| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| 1.1 被子植物花粉发育与授粉受精的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.1.1 花粉发育的研究 | 第14-15页 |
| 1.1.2 授粉受精 | 第15-16页 |
| 1.1.3 成熟的花粉粒中mRNA的转录后调控及储运 | 第16页 |
| 1.1.4 花粉发育的分子机理的研究 | 第16-19页 |
| 1.2 植物多铜氧化酶的研究 | 第19-20页 |
| 1.2.1 多铜氧化酶的家族成员 | 第19页 |
| 1.2.2 MCO生物学功能的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2.3 MCO家族的亚家族成员—SKS基因家族 | 第20页 |
| 1.3 拟南芥T-DNA插入突变体的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3.1 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第21页 |
| 1.3.2 拟南芥T-DNA插入突变体在花粉发育以及授粉受精过程中的应用 | 第21页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 大白菜花粉发育相关基因BrSKS13的表达分析 | 第23-37页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-30页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 DNA提取 | 第23-24页 |
| 2.1.3 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第24页 |
| 2.1.4 目的基因cDNA和DNA序列的克隆测序 | 第24-26页 |
| 2.1.5 目的基因RT-PCR分析 | 第26页 |
| 2.1.6 qRT-PCR分析BrSKS13在大白菜中的表达 | 第26-27页 |
| 2.1.7 原位杂交 | 第27-30页 |
| 2.2 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.2.1 BrSKS13的全长cDNA和DNA序列的获得及分析 | 第30-32页 |
| 2.2.2 BrSKS13在可育和不育株各个组织的表达 | 第32页 |
| 2.2.3 BrSKS13在可育株各个花器官中的表达 | 第32-33页 |
| 2.2.4 BrSKS13在可育株和不育株各级花药的表达 | 第33-34页 |
| 2.2.5 qRT-PCR分析BrSKS13在大白菜中的表达模式 | 第34-35页 |
| 2.2.6 BrSKS13在成熟花粉及花粉管中的表达 | 第35页 |
| 2.3 小结 | 第35-37页 |
| 第三章 拟南芥纯合突变体sks13的鉴定 | 第37-42页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-38页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.2 拟南芥的培养 | 第37页 |
| 3.1.3 “三引物法”鉴定纯合突变体 | 第37-38页 |
| 3.1.4 纯合突变体和野生型植株的表型观察 | 第38页 |
| 3.1.5 拟南芥花粉的采集,观察及体外萌发 | 第38页 |
| 3.1.6 纯合突变体角果及剖面图的观察 | 第38页 |
| 3.2 结果与分析 | 第38-41页 |
| 3.2.1 纯合突变体的筛选 | 第38-39页 |
| 3.2.2 纯合突变体和野生型表型 | 第39-40页 |
| 3.2.3 纯合突变体花粉表型及花粉萌发 | 第40页 |
| 3.2.4 纯合突变体的结荚情况 | 第40-41页 |
| 3.3 小结 | 第41-42页 |
| 第四章 大白菜BrSKS13的功能验证 | 第42-49页 |
| 4.1 材料与方法 | 第42-44页 |
| 4.1.1 过表达载体的构建 | 第42页 |
| 4.1.2 热激法转化农杆菌 | 第42页 |
| 4.1.3 根癌农杆菌悬浮液的制备 | 第42-43页 |
| 4.1.4 蘸花法转化拟南芥 | 第43页 |
| 4.1.5 转基因植株的获得 | 第43页 |
| 4.1.6 转基因植株表型观察 | 第43页 |
| 4.1.7 转基因植株GUS染色 | 第43-44页 |
| 4.1.8 转基因植株花粉的形态学观察及花粉萌发 | 第44页 |
| 4.2 结果与分析 | 第44-48页 |
| 4.2.1 过表达载体的构建及PCR检测 | 第44-45页 |
| 4.2.2 转基因植株的筛选 | 第45页 |
| 4.2.3 转基因植株的表型 | 第45-46页 |
| 4.2.4 转基因植株GUS染色分析 | 第46-47页 |
| 4.2.5 转基因植株花粉表型及花粉萌发 | 第47页 |
| 4.2.6 转基因植株结荚情况的鉴定 | 第47-48页 |
| 4.3 小结 | 第48-49页 |
| 讨论 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第57-58页 |
