| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 植物花青素概述 | 第11-13页 |
| 1.2 植物花青素合成途径 | 第13-15页 |
| 1.3 花青素生物合成中的关键转录因子 | 第15-20页 |
| 1.3.1 MYB转录因子 | 第16-18页 |
| 1.3.2 bHLH转录因子 | 第18-19页 |
| 1.3.3 WD40转录因子 | 第19-20页 |
| 1.4 花青素生物合成中的关键结构基因 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23-24页 |
| 2.1.2 菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 载体 | 第24页 |
| 2.1.4 培养基配方 | 第24页 |
| 2.1.4.1 遗传转化体系组织培养基配方 | 第24页 |
| 2.1.4.2 LB培养基 | 第24页 |
| 2.1.5 引物 | 第24页 |
| 2.1.6 抗生素 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-34页 |
| 2.2.1 CTAB法提取植物总DNA | 第25页 |
| 2.2.2 Trizol法提取植物RNA | 第25-26页 |
| 2.2.3 cDNA第一链合成 | 第26-27页 |
| 2.2.3.1 荧光定量PCRcDNA第一链合成 | 第26页 |
| 2.2.3.2 PCRcDNA第一链合成 | 第26-27页 |
| 2.2.4 PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2.2.5 PCR产物回收 | 第28页 |
| 2.2.6 连接克隆载体 | 第28页 |
| 2.2.7 热激法转化大肠杆菌DH5α及阳性克隆筛选 | 第28页 |
| 2.2.8 菌落PCR验证阳性克隆 | 第28-29页 |
| 2.2.9 质粒提取 | 第29-30页 |
| 2.2.10 质粒酶切及过表达载体构建 | 第30页 |
| 2.2.11 农杆菌感受态制备 | 第30-31页 |
| 2.2.12 冻融法转化农杆菌及阳性克隆检测 | 第31页 |
| 2.2.13 茄子遗传转化及转基因植株的获得 | 第31-32页 |
| 2.2.13.1 茄子的遗传转化 | 第31-32页 |
| 2.2.13.2 转基因植株验证 | 第32页 |
| 2.2.14 茄皮花青素、类黄酮及总酚含量测定 | 第32页 |
| 2.2.15 茄子抗氧化能力测定 | 第32-34页 |
| 2.2.15.1 福林酚法测定总酚酸 | 第33页 |
| 2.2.15.2 DPPH·自由基清除速率 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-48页 |
| 3.1 不同茄子品种茄皮总酚、类黄酮和花青素含量分析 | 第34-36页 |
| 3.2 不同茄子品种总多酚含量和DPPH·自由基清除率分析 | 第36-37页 |
| 3.3 SmMYB6全长克隆和过表达载体构建 | 第37-39页 |
| 3.3.1 SmMYB6全长克隆 | 第37-38页 |
| 3.3.2 pRII-SmMYB6过表达载体构建 | 第38-39页 |
| 3.4 农杆菌介导法获得SmMYB6过表达转基因茄子株系 | 第39-45页 |
| 3.4.1 无菌苗培养及预培养 | 第39页 |
| 3.4.2 侵染与共培养 | 第39页 |
| 3.4.3 分化及选择培养 | 第39-40页 |
| 3.4.4 再生苗的驯化移栽 | 第40-41页 |
| 3.4.5 转基因植株鉴定 | 第41-45页 |
| 3.4.5.1 过表达转基因植株PCR验证 | 第41-42页 |
| 3.4.5.2 转基因株系表型鉴定 | 第42-43页 |
| 3.4.5.3 转基因株系果实表型鉴定 | 第43-45页 |
| 3.5 转基因植株荧光定量验证 | 第45-48页 |
| 3.5.1 转基因愈伤组织荧光定量验证 | 第45-46页 |
| 3.5.1.1 SmMYB6转录因子荧光定量验证 | 第45-46页 |
| 3.5.1.2 转基因愈伤组织结构基因荧光定量验证 | 第46页 |
| 3.5.2 转基因植株荧光定量验证 | 第46-48页 |
| 3.5.2.1 SmMYB6转录因子荧光定量验证 | 第46-47页 |
| 3.5.2.2 过表达转基因植株结构基因荧光定量验证 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-53页 |
| 4.1 不同茄子品种茄皮花青素与抗氧化能力分析 | 第48-49页 |
| 4.2 茄子遗传转化体系构建 | 第49-50页 |
| 4.3 SmMYB6在茄子花青素生物合成中的作用 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第68页 |
