| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第14-20页 |
| 1.1 草莓镶脉病毒研究现状 | 第14-15页 |
| 1.1.1 草莓镶脉病毒基本特征、分布及危害 | 第14页 |
| 1.1.2 草莓镶脉病毒基因组结构 | 第14-15页 |
| 1.2 病毒载体与病毒侵染性克隆 | 第15-16页 |
| 1.2.1 植物病毒载体 | 第15页 |
| 1.2.2 植物病毒侵染性克隆 | 第15-16页 |
| 1.3 P6蛋白在CaMVORFs翻译中的作用 | 第16页 |
| 1.4 植物病毒致病因子与寄主因子的互作 | 第16-17页 |
| 1.5 植物半胱氨酸蛋白酶的生物学特性及功能 | 第17-20页 |
| 1.5.1 半胱氨酸蛋白酶的结构和性质 | 第17页 |
| 1.5.2 半胱氨酸蛋白酶参与蛋白积累和降解 | 第17页 |
| 1.5.3 半胱氨酸蛋白酶对非生物胁迫和生物胁迫的响应 | 第17-18页 |
| 1.5.4 半胱氨酸蛋白酶参与衰老 | 第18页 |
| 1.5.5 半胱氨酸蛋白酶与病原菌互作调控PCD | 第18-19页 |
| 1.5.6 半胱氨酸蛋白酶与抗性途径的关系 | 第19-20页 |
| 2 引言 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-28页 |
| 3.1 供试材料 | 第21页 |
| 3.1.1 SVBV病样来源 | 第21页 |
| 3.1.2 植物材料 | 第21页 |
| 3.1.3 菌种、质粒 | 第21页 |
| 3.1.4 酶和化学试剂 | 第21页 |
| 3.1.5 抗生素使用 | 第21页 |
| 3.1.6 实验设备 | 第21页 |
| 3.2 试验方法 | 第21-28页 |
| 3.2.1 提取带毒草莓叶片总DNA | 第21-22页 |
| 3.2.2 本氏烟总RNA提取 | 第22页 |
| 3.2.3 合成cDNA | 第22页 |
| 3.2.4 PCR产物回收、纯化 | 第22页 |
| 3.2.5 PCR产物连接线性化载体 | 第22页 |
| 3.2.6 制备大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第22-23页 |
| 3.2.7 连接产物转化DH5α | 第23页 |
| 3.2.8 阳性克隆的PCR鉴定 | 第23页 |
| 3.2.9 质粒提取及鉴定 | 第23页 |
| 3.2.10 农杆菌瞬时浸润 | 第23页 |
| 3.2.11 SVBV侵染性克隆接种森林草莓 | 第23页 |
| 3.2.12 SVBV安徽分离物全长基因组克隆 | 第23-25页 |
| (一)SVBV的扩增引物 | 第23-24页 |
| (二)SVBV全长序列的克隆 | 第24页 |
| (三)SVBV分离物的序列分析 | 第24页 |
| (四)SVBV-AH侵染性克隆的构建 | 第24-25页 |
| 3.2.13 RD21载体构建 | 第25-26页 |
| 3.2.14 酵母双杂交实验(Yeasttwo-hybridsystem,Y2H) | 第26-27页 |
| 3.2.15 本氏烟的转化和生根 | 第27-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-45页 |
| 4.1 SVBV安徽分离物的全长基因组克隆 | 第28-31页 |
| 4.1.1 SVBV-AH全长基因组的克隆 | 第28页 |
| 4.1.2 SVBV-AH的序列分析 | 第28-31页 |
| 4.2 SVBV-AH侵染性克隆构建与侵染性鉴定 | 第31-34页 |
| 4.2.1 SVBV-AH侵染性克隆的构建 | 第31-32页 |
| 4.2.2 SVBV-AH 侵染性克隆接种验证 | 第32-34页 |
| 4.3 SVBVP6蛋白与森林草莓半胱氨酸蛋白酶RD21互作机制研究 | 第34-45页 |
| 4.3.1 酵母双杂交(Y2H)验证P6蛋白与RD21蛋白互作 | 第34-37页 |
| 4.3.2 森林草莓半胱氨酸蛋白酶RD21基因的序列比较及分子进化分析 | 第37-39页 |
| 4.3.3 半胱氨酸蛋白酶RD21基因在SVBV侵染的森林草莓中的差异表达 | 第39-40页 |
| 4.3.4 半胱氨酸蛋白酶RD21亚细胞定位及与P6蛋白共定位分析 | 第40-42页 |
| 4.3.5 森林草莓半胱氨酸蛋白酶RD21抑制P6在植物体内的表达 | 第42-43页 |
| 4.3.6 森林草莓RD21基因转化本氏烟工作 | 第43-45页 |
| 5 讨论 | 第45-48页 |
| 5.1 SVBV基因组序列变异 | 第45页 |
| 5.2 SVBV-AH分离物侵染性 | 第45-46页 |
| 5.3 SVBVP6蛋白与森林草莓RD21蛋白互作验证 | 第46页 |
| 5.4 森林草莓RD21基因的分子进化分析 | 第46页 |
| 5.5 森林草莓RD21基因在SVBV侵染的森林草莓中差异表达分析 | 第46页 |
| 5.6 森林草莓RD21亚细胞定位及与P6蛋白共定位分析 | 第46-47页 |
| 5.7 森林草莓半胱氨酸蛋白酶RD21影响P6蛋白在植物体内的表达 | 第47-48页 |
| 6 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
