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桑黄三萜生物合成途径关键酶基因的挖掘及分析

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
1 绪论第14-24页
    1.1 桑黄的研究现状第14-19页
        1.1.1 桑黄的种类第14-15页
        1.1.2 桑黄的药理活性作用第15-16页
        1.1.3 桑黄的主要药用成分第16-17页
        1.1.4 桑黄的人工栽培现状第17页
        1.1.5 桑黄分子生物学方面的研究进展第17-18页
        1.1.6 桑黄的资源价值、经济价值与发展前景第18-19页
    1.2 药用植物三萜化合物的研究现状第19-22页
        1.2.1 三萜结构类型及合成途径第19-20页
        1.2.2 MVA途径中关键酶的研究第20-22页
        1.2.3 三萜途径中细胞色素P450(CYP450)研究进展第22页
    1.3 本研究的目的意义第22-24页
2 桑黄三萜生物合成关键酶基因的挖掘第24-32页
    2.1 材料与方法第24页
        2.1.1 基因信息来源第24页
        2.1.2 桑黄三萜合成关键酶基因的挖掘第24页
    2.2 结果与分析第24-31页
        2.2.1 KEGG注释中与萜类合成相关的代谢通路第24-25页
        2.2.2 桑黄三萜骨架合成基因的挖掘第25-30页
        2.2.3 参与桑黄三萜合成的下游基因搜索第30-31页
    2.3 讨论第31页
    2.4 本章小结第31-32页
3 桑黄三萜合成关键酶基因在不同发育阶段的表达特性分析第32-42页
    3.1 材料与方法第32-37页
        3.1.1 材料第32-33页
        3.1.2 方法第33-37页
    3.2 结果与分析第37-40页
        3.2.1 桑黄子实体人工栽培第37-38页
        3.2.2 桑黄不同发育阶段总RNA的提取及检测第38-39页
        3.2.3 桑黄三萜合成关键酶基因在不同发育阶段的表达分析第39-40页
    3.3 讨论第40-41页
    3.4 本章小结第41-42页
4 茉莉酸甲酯对桑黄三萜生物合成的影响第42-49页
    4.1 材料与方法第42-44页
        4.1.1 材料第42-43页
        4.1.2 方法第43-44页
    4.2 结果与分析第44-47页
        4.2.1 标准曲线的绘制第44页
        4.2.2 不同浓度MeJA对菌丝体三萜含量的影响第44-45页
        4.2.3 不同浓度MeJA诱导条件下基因转录水平变化第45-46页
        4.2.4 不同时间MeJA诱导条件下基因转录水平变化第46-47页
    4.3 讨论第47-48页
    4.4 本章小结第48-49页
5 桑黄三萜合成关键酶基因HMGS和SE的克隆与分析第49-78页
    5.1 材料与方法第49-58页
        5.1.1 材料第49-50页
        5.1.2 试验方法第50-58页
    5.2 结果与分析第58-76页
        5.2.1 总RNA的提取及检测第58页
        5.2.2 HMGS基因的克隆第58-62页
        5.2.3 HMGS基因的生物信息学分析第62-67页
        5.2.4 SE基因的克隆第67-71页
        5.2.5 SE基因的生物信息学分析第71-76页
    5.3 讨论第76-77页
    5.4 本章小结第77-78页
6 桑黄SE基因的原核表达第78-90页
    6.1 材料与方法第78-84页
        6.1.1 材料第78-80页
        6.1.2 试验方法第80-84页
    6.2 结果与分析第84-88页
        6.2.1 重组质粒pMD18-T-SE的获得第84-86页
        6.2.2 桑黄SE基因原核表达载体的构建第86-87页
        6.2.3 桑黄SE基因原核表达载体的诱导表达第87-88页
    6.3 讨论第88-89页
    6.4 本章小结第89-90页
7 桑黄SE基因过表达载体的构建第90-104页
    7.1 材料与方法第90-98页
        7.1.1 材料第90-93页
        7.1.2 方法第93-98页
    7.2 结果与分析第98-102页
        7.2.1 香菇gpd启动子克隆第98-99页
        7.2.2 重组质粒pCAMBIA 1301-gpd的检测第99-100页
        7.2.3 重组质粒pCAMBIA 1301-gpd-gpd的检测第100-101页
        7.2.4 过表达载体pCAMBIA 1301-gpd-gpd-SE的检测第101-102页
    7.3 讨论第102-103页
    7.4 本章小结第103-104页
结论第104-106页
参考文献第106-115页
附录第115-123页
攻读学位期间发表的学术论文第123-124页
致谢第124-125页

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