| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| 1.1 木质纤维素简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 木质纤维素类生物质能源概况 | 第11-13页 |
| 1.1.2 植物木质纤维素的组成和结构 | 第13-14页 |
| 1.2 纤维素酶 | 第14-18页 |
| 1.2.1 纤维素酶的来源和分类 | 第14页 |
| 1.2.2 纤维素酶的结构 | 第14-15页 |
| 1.2.3 纤维素酶的作用机理 | 第15-16页 |
| 1.2.4 耐高温纤维素降解酶 | 第16-18页 |
| 1.3 植物表达纤维素酶的研究 | 第18-23页 |
| 1.3.1 植物表达纤维素酶的特点 | 第18-20页 |
| 1.3.2 植物表达纤维素酶的研究进展 | 第20-23页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 嗜热内切葡聚糖酶基因(E1)植物表达载体的构建 | 第25-43页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第25-27页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂与试剂盒 | 第25-26页 |
| 2.1.3 培养基和抗生素 | 第26页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-38页 |
| 2.2.1 嗜热内切葡聚糖酶基因(E1)的序列优化与全基因合成 | 第27页 |
| 2.2.2 大肠杆菌(Escherichiacoli DH5α)感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.3 ImpactVectors-E1系列表达载体的构建 | 第28-35页 |
| 2.2.4 pBINPLUS-ImpactVectors-E1系列表达载体的构建 | 第35-38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-42页 |
| 2.3.1 嗜热内切葡聚糖酶基因(E1)的密码子优化与合成 | 第38-40页 |
| 2.3.2 ImpactVectors-E1系列表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 2.3.3 pBinplus-ImpactVectors-E1系列表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 2.4 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 嗜热内切葡聚糖酶(E1)的亚细胞定位分析 | 第43-57页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第43-45页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第43-44页 |
| 3.1.3 主要分子试剂及试剂盒 | 第44页 |
| 3.1.4 培养基和抗生素 | 第44页 |
| 3.1.5 主要仪器设备 | 第44-45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-49页 |
| 3.2.1 Cam35S-GFP-IVs-E1植物表达载体的构建 | 第45-48页 |
| 3.2.2 大肠杆菌感受态的制备 | 第48页 |
| 3.2.3 农杆菌感受态细胞的制备 | 第48-49页 |
| 3.2.4 E1-IVs-GFP重组质粒转化农杆菌感受态细胞 | 第49页 |
| 3.2.5 农杆菌介导的洋葱瞬时表达系统及其观察 | 第49页 |
| 3.2.6 农杆菌介导的烟草瞬时表达系统及其观察 | 第49页 |
| 3.3 结果与分析 | 第49-55页 |
| 3.3.1 Cam35S-GFP-IVs-E1植物表达载体的构建 | 第49-51页 |
| 3.3.2 亚细胞定位分析 | 第51-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 3.5 小结 | 第56-57页 |
| 第四章 转基因植物的分子检测及重组酶的酶学性质分析 | 第57-69页 |
| 4.1 实验材料和试剂 | 第57-59页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第57页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第57-58页 |
| 4.1.3 培养基 | 第58页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第58-59页 |
| 4.2 实验方法 | 第59-64页 |
| 4.2.1 农杆菌介导转化拟南芥 | 第59-60页 |
| 4.2.2 转基因拟南芥的分子鉴定 | 第60-62页 |
| 4.2.3 转基因拟南芥的总蛋白提取 | 第62页 |
| 4.2.4 蛋白浓度测定 | 第62-63页 |
| 4.2.5 重组酶的酶活测定 | 第63-64页 |
| 4.3 结果与分析 | 第64-67页 |
| 4.3.1 转基因拟南芥阳性植株与野生型植株的对比 | 第64-65页 |
| 4.3.2 转基因拟南芥的分子鉴定 | 第65-66页 |
| 4.3.3 重组嗜热内切葡聚糖酶的最适反应温度 | 第66页 |
| 4.3.4 重组嗜热内切葡聚糖酶的最适反应pH | 第66-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-68页 |
| 4.5 小结 | 第68-69页 |
| 第五章 总结与展望 | 第69-71页 |
| 5.1 全文总结 | 第69-70页 |
| 5.2 展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第80页 |
