| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第1章 前言 | 第7-12页 |
| 1.1 核糖体 | 第7-9页 |
| 1.1.1 核糖体的结构 | 第7-8页 |
| 1.1.2 核糖体的生物合成 | 第8-9页 |
| 1.2 核糖蛋白及“ribosomecode”假说 | 第9-10页 |
| 1.3 核糖体组分的其他功能 | 第10-11页 |
| 1.4 本课题研究目的及意义 | 第11-12页 |
| 第2章 材料与方法 | 第12-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第12-22页 |
| 2.1.1 质粒 | 第12-13页 |
| 2.1.2 菌种 | 第13页 |
| 2.1.3 引物序列 | 第13页 |
| 2.1.4 化学试剂及酶 | 第13-14页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第14页 |
| 2.1.6 培养基 | 第14-17页 |
| 2.1.7 试剂的配制 | 第17-21页 |
| 2.1.8 抗体、短肽和Co-IP相关柱子 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-36页 |
| 2.2.1 生物学软件分析 | 第22页 |
| 2.2.2 引物设计与PCR反应 | 第22-23页 |
| 2.2.3 DNA产物回收纯化 | 第23页 |
| 2.2.4 质粒DNA纯化回收 | 第23-24页 |
| 2.2.5 酶切体系 | 第24页 |
| 2.2.6 酶连体系 | 第24页 |
| 2.2.7 大肠杆菌DH5α的感受态细胞的制备以及转化 | 第24-25页 |
| 2.2.8 大肠杆菌落PCR | 第25-26页 |
| 2.2.9 酵母电转化 | 第26-27页 |
| 2.2.10 酵母菌落PCR | 第27页 |
| 2.2.11 酵母基因组DNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.12 Spottingassay | 第28-29页 |
| 2.2.13 热酚法提取酵母总RNA | 第29-30页 |
| 2.2.14 RNA变性电泳 | 第30页 |
| 2.2.15 polysomeanalysis | 第30-31页 |
| 2.2.16 Westernblot | 第31-34页 |
| 2.2.17 免疫共沉淀(Co-IP)亲和纯化核糖体 | 第34-36页 |
| 第3章 结果与分析 | 第36-51页 |
| 3.1 课题前期工作介绍 | 第36-37页 |
| 3.2 实验结果 | 第37-51页 |
| 3.2.1 筛选得到正确的酵母菌株 | 第37页 |
| 3.2.2 检查得到的菌株的各项生理性质 | 第37-39页 |
| 3.2.3 Polysomeanalysis分析双加标签菌的核糖体组装情况 | 第39-42页 |
| 3.2.4 分析RPL36A和RPL36B所组装的核糖体蛋白组成上的差异 | 第42-44页 |
| 3.2.5 另两个含有双RPL36蛋白的细胞内核糖体组成 | 第44-46页 |
| 3.2.6 验证质谱结果中与核糖体上特异结合的蛋白 | 第46-48页 |
| 3.2.7 两种不同核糖体对mRNA翻译的选择偏好性 | 第48-51页 |
| 第4章 讨论与展望 | 第51-53页 |
| 4.1 讨论 | 第51-52页 |
| 4.2 展望 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
