| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一部分 前言 | 第11-32页 |
| 一、植物雄配子体的发生与发育 | 第11-17页 |
| 1. 小孢子母细胞的形成和花药壁的发育 | 第11-14页 |
| 2. 小孢子发生(microsporogenesis) | 第14-15页 |
| 3. 雄配子体发生(male gametogenesis) | 第15-16页 |
| 4. 成熟花粉 | 第16-17页 |
| 二、植物雄性生殖细胞发育的遗传调控 | 第17-26页 |
| 1. 孢子母细胞分化的遗传调控 | 第17-19页 |
| 2. 孢子母细胞减数分裂的遗传调控 | 第19-21页 |
| 3. 雄配子发育的遗传调控 | 第21-26页 |
| 三、拟南芥雄性不育研究进展 | 第26-31页 |
| 四、本实验研究研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第32-48页 |
| 一、材料 | 第32-33页 |
| 1. 植物材料 | 第32页 |
| 2. 载体和菌株 | 第32页 |
| 3. 工具酶和试剂 | 第32-33页 |
| 4. 常用抗生素配方 | 第33页 |
| 5. 主要仪器 | 第33页 |
| 二、常用染液和培养基配方 | 第33-35页 |
| 1. 常用染液配方 | 第33-34页 |
| 2. 常用培养基配方 | 第34-35页 |
| 三、实验方法 | 第35-48页 |
| 1. 雄配子突变体筛选和种植 | 第35-36页 |
| 2. 突变体表型观察 | 第36-38页 |
| 3. 突变体的回交实验及遗传分析 | 第38-39页 |
| 4. Tail-PCR克隆突变基因 | 第39-42页 |
| 5. 纯杂合鉴定 | 第42页 |
| 6. 全长基因克隆、分子互补载体构建以及转化相应突变体拟南芥 | 第42-46页 |
| 7. 启动子克隆、Pro∷GUS载体构建及转化野生型拟南芥 | 第46页 |
| 8. 全长cDNA克隆,P_(35S)∷cDNA∷GFP载体构建,转化野生型和突变体拟南芥 | 第46页 |
| 9. At2g01560和At1g26815 RNAi载体构建,及转化野生型拟南芥 | 第46-47页 |
| 10. 雄性不育的基因定位 | 第47-48页 |
| 第三部分 实验结果 | 第48-98页 |
| 一、雄配子体突变体研究 | 第48-92页 |
| 1. 雄配子体突变体的初筛 | 第48页 |
| 2. 雄配子体突变体遗传学分析 | 第48-52页 |
| ·KD360、KD361、KD362和KD375自交F2代分离比 | 第48-50页 |
| ·KD360、KD361、KD362、KD375与野生型拟南芥正反交F1代分离比 | 第50-51页 |
| ·KD360、KD361、KD375与野生型拟南芥正反交F1代中绿苗的亚历山大染色以及其自交F2代分离比 | 第51-52页 |
| 3. KD360表型及基因分析 | 第52-61页 |
| ·KD360表型分析 | 第52-57页 |
| ·克隆KD360 Ds插入边界基因组片段及测序结果比对 | 第57-58页 |
| ·KD360 Ds插入位点纯杂合鉴定 | 第58-59页 |
| ·KD360等位突变分析 | 第59-60页 |
| ·At1g44224启动子克隆及Pro_(At1g44224)∷GUS载体构建 | 第60-61页 |
| 4. KD361表型和基因分析 | 第61-69页 |
| ·KD361表型分析 | 第61-65页 |
| ·克隆KD361 Ds插入边界基因组片段及序列比对分析其插入位点 | 第65-66页 |
| ·KD361 Ds插入位点纯杂合鉴定 | 第66页 |
| ·KD361等位突变体分析 | 第66-67页 |
| ·At4g00380全长分子互补载体构建 | 第67-68页 |
| ·At4g00380启动子克隆及Pro_(At4g00380)∷GUS载体构建 | 第68-69页 |
| 5. KD362表型和基因分析 | 第69-78页 |
| ·KD362表型分析 | 第69-72页 |
| ·克隆KD362 Ds插入边界基因组片段及序列比对分析其插入位点 | 第72-73页 |
| ·KD362Ds插入位点纯杂合鉴定 | 第73-74页 |
| ·At2g01560RNAi载体构建 | 第74-75页 |
| ·KD362等位分析 | 第75-77页 |
| ·At2g01913全长分子互补载体构建 | 第77-78页 |
| 6. KD375表型和基因分析 | 第78-92页 |
| ·KD375表型分析 | 第78-86页 |
| ·克隆KD375 Ds插入边界基因组片段 | 第86页 |
| ·KD375 Ds插入位点纯杂合鉴定 | 第86-87页 |
| ·KD375等位突变体分析 | 第87-89页 |
| ·At1g26815全长分子互补载体构建 | 第89-90页 |
| ·At1g26815在各个组织器官中的表达分析 | 第90-91页 |
| ·Pro_(35s)∷cDNA_(At1g26815)∷GFP载体构建及转化烟草及拟南芥结果分析 | 第91-92页 |
| 二、拟南芥雄性不育突变体分析 | 第92-98页 |
| 1. 拟南芥雄性不育突变体的获得及遗传分析 | 第92-93页 |
| 2. ms360表型分析 | 第93-97页 |
| ·拟南芥野生型(Ler)和ms360亚历山大染色 | 第93-95页 |
| ·拟南芥野生型(Ler)和ms360花药整体透明 | 第95页 |
| ·拟南芥野生型(Ler)和ms360扫描电镜 | 第95页 |
| ·半薄切片观察拟南芥野生型(Ler)和ms360花药结构及雄配子体形态 | 第95-97页 |
| 3. ms360基因粗定位 | 第97-98页 |
| 第四部分 讨论 | 第98-108页 |
| 一、KD360是一个雄配子体部分致死突变体 | 第98-100页 |
| 1. KD360自交分离比 | 第98页 |
| 2. KD360与野生型拟南芥正反交分析 | 第98-99页 |
| 3. KD360表型分析 | 第99页 |
| 4. At1g44224可能参与调控雄配子体发育 | 第99-100页 |
| 5. At1g44224组织定位 | 第100页 |
| 二、KD361是一个雄配子体部分致死突变体 | 第100-102页 |
| 1. KD361分离比 | 第100页 |
| 2. KD361与野生型拟南芥正反交分析 | 第100-101页 |
| 3. KD361表型分析 | 第101页 |
| 4. At4g00380可能参与调控雄配子体发育 | 第101-102页 |
| 5. At4g00380组织定位 | 第102页 |
| 三、KD362是一个雄配子体致死突变体 | 第102-104页 |
| 1. KD362分离比 | 第102页 |
| 2. KD362与野生型拟南芥正反交分析 | 第102页 |
| 3. KD362表型分析 | 第102-103页 |
| 4. KD362可能参与调控雄配子体发育 | 第103-104页 |
| 四、KD375是一个雄配子体部分致死突变体 | 第104-106页 |
| 1. KD375分离比 | 第104页 |
| 2. KD375与野生型拟南芥正反交分析 | 第104页 |
| 3. KD375表型分析 | 第104-106页 |
| 4. KD375可能参与调控雄配子体发育 | 第106页 |
| 五、ms360可能是一个新的雄性不育突变体 | 第106-108页 |
| 1. ms360遗传学分析 | 第106-107页 |
| 2. ms360表型分析 | 第107页 |
| 3. ms360基因分析 | 第107-108页 |
| 第五部分 结论和展望 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-122页 |
| 附录 | 第122-150页 |
| 研究成果 | 第150-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
