| 英文缩略词 | 第11-13页 |
| 中文摘要 | 第13-17页 |
| Abstract | 第17-20页 |
| 第一部分 基于Armored RNA技术的登革热病毒核酸检测质控品的研制及室间质量评价 | 第22-82页 |
| 前言 | 第22-24页 |
| 1. 材料和方法 | 第24-44页 |
| 1.1. 实验材料和试剂配制 | 第24-30页 |
| 1.1.1. 实验仪器 | 第24-25页 |
| 1.1.2. 主要实验耗材 | 第25页 |
| 1.1.3. 主要实验试剂 | 第25-27页 |
| 1.1.4. 培养基和溶液的配制 | 第27-29页 |
| 1.1.5. 菌株和质粒 | 第29-30页 |
| 1.2. 方法 | 第30-44页 |
| 1.2.1. 合成DENV-1～4基因片段 | 第30页 |
| 1.2.2. 构建pACYC-MS2-DENV-1～4重组质粒 | 第30-35页 |
| 1.2.3. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第35-38页 |
| 1.2.4. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第38-42页 |
| 1.2.5. 重组病毒样颗粒的性能验证 | 第42-43页 |
| 1.2.6. 制备DENV-1～4质评样本及开展全国室间质量评价 | 第43页 |
| 1.2.7. 统计学分析 | 第43-44页 |
| 2. 结果 | 第44-76页 |
| 2.1. pACYC-MS2-DENV-1～4重组质粒的验证 | 第44-65页 |
| 2.1.1. PCR验证 | 第44页 |
| 2.1.2. 测序验证 | 第44-65页 |
| 2.2. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第65-66页 |
| 2.3. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第66-68页 |
| 2.3.1. 琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第66-67页 |
| 2.3.2. SDS-PAGE鉴定 | 第67-68页 |
| 2.3.3. 电镜观察DENV-1～4 VLPs | 第68页 |
| 2.3.4. 商品化试剂盒验证VLPs包装片段 | 第68页 |
| 2.4. DENV-1～4 VLPs性能验证 | 第68-70页 |
| 2.4.1. 稳定性试验 | 第68-69页 |
| 2.4.2. 基质效应试验 | 第69页 |
| 2.4.3. 反复冻融试验 | 第69-70页 |
| 2.5. DENV-1～4 VLPs检测的室间质量评价 | 第70-76页 |
| 2.5.1. 参评实验室项目参数统计及评分 | 第70-72页 |
| 2.5.2. DENV-1～4检测的准确度、敏感度和特异度分析 | 第72-76页 |
| 2.5.3. 不同试剂盒DENV-1～4检测结果分析 | 第76页 |
| 2.5.4. 质评小结和证书发放 | 第76页 |
| 3. 讨论 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 第二部分 基于Armored RNA技术的白血病BCR-ABL1~(p210/p190)融合基因检测质控品的研制及室间质量评价 | 第82-149页 |
| 前言 | 第82-86页 |
| 1. 材料和方法 | 第86-113页 |
| 1.1. 实验材料和试剂配制 | 第86-92页 |
| 1.1.1. 实验仪器 | 第86-87页 |
| 1.1.2. 主要实验耗材 | 第87页 |
| 1.1.3. 主要实验试剂 | 第87-89页 |
| 1.1.4. 培养基和溶液的配制 | 第89-91页 |
| 1.1.5. 菌株和质粒 | 第91-92页 |
| 1.2. 方法 | 第92-113页 |
| 1.2.1. pACYC-MS2质粒、p210 BCR-ABL1以及p190 BCR-ABL1阳性患者总mRNA | 第92页 |
| 1.2.2. 构建pACYC-MS2-p210、pACYC-MS2-p190以及pACYC-MS2-CG重组质粒 | 第92-102页 |
| 1.2.3. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第102-105页 |
| 1.2.4. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第105-108页 |
| 1.2.5. 重组病毒样颗粒的性能验证 | 第108-110页 |
| 1.2.6. 制备p210、p190质评样本及开展全国室间质量评价 | 第110-113页 |
| 1.2.7. 统计学分析 | 第113页 |
| 2. 结果 | 第113-140页 |
| 2.1. pACYC-MS2-p210、pACYC-MS2-p190、pACYC-MS2-CG重组质粒的验证 | 第113-124页 |
| 2.1.1. PCR验证 | 第113页 |
| 2.1.2. 测序验证 | 第113-124页 |
