| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 中英文对照和缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-34页 |
| 1.1 引言 | 第14页 |
| 1.2 艰难梭菌与艰难梭菌感染 | 第14-18页 |
| 1.2.1 艰难梭菌 | 第14-15页 |
| 1.2.2 艰难梭菌感染及临床症状 | 第15-16页 |
| 1.2.3 艰难梭菌感染的流行病学特征 | 第16-17页 |
| 1.2.4 艰难梭菌感染的诊断与治疗 | 第17-18页 |
| 1.3 艰难梭菌的致病因子及其作用机制 | 第18-20页 |
| 1.3.1 TcdA和TcdB | 第18-19页 |
| 1.3.2 二元毒素 | 第19页 |
| 1.3.3 其它致病因子 | 第19-20页 |
| 1.4 PaLoc区基因对艰难梭菌毒素基因表达的调控作用 | 第20-22页 |
| 1.4.1 TcdD | 第21页 |
| 1.4.2 TcdC | 第21页 |
| 1.4.3 TcdE | 第21-22页 |
| 1.5 外环境变化对艰难梭菌毒素基因表达的调控作用 | 第22-25页 |
| 1.5.1 葡萄糖 | 第22-23页 |
| 1.5.2 氨基酸 | 第23-25页 |
| 1.5.3 其他物质 | 第25页 |
| 1.5.4 培养温度 | 第25页 |
| 1.6 其他基因对艰难梭菌毒素基因表达的调控作用 | 第25-28页 |
| 1.6.1 鞭毛合成相关基因 | 第25-26页 |
| 1.6.2 群体感应系统相关基因 | 第26-27页 |
| 1.6.3 产孢相关基因 | 第27页 |
| 1.6.4 前噬菌体及应激蛋白相关基因 | 第27-28页 |
| 1.7 转录组测序技术及其在艰难梭菌中的应用 | 第28-31页 |
| 1.7.1 转录组测序技术 | 第28-29页 |
| 1.7.2 转录组测序技术在艰难梭菌中的应用 | 第29-31页 |
| 1.8 本论文的研究意义及主要内容 | 第31-34页 |
| 1.8.1 研究目的及意义 | 第31-32页 |
| 1.8.2 主要研究内容 | 第32-33页 |
| 1.8.3 技术路线 | 第33-34页 |
| 第二章 半胱氨酸对艰难梭菌全局基因表达调控的分析 | 第34-60页 |
| 2.1 引言 | 第34-35页 |
| 2.2 材料与方法 | 第35-44页 |
| 2.2.1 菌株和细胞株 | 第35页 |
| 2.2.2 试剂与溶液配制 | 第35-38页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第38页 |
| 2.2.4 实验方法 | 第38-44页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第44-58页 |
| 2.3.1 不同氨基酸对艰难梭菌产毒水平的影响 | 第44-46页 |
| 2.3.2 半胱氨酸对艰难梭菌不同菌株产毒水平的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.3 半胱氨酸对艰难梭菌生长及产毒的影响 | 第47-48页 |
| 2.3.4 半胱氨酸对艰难梭菌全局基因表达调控总体分析 | 第48-51页 |
| 2.3.5 半胱氨酸对艰难梭菌膜转运相关基因表达的影响 | 第51-52页 |
| 2.3.6 半胱氨酸对艰难梭菌代谢相关基因表达的影响 | 第52-56页 |
| 2.3.7 半胱氨酸对艰难梭菌027型菌株特有基因表达的影响 | 第56-57页 |
| 2.3.8 半胱氨酸对艰难梭菌鞭毛及核糖体合成基因表达的影响 | 第57-58页 |
| 2.4 本章小结 | 第58-60页 |
| 第三章 艰难梭菌突变菌株构建及其产毒水平分析 | 第60-72页 |
| 3.1 引言 | 第60-62页 |
| 3.2 材料与方法 | 第62-66页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第62页 |
| 3.2.2 试剂与溶液配制 | 第62-63页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第63页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第63-66页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第66-70页 |
| 3.3.1 内含子序列设计 | 第66-67页 |
| 3.3.2 重组靶向质粒的构建 | 第67-68页 |
| 3.3.3 艰难梭菌突变菌株的构建、筛选及鉴定 | 第68-70页 |
| 3.3.4 艰难梭菌突变菌株产毒水平分析 | 第70页 |
| 3.4 本章小结 | 第70-72页 |
| 第四章 艰难梭菌CdsB功能鉴定及其在产毒调控中的作用 | 第72-90页 |
| 4.1 引言 | 第72-73页 |
| 4.2 材料与方法 | 第73-76页 |
| 4.2.1 菌株和质粒 | 第73页 |
| 4.2.2 试剂与溶液配制 | 第73页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第73-74页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第74-76页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第76-88页 |
| 4.3.1 CdsB蛋白生物信息学分析 | 第76-77页 |
| 4.3.2 半胱氨酸对艰难梭菌cdsB基因转录水平的影响 | 第77-78页 |
| 4.3.3 cdsB基因灭活对半胱氨酸降解酶表达和硫化氢产生的影响 | 第78-79页 |
| 4.3.4 cdsB基因灭活对艰难梭菌生长的影响 | 第79-80页 |
| 4.3.5 cdsB基因灭活对艰难梭菌毒素基因表达的影响 | 第80-81页 |
| 4.3.6 半胱氨酸代谢产物对艰难梭菌产毒水平的影响 | 第81-82页 |
| 4.3.7 cdsB基因的转录调控 | 第82-88页 |
| 4.4 本章小结 | 第88-90页 |
| 第五章 碳存储调控因子CsrA对艰难梭菌毒力的调控作用 | 第90-102页 |
| 5.1 引言 | 第90-91页 |
| 5.2 材料与方法 | 第91-93页 |
| 5.2.1 菌株、质粒和细胞株 | 第91页 |
| 5.2.2 试剂与溶液配制 | 第91页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第91-92页 |
| 5.2.4 实验方法 | 第92-93页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第93-101页 |
| 5.3.1 CsrA蛋白生物信息学分析 | 第93-95页 |
| 5.3.2 艰难梭菌csrA基因过表达菌株构建及鉴定 | 第95-96页 |
| 5.3.3 艰难梭菌csrA基因过表达菌株生长曲线绘制 | 第96页 |
| 5.3.4 csrA基因过表达对艰难梭菌鞭毛及运动性的影响 | 第96-98页 |
| 5.3.5 csrA基因过表达对艰难梭菌产毒水平的影响 | 第98-99页 |
| 5.3.6 csrA基因过表达对艰难梭菌粘附能力的影响 | 第99-100页 |
| 5.3.7 csrA基因过表达对艰难梭菌代谢产物的影响 | 第100-101页 |
| 5.4 本章小结 | 第101-102页 |
| 结论与展望 | 第102-105页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 创新点 | 第103页 |
| 展望 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-130页 |
| 附录 | 第130-147页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第147-149页 |
| 致谢 | 第149-150页 |
| 附件 | 第150页 |
