摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 前言 | 第9-23页 |
第一节 研究背景综述 | 第9-19页 |
1.1.1 Hippo通路 | 第9-11页 |
1.1.2 STE20家族蛋白激酶和MAPK途径 | 第11-12页 |
1.1.3 拟南芥蛋白激酶SIK1的研究 | 第12-14页 |
1.1.4 拟南芥SIK1功能的探索 | 第14-16页 |
1.1.5 植物激素茉莉酸途径 | 第16-19页 |
第二节 课题的背景及研究意义 | 第19-20页 |
第三节 课题的研究内容及研究方法 | 第20-23页 |
1.3.1 利用基因芯片和RNA-测序进行转录组分析 | 第20-21页 |
1.3.2 实时荧光定量PCR检测基因转录水平 | 第21页 |
1.3.3 SIK1抗体的制备 | 第21页 |
1.3.4 免疫印迹检测蛋白表达 | 第21页 |
1.3.5 生理实验检测外源JA对sik1-4的影响 | 第21-22页 |
1.3.6 遗传学方法分析SIK1与JA途径关系 | 第22页 |
1.3.7 GFP-Trap筛选SIK1的互作蛋白 | 第22-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-37页 |
第一节 实验材料 | 第23-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 工程菌株与载体 | 第23-24页 |
2.1.3 试剂及培养基配方 | 第24-25页 |
2.1.4 抗生素 | 第25页 |
第二节 实验方法 | 第25-37页 |
2.2.1 载体构建 | 第25-26页 |
2.2.2 拟南芥的培养 | 第26-27页 |
2.2.3 转基因拟南芥株系的获得 | 第27页 |
2.2.4 突变体和转基因植物的鉴定 | 第27-29页 |
2.2.5 MeJA处理拟南芥 | 第29页 |
2.2.6 荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基因的转录水平 | 第29-30页 |
2.2.7 蛋白免疫印迹(Western blotting) | 第30-33页 |
2.2.8 sik1-4与JA相关突变体以及转基因株系的杂交 | 第33-34页 |
2.2.9 酵母双杂交(Y2H) | 第34-35页 |
2.2.10 GFP-Trap筛选SIK1互作蛋白 | 第35-37页 |
第三章 实验结果 | 第37-55页 |
第一节 sik1的转录组分析 | 第37-40页 |
第二节 sik1-4中JA途径基因表达以及对外源JA的响应 | 第40-44页 |
第三节 SIK1的转录水平及蛋白水平响应JA | 第44-46页 |
第四节 sik1-4对外源JA超敏感 | 第46-48页 |
第五节 sik1-4与JA途径突变体的杂交 | 第48-50页 |
第六节 SIK1互作蛋白的筛选 | 第50-55页 |
3.6.1 Y2H验证SIK1与JA途径相关蛋白的互作 | 第50-51页 |
3.6.2 GFP-Trap筛选SIK1相互作用蛋白并送质谱分析 | 第51-55页 |
第四章 分析与讨论 | 第55-60页 |
第一节 sik1中JA途径基因转录水平降低且响应JA迟缓 | 第55页 |
第二节 SIK1的转录和翻译水平均受JA诱导 | 第55-56页 |
第三节 sik1-4的根长和萌发均对外源JA超敏感 | 第56-58页 |
第四节 SIK1与JA途径的遗传关系 | 第58页 |
第五节 SIK1互作蛋白的筛选 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
附录A 引物列表 | 第67-70页 |
附录B 硕士期间其他工作 | 第70-76页 |
盐胁迫可以快速诱导自噬 | 第70-76页 |
附B.1.1前言 | 第70-71页 |
附B.1.2实验结果 | 第71-75页 |
附B.1.3分析与讨论 | 第75-76页 |
个人简历 | 第76页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第76页 |