| 2.2. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第124-125页 |
| 2.3. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第125-126页 |
| 2.3.1. 琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第125页 |
| 2.3.2. SDS-PAGE鉴定 | 第125-126页 |
| 2.3.3. RT-qPCR验证VLPs包装片段 | 第126页 |
| 2.4. p210、p190和CG VLPs性能验证 | 第126-128页 |
| 2.4.1. 稳定性实验 | 第126-127页 |
| 2.4.2. 均一性实验 | 第127页 |
| 2.4.3. 反复冻融实验 | 第127-128页 |
| 2.5. BCR-ABL1~(p210/p190)融合基因检测的室间质量评价 | 第128-140页 |
| 2.5.1. 结果回报情况 | 第128页 |
| 2.5.2. 参评实验室项目参数统计 | 第128-129页 |
| 2.5.3. p210和p190 BCR-ABL1检测结果 | 第129-132页 |
| 2.5.4. 质评样本及盲邮样本BCR-ABL1检测结果分布 | 第132页 |
| 2.5.5. 重复样本和阴性样本检测结果分析 | 第132-133页 |
| 2.5.6. 不同项目检测方法BCR-ABL1定量检测结果分析 | 第133-135页 |
| 2.5.7. IS实验室p210 BCR-ABL1检测结果分析 | 第135-137页 |
| 2.5.8. CF随访结果分析 | 第137-138页 |
| 2.5.9. 参评实验室EQA评分 | 第138-140页 |
| 2.5.10. 质评小结和证书发放 | 第140页 |
| 3. 讨论 | 第140-144页 |
| 参考文献 | 第144-149页 |
| 第三部分 基于Armored RNA技术的白血病BCR-ABL1~(p210/p190)融合基因检测标准品的究制及评估 | 第149-209页 |
| 前言 | 第149-153页 |
| 1. 材料和方法 | 第153-177页 |
| 1.1. 实验材料和试剂配制 | 第153-159页 |
| 1.1.1. 实验仪器 | 第153-154页 |
| 1.1.2. 主要实验耗材 | 第154页 |
| 1.1.3. 主要实验试剂 | 第154-156页 |
| 1.1.4. 培养基和溶液的配制 | 第156-158页 |
| 1.1.5. 菌株和质粒 | 第158-159页 |
| 1.2. 方法 | 第159-177页 |
| 1.2.1. 构建pACYC-MS2-p210FG-CG、pACYC-MS2-p190FG-CG重组质粒 | 第159-166页 |
| 1.2.2. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第166-170页 |
| 1.2.3. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第170-172页 |
| 1.2.4. p210FG-CG、p190FG-CG VLPs的分装与冻干 | 第172页 |
| 1.2.5. p210FG-CG、p190FG-CG标准品的制备及定值 | 第172-174页 |
| 1.2.6. p210FG-CG、p190FG-CG标准品的线性分析 | 第174-176页 |
| 1.2.7. p210FG-CG、p190FG-CG标准品的性能验证 | 第176页 |
| 1.2.8. p210FG-CG、p190FG-CG标准品的区域性试验 | 第176-177页 |
| 1.2.9. 统计学分析 | 第177页 |
| 2. 结果 | 第177-202页 |
| 2.1. pACYC-MS2-p210FG-CG、pACYC-MS2-p190FG-CG重组质粒的验证 | 第177-189页 |
| 2.1.1. PCR验证 | 第177页 |
| 2.1.2. 测序验证 | 第177-189页 |
| 2.2. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第189-190页 |
| 2.3. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第190-192页 |
| 2.3.1. 琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第190页 |
| 2.3.2. SDS-PAGE鉴定 | 第190-191页 |
| 2.3.3. RT-qPCR验证VLPs包装片段 | 第191-192页 |
| 2.4. p210FG-CG和p190FG-CG标准品性能验证 | 第192-193页 |
| 2.4.1. 稳定性实验 | 第192页 |
| 2.4.2. 均一性实验 | 第192-193页 |
| 2.5. p210FG-CG、p190FG-CG标准品定值 | 第193-195页 |
| 2.5.1. p210FG-CG标准品dPCR检测结果 | 第193-194页 |
