |
·实验方法 | 第62-65页 |
·CFA-Ile 的化学合成 | 第62页 |
·CFA-Ile 抑制根生长测定方法 | 第62-63页 |
·植物总RNA 的提取 | 第63页 |
·RT-PCR 制备植物总cDNA | 第63页 |
·茉莉素响应基因转录水平检测 | 第63-64页 |
·GUS 染色分析 | 第64页 |
·CFA-Ile 促进的Pull-down 测试 | 第64-65页 |
·实验结果 | 第65-69页 |
·CFA-Ile 对于植物根生长的抑制效应 | 第65-66页 |
·CFA-Ile 在促进茉莉素响应基因表达方面的效应 | 第66-68页 |
·CFA-Ile 在促进COI1 与JAZ1 相互作用方面的效应 | 第68-69页 |
·本章小结 | 第69-70页 |
第6章 COI1 与JAZ1 蛋白的相互作用仅依赖于茉莉素分子 | 第70-81页 |
·本章引论 | 第70页 |
·实验方法 | 第70-73页 |
·COI1 蛋白的体外表达与纯化 | 第70-72页 |
·表面等离子共振 | 第72-73页 |
·实验结果 | 第73-79页 |
·COI1 蛋白的体外表达与纯化 | 第73-76页 |
·COI1 能够在JA-Ile 存在下与JAZ1 发生相互作用 | 第76-77页 |
·不同茉莉素分子与COI1 和JAZ1 的相互作用 | 第77-78页 |
·JAZ1 蛋白单独不能结合JA-Ile/COR | 第78-79页 |
·本章小结 | 第79-81页 |
第7章 COI1 直接结合茉莉素分子 | 第81-101页 |
·本章引论 | 第81页 |
·实验方法 | 第81-89页 |
·茉莉素光亲和探针的合成 | 第81-87页 |
·茉莉素光亲和探针对根生长的抑制测试 | 第87-88页 |
·茉莉素光亲和探针对茉莉素响应基因转录水平影响 | 第88页 |
·茉莉素光亲和探针促进COI1 与JAZ1 相互作用的测试 | 第88-89页 |
·光亲和交联反应 | 第89页 |
·探针结合蛋白的检测 | 第89页 |
·实验结果 | 第89-100页 |
·茉莉素光亲和探针的设计与合成 | 第89-94页 |
·茉莉素光亲和探针的生物活性测试 | 第94-97页 |
·纯化的COI1 蛋白能够直接结合PACOR | 第97-98页 |
·PACOR 特异地识别并结合粗蛋白系统中的COI1 | 第98-99页 |
·JAZ3 蛋白不能结合PACOR | 第99-100页 |
·本章小结 | 第100-101页 |
第8章 结论及将来的研究方向 | 第101-114页 |
·研究总结 | 第101-106页 |
·需要进一步开展并正在进行中的研究 | 第106-114页 |
·COI1 与茉莉素结合的动力学测试 | 第106页 |
·COI1 同源蛋白与茉莉素分子的相互作用 | 第106-107页 |
·茉莉素信号转导通路的细节研究 | 第107-108页 |
·OPDA 信号通路的研究 | 第108-111页 |
·不同的茉莉酸氨基酸配合物的生物学功能 | 第111页 |
·COI1 在体内稳定性的调控机理 | 第111-114页 |
参考文献 | 第114-122页 |
致谢 | 第122-123页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第123页 |