小菜蛾取食诱导的菜心mRNA表达谱及差异表达基因克隆
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| ·昆虫取食诱导的植物差异基因表达谱研究 | 第9-13页 |
| ·新一代测序技术 | 第13-19页 |
| ·新一代测序技术的原理 | 第13-16页 |
| ·新一代测序技术的应用 | 第16-19页 |
| ·本研究的意义 | 第19-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·供试材料 | 第22页 |
| ·供试蔬菜 | 第22页 |
| ·供试昆虫 | 第22页 |
| ·供试菌种 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·分析软件 | 第23页 |
| ·供试试剂 | 第23-25页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·试剂的配制 | 第23-24页 |
| ·引物合成 | 第24-25页 |
| ·样品采集与前处理 | 第25-26页 |
| ·总RNA 提取和检测 | 第26-27页 |
| ·差异基因表达谱构建 | 第27-28页 |
| ·RACE | 第28-29页 |
| ·引物设计与合成 | 第28页 |
| ·总RNA 提取及检测 | 第28页 |
| ·3’RACE 和5’RACE cDNA 合成 | 第28-29页 |
| ·Touchdown PCR 扩增 | 第29页 |
| ·扩增产物的回收 | 第29-30页 |
| ·连接转化 | 第30-31页 |
| ·连接 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·转化 | 第31页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-63页 |
| ·小菜蛾取食诱导的菜心m RNA 表达谱 | 第33-58页 |
| ·测序质量 | 第35页 |
| ·clean tag 拷贝数分布 | 第35-36页 |
| ·clean tag 比对 | 第36-37页 |
| ·表达基因 | 第37页 |
| ·反义链基因 | 第37页 |
| ·差异表达基因 | 第37-58页 |
| ·金属硫蛋白和光系统II 多肽蛋白基因片段 | 第58-63页 |
| ·金属硫蛋白基因片段 | 第58-60页 |
| ·光系统II 多肽蛋白基因片段 | 第60-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| ·昆虫取食诱导的植物基因表达研究 | 第63-64页 |
| ·新一代测序技术在研究基因差异表达中的应用 | 第64页 |
| ·需要继续开展的工作 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 附录 | 第74-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