| 2.5.2. p190FG-CG标准品dPCR检测结果 | 第194-195页 |
| 2.6. p210FG-CG、p190FG-CG标准品的线性分析结果 | 第195-196页 |
| 2.7. p210FG-CG、p190FG-CG标准品的区域性验证结果 | 第196-202页 |
| 2.7.1. 结果回报情况 | 第196-197页 |
| 2.7.2. p210和p190模拟样本转化前后结果分析 | 第197-202页 |
| 3. 讨论 | 第202-205页 |
| 参考文献 | 第205-209页 |
| 第四部分 基于Armored RNA技术的白血病BCR-ABL1~(p210/p190)融合基因检测二级参考物质的制备及标准化研究 | 第209-284页 |
| 前言 | 第209-214页 |
| 1. 材料和方法 | 第214-241页 |
| 1.1. 实验材料和试剂配制 | 第214-220页 |
| 1.1.1. 实验仪器 | 第214-215页 |
| 1.1.2. 主要实验耗材 | 第215页 |
| 1.1.3. 主要实验试剂 | 第215-217页 |
| 1.1.4. 培养基和溶液的配制 | 第217-219页 |
| 1.1.5. 菌株和质粒 | 第219-220页 |
| 1.2. 方法 | 第220-241页 |
| 1.2.1. 构建pACYC-MS2-p210-p190FG、pACYC-MS2-23S重组质粒 | 第220-227页 |
| 1.2.2. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第227-231页 |
| 1.2.3. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第231-233页 |
| 1.2.4. 二级参考物质的制备 | 第233-234页 |
| 1.2.5. 二级参考物质的定值 | 第234-240页 |
| 1.2.6. 二级参考物质的性能验证 | 第240页 |
| 1.2.7. 二级参考物质的区域性试验 | 第240-241页 |
| 1.2.8. 统计学分析 | 第241页 |
| 2. 结果 | 第241-277页 |
| 2.1. pACYC-MS2-23S、pACYC-MS2-p210-p190FG重组质粒的验证 | 第241-250页 |
| 2.1.1. PCR验证 | 第241-242页 |
| 2.1.2. 测序验证 | 第242-250页 |
| 2.2. 重组病毒样颗粒的表达和纯化 | 第250-251页 |
| 2.3. 重组病毒样颗粒的鉴定 | 第251-252页 |
| 2.3.1. 琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第251-252页 |
| 2.3.2. SDS-PAGE鉴定 | 第252页 |
| 2.3.3. RT-qPCR鉴定 | 第252页 |
| 2.4. 二级参考物质定值 | 第252-270页 |
| 2.4.1. 商品化试剂盒定值 | 第252-257页 |
| 2.4.2. 自建方法定值 | 第257-269页 |
| 2.4.3. 商品化试剂盒和LDT对1~(st) WHO国际参考盘和二级参考物质检测结果比较 | 第269-270页 |
| 2.5. 二级参考物质的性能验证 | 第270-271页 |
| 2.5.1. 稳定性实验 | 第270页 |
| 2.5.2. 均一性实验 | 第270-271页 |
| 2.6. 二级参考物质的区域性验证 | 第271-277页 |
| 2.6.1. 结果回报情况 | 第271-272页 |
| 2.6.2. 区域性验证结果分析 | 第272-277页 |
| 3. 讨论 | 第277-280页 |
| 参考文献 | 第280-284页 |
| 论文综述 A novel delivery platform based on Bacteriophage MS2 virus-like particles | 第284-306页 |
| References | 第295-306页 |
| 附录 | 第306-329页 |
| 附录1: pACYCDuet-1载体详细信息 | 第306-308页 |
| 附录2: 关于开展全国登革热病毒核酸检测室间质量评价预研的通知及回执 | 第308-310页 |
| 附录3: 2016年全国登革热病毒核酸检测室间质量评价活动安排及回报表 | 第310-312页 |
| 附录4: 关于开展全国白血病BCR-ABL1~(p210/p190)融合基因检测室间质量评价及一致性研究预研的通知及回执 | 第312-314页 |
| 附录5: 2017年全国白血病BCR-ABL1~(p210/p190)融合基因检测室间质量评价及一致性研究活动安排及回报表 | 第314-319页 |
| 附录6: 关于开展全国白血病BCR-ABL1~(p210/p190)融合基因检测标准化预研的通知及回执 | 第319-321页 |
| 附录7: 2018年白血病BCR-ABL1~(p210/p190)融合基因检测标准化活动安排及回报表 | 第321-329页 |
| 致谢 | 第329-331页 |
| 个人简介 | 第331-332页 |
