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斑马鱼细胞低温驯化中的表观遗传调控机制研究

摘要第4-8页
ABSTRACT第8-12页
引言第16-18页
第一章 综述第18-33页
    1.1 低温压力对鱼类生理功能的影响第18-20页
    1.2 表观遗传修饰与低温压力第20-23页
    1.3 长非编码RNA(Long noncoding RNAs,lncRNAs)与低温压力第23-24页
    1.4 增强子元件研究进展第24-33页
        1.4.1 增强子作用模型第25页
        1.4.2 介导启动子与增强子识别与接触的分子第25-27页
        1.4.3 增强子的预测第27-28页
        1.4.4 探索染色质空间结构的技术第28-30页
        1.4.5 增强子研究的应用第30-31页
        1.4.6 展望第31-33页
第二章 斑马鱼细胞ZF4中低温驯化相关lncRNAs的筛选与功能预测第33-47页
    2.1 材料与方法第33-38页
        2.1.1 主要试剂第33页
        2.1.2 主要仪器第33-34页
        2.1.3 细胞培养及处理第34页
        2.1.4 RNA-seq第34页
        2.1.5 RNA-seq数据比对和转录本的组装第34页
        2.1.6 lncRNAs的鉴定第34-35页
        2.1.7 lncRNA靶基因预测第35页
        2.1.8 基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因和基因组的百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析第35-36页
        2.1.9 荧光定量PCR(qPCR)第36-38页
    2.2 结果第38-44页
        2.2.1 ZF4细胞中新lncRNAs的鉴定第38-40页
        2.2.2 低温驯化对lncRNAs表达的影响第40-41页
        2.2.3 响应低温压力lncRNAs靶基因预测及功能的分析第41-43页
        2.2.4 qPCR验证低温压力对lncRNA和靶基因的表达影响第43-44页
    2.3 小结与讨论第44-47页
第三章 寒冷驯化对斑马鱼细胞ZF4全基因组组蛋白修饰的影响第47-77页
    3.1 材料与方法第47-56页
        3.1.1 主要试剂第47-48页
        3.1.2 主要仪器第48-49页
        3.1.3 抗体第49页
        3.1.4 试剂配制第49-50页
        3.1.5 细胞培养与处理第50页
        3.1.6 Westernblotting第50-52页
        3.1.7 染色质免疫共沉淀第52-53页
        3.1.8 建库与测序第53页
        3.1.9 ChIP-seq数据处理第53-54页
        3.1.10 基因集富集分析(Genes etenrichment analysis,GSEA)第54页
        3.1.11 GO与KEGG富集分析第54页
        3.1.12 qPCR第54-55页
        3.1.13 ChIP-qPCR第55-56页
        3.1.14 增强子预测第56页
    3.2 结果第56-73页
        3.2.1 全基因组整体组蛋白修饰变化第56-58页
        3.2.2 Western blotting检测低温处理后组蛋白修饰变化第58页
        3.2.3 组蛋白修饰差异富集分析第58-60页
        3.2.4 组蛋白修饰差异富集位点在基因组上的分布第60-63页
        3.2.5 GSEA分析第63-65页
        3.2.6 ChIP-qPCR与qPCR验证第65-66页
        3.2.7 差异组蛋白修饰的GO和KEGG富集分析第66-71页
        3.2.8 冷驯化相关增强子元件预测与功能分析第71-73页
    3.3 小结与讨论第73-77页
结论第77-78页
参考文献第78-91页
博士期间发表的文章第91-92页
致谢第92页

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