| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-26页 |
| 1.1 非编码RNA | 第14-20页 |
| 1.1.1 miRNAs的生物发生与特点 | 第15-17页 |
| 1.1.2 miRNAs的生物学功能 | 第17-20页 |
| 1.2 miRNAs与骨稳态调控 | 第20-22页 |
| 1.2.1 miRNAs调控成骨分化 | 第20-22页 |
| 1.3 IFITM5基因 | 第22-25页 |
| 1.3.1 IFITM家族 | 第22-23页 |
| 1.3.2 IFITM5的功能与机制 | 第23-25页 |
| 1.3.3 IFITM5与V型成骨不全 | 第25页 |
| 1.4 实验室前期研究 | 第25-26页 |
| 第二章 IFITM5在Saos-2细胞矿化过程中的表达 | 第26-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 细胞 | 第26页 |
| 2.1.2 试剂 | 第26-28页 |
| 2.1.3 相关仪器与耗材 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-37页 |
| 2.2.1 Saos-2细胞的培养 | 第29-31页 |
| 2.2.2 茜素红染色及定量 | 第31-32页 |
| 2.2.3 碱性磷酸酶染色及活性检测 | 第32-33页 |
| 2.2.4 VonKossa染色 | 第33页 |
| 2.2.5 成骨标志基因mRNA的表达分析 | 第33-35页 |
| 2.2.6 成骨基因相关蛋白的表达分析 | 第35-37页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-40页 |
| 2.3.1 茜素红染色及定量 | 第37-38页 |
| 2.3.2 VonKossa染色 | 第38页 |
| 2.3.3 碱性磷酸酶染色及活性检测 | 第38-39页 |
| 2.3.4 成骨相关基因的表达分析 | 第39-40页 |
| 2.3.5 IFITM5在Saos-2细胞矿化过程中的差异性表达 | 第40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-44页 |
| 第三章 miR-4316靶向IFITM5对Saos-2细胞矿化的影响 | 第44-54页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 细胞 | 第44页 |
| 3.1.2 试剂 | 第44页 |
| 3.1.3 相关仪器与耗材 | 第44-45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 Saos-2细胞种板与培养 | 第45页 |
| 3.2.2 Saos-2细胞瞬时转染 | 第45页 |
| 3.2.3 miR-4316定量检测 | 第45-47页 |
| 3.2.4 miR-4316在Saos-2细胞中的表达分析 | 第47页 |
| 3.2.5 miR-4316转染Saos-2细胞的茜素红染色及定量 | 第47页 |
| 3.2.6 miR-4316转染Saos-2细胞的ALP染色及活性检测 | 第47页 |
| 3.2.7 miR-4316转染Saos-2细胞的VonKossa染色 | 第47页 |
| 3.2.8 miR-4316转染Saos-2细胞后矿化标志基因的表达分析 | 第47页 |
| 3.2.9 miR-4316转染Saos-2细胞后Runx2和IFITM5的蛋白表达 | 第47页 |
| 3.2.10 统计学分析 | 第47-48页 |
| 3.3 实验结果 | 第48-51页 |
| 3.3.1 miR-4316在Saos-2细胞矿化过程的表达分析 | 第48页 |
| 3.3.2 miR-4316转染Saos-2细胞的茜素红染色与定量 | 第48-49页 |
| 3.3.3 miR-4316转染Saos-2细胞的VonKossa染色 | 第49页 |
| 3.3.4 miR-4316转染Saos-2细胞的ALP染色与定量 | 第49页 |
| 3.3.5 miR4316对成骨基因表达的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.6 miR4316对靶基因IFITM5表达的影响 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-54页 |
| 第四章 miR-4316与IFITM5在小鼠不同组织器官中的表达 | 第54-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 4.1.1 试剂 | 第54页 |
| 4.1.2 相关仪器与耗材 | 第54-55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-57页 |
| 4.2.1 小鼠组织器官获取及RNA提取 | 第55-56页 |
| 4.2.2 miR-4316在小鼠不同组织器官中的表达分析 | 第56页 |
| 4.2.3 IFITM5在小鼠不同组织器官中的表达分析 | 第56页 |
| 4.2.4 数据分析 | 第56-57页 |
| 4.3 实验结果 | 第57页 |
| 4.3.1 miR-4316与IFITM5在小鼠不同组织器官中的相对表达 | 第57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-72页 |
| 附表 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
