| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-23页 |
| 1 核糖体工程概述 | 第10-15页 |
| ·核糖体工程的概念及其作用机制 | 第10-13页 |
| ·核糖体工程的应用 | 第13-15页 |
| ·提高了链霉菌、假单孢菌、芽孢杆菌等产抗生素的能力 | 第13-15页 |
| ·增强了微生物对恶劣环境的耐受力及提高蛋白合成效率 | 第15页 |
| 2 多杀菌素的研究进展 | 第15-22页 |
| ·多杀菌素的发现历史 | 第16页 |
| ·多杀菌素的物化性质 | 第16-17页 |
| ·多杀菌素的结构 | 第17-18页 |
| ·多杀菌素的生物学特性 | 第18页 |
| ·多杀菌素的生物合成 | 第18-20页 |
| ·多杀菌素的发酵生产 | 第20-21页 |
| ·多杀菌素的分离纯化和检测 | 第21-22页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-36页 |
| 1 实验材料 | 第23-26页 |
| ·出发菌株 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第24-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-36页 |
| ·菌种保藏和培养方法 | 第26页 |
| ·单孢子悬液制备 | 第26页 |
| ·最小抑菌浓度的测定方法 | 第26页 |
| ·连续抗性筛选培养法 | 第26-27页 |
| ·发酵液分析方法 | 第27-28页 |
| ·薄层色谱鉴别 | 第27页 |
| ·对照品溶液的制备 | 第27页 |
| ·供试品溶液的制备 | 第27页 |
| ·薄层色谱分析 | 第27页 |
| ·高效液相色谱分析 | 第27-28页 |
| ·色谱条件 | 第27页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第27-28页 |
| ·供试品溶液的制备 | 第28页 |
| ·多杀菌素质量浓度的计算 | 第28页 |
| ·新物质的分离提纯法 | 第28-31页 |
| ·预处理和固液分离 | 第28页 |
| ·提取 | 第28页 |
| ·精制 | 第28页 |
| ·多杀菌素系列物的分离纯化流程 | 第28-31页 |
| ·物质结构鉴定法 | 第31页 |
| ·化合物纯度测定 | 第31页 |
| ·红外吸收光谱 | 第31页 |
| ·质谱法 | 第31页 |
| ·核磁共振法 | 第31页 |
| ·rpsL 基因序列分析 | 第31-36页 |
| ·刺糖多孢菌总DNA 的小量提取 | 第31-32页 |
| ·rpsL 基因的PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第33页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收核酸 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·克隆载体构建 | 第34页 |
| ·转化和筛选 | 第34-35页 |
| ·碱裂解法提取E. coli 质粒 | 第35页 |
| ·甘油菌保存法 | 第35页 |
| ·测序 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-46页 |
| 1 链霉菌对刺糖多孢菌最小抑菌浓度的测定 | 第36页 |
| 2 链霉素抗性突变株发酵液分析 | 第36-38页 |
| 3 新物质的分离提纯 | 第38-40页 |
| ·薄层色谱鉴别 | 第38页 |
| ·新物质的分离提纯 | 第38-40页 |
| 4 新物质的结构鉴定 | 第40-44页 |
| 5 RPSL 基因验证 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-48页 |
| 1 链霉素抗性突变株的生长 | 第46页 |
| 2 多杀菌素结构的改造 | 第46-47页 |
| 3 小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53页 |