| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 Sall基因家族与Sall4基因 | 第13-19页 |
| 1.1.1 Sall基因家族 | 第13-14页 |
| 1.1.2 Sall4基因 | 第14页 |
| 1.1.3 Sall4基因的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.2 基因Lin28及其研究现状 | 第19-20页 |
| 1.2.1 基因Lin28 | 第19页 |
| 1.2.2 基因Lin28的研究现状 | 第19-20页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-36页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 组织材料 | 第22页 |
| 2.1.2 常用试剂及配制 | 第22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 RNA的提取和检测 | 第23-24页 |
| 2.2.2 RNA反转 | 第24页 |
| 2.2.3 PCR引物 | 第24-26页 |
| 2.2.4 PCR反应 | 第26页 |
| 2.2.5 纯化扩增产物 | 第26-27页 |
| 2.2.6 纯化的扩增产物和pMD18—T载体的连接 | 第27页 |
| 2.2.7 连接产物的转化与筛选 | 第27页 |
| 2.2.8 重组质粒的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.9 重组质粒的酶切鉴定 | 第28页 |
| 2.2.10 3'-RACE获得Sall4基因的3'端片段 | 第28-30页 |
| 2.2.11 5'-RACE获得Sall基因的5'端片段 | 第30-33页 |
| 2.2.12 真核表达载体构建 | 第33页 |
| 2.2.13 逆转录病毒的包装及PEF的感染 | 第33-34页 |
| 2.2.14 IVF胚胎的获取 | 第34页 |
| 2.2.15 卵及各时期胚胎免疫荧光 | 第34页 |
| 2.2.16 Realtime PCR | 第34-35页 |
| 2.2.17 实验数据分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-48页 |
| 3.1 猪卵巢/猪桑葚胚总RNA的纯度 | 第36页 |
| 3.2 猪Sall4b基因及Lin28基因cDNA全序列扩增 | 第36-40页 |
| 3.2.1 猪Sall4b基因的cDNA全序列扩增 | 第36-39页 |
| 3.2.2 猪Lin28基因的cDNA全序列扩增 | 第39-40页 |
| 3.3 基因同源性及系统树分析 | 第40-43页 |
| 3.3.1 Sall4基因同源性及系统树分析 | 第40-42页 |
| 3.3.2 Lin28基因同源性分析 | 第42-43页 |
| 3.4 PMXs-Lin28载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.5 包装Lin28病毒时的转染效率和Lin28病毒对PEF的感染效率的测定 | 第44-45页 |
| 3.6 基因定量表达及其蛋白定位表达与分析 | 第45-48页 |
| 3.6.1 Sall4基因定量及定位表达分析 | 第45-46页 |
| 3.6.2 基因Lin28在感染PMXs-Lin28 PEF细胞系中的表达情况及其对该细胞系中其他基因的影响 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 猪Sall4基因克隆与性质研究 | 第48-49页 |
| 4.1.1 猪Sall4基因的克隆 | 第48页 |
| 4.1.2 Sall4b基因的功能分析 | 第48-49页 |
| 4.2 猪Lin28基因克隆与性质研究 | 第49-51页 |
| 4.2.1 猪Lin28基因的克隆 | 第49-50页 |
| 4.2.2 Lin28在PEF中的过表达对其它基因的影响 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
