摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
1 绪论 | 第14-24页 |
1.1 桑黄的研究现状 | 第14-19页 |
1.1.1 桑黄的种类 | 第14-15页 |
1.1.2 桑黄的药理活性作用 | 第15-16页 |
1.1.3 桑黄的主要药用成分 | 第16-17页 |
1.1.4 桑黄的人工栽培现状 | 第17页 |
1.1.5 桑黄分子生物学方面的研究进展 | 第17-18页 |
1.1.6 桑黄的资源价值、经济价值与发展前景 | 第18-19页 |
1.2 药用植物三萜化合物的研究现状 | 第19-22页 |
1.2.1 三萜结构类型及合成途径 | 第19-20页 |
1.2.2 MVA途径中关键酶的研究 | 第20-22页 |
1.2.3 三萜途径中细胞色素P450(CYP450)研究进展 | 第22页 |
1.3 本研究的目的意义 | 第22-24页 |
2 桑黄三萜生物合成关键酶基因的挖掘 | 第24-32页 |
2.1 材料与方法 | 第24页 |
2.1.1 基因信息来源 | 第24页 |
2.1.2 桑黄三萜合成关键酶基因的挖掘 | 第24页 |
2.2 结果与分析 | 第24-31页 |
2.2.1 KEGG注释中与萜类合成相关的代谢通路 | 第24-25页 |
2.2.2 桑黄三萜骨架合成基因的挖掘 | 第25-30页 |
2.2.3 参与桑黄三萜合成的下游基因搜索 | 第30-31页 |
2.3 讨论 | 第31页 |
2.4 本章小结 | 第31-32页 |
3 桑黄三萜合成关键酶基因在不同发育阶段的表达特性分析 | 第32-42页 |
3.1 材料与方法 | 第32-37页 |
3.1.1 材料 | 第32-33页 |
3.1.2 方法 | 第33-37页 |
3.2 结果与分析 | 第37-40页 |
3.2.1 桑黄子实体人工栽培 | 第37-38页 |
3.2.2 桑黄不同发育阶段总RNA的提取及检测 | 第38-39页 |
3.2.3 桑黄三萜合成关键酶基因在不同发育阶段的表达分析 | 第39-40页 |
3.3 讨论 | 第40-41页 |
3.4 本章小结 | 第41-42页 |
4 茉莉酸甲酯对桑黄三萜生物合成的影响 | 第42-49页 |
4.1 材料与方法 | 第42-44页 |
4.1.1 材料 | 第42-43页 |
4.1.2 方法 | 第43-44页 |
4.2 结果与分析 | 第44-47页 |
4.2.1 标准曲线的绘制 | 第44页 |
4.2.2 不同浓度MeJA对菌丝体三萜含量的影响 | 第44-45页 |
4.2.3 不同浓度MeJA诱导条件下基因转录水平变化 | 第45-46页 |
4.2.4 不同时间MeJA诱导条件下基因转录水平变化 | 第46-47页 |
4.3 讨论 | 第47-48页 |
4.4 本章小结 | 第48-49页 |
5 桑黄三萜合成关键酶基因HMGS和SE的克隆与分析 | 第49-78页 |
5.1 材料与方法 | 第49-58页 |
5.1.1 材料 | 第49-50页 |
5.1.2 试验方法 | 第50-58页 |
5.2 结果与分析 | 第58-76页 |
5.2.1 总RNA的提取及检测 | 第58页 |
5.2.2 HMGS基因的克隆 | 第58-62页 |
5.2.3 HMGS基因的生物信息学分析 | 第62-67页 |
5.2.4 SE基因的克隆 | 第67-71页 |
5.2.5 SE基因的生物信息学分析 | 第71-76页 |
5.3 讨论 | 第76-77页 |
5.4 本章小结 | 第77-78页 |
6 桑黄SE基因的原核表达 | 第78-90页 |
6.1 材料与方法 | 第78-84页 |
6.1.1 材料 | 第78-80页 |
6.1.2 试验方法 | 第80-84页 |
6.2 结果与分析 | 第84-88页 |
6.2.1 重组质粒pMD18-T-SE的获得 | 第84-86页 |
6.2.2 桑黄SE基因原核表达载体的构建 | 第86-87页 |
6.2.3 桑黄SE基因原核表达载体的诱导表达 | 第87-88页 |
6.3 讨论 | 第88-89页 |
6.4 本章小结 | 第89-90页 |
7 桑黄SE基因过表达载体的构建 | 第90-104页 |
7.1 材料与方法 | 第90-98页 |
7.1.1 材料 | 第90-93页 |
7.1.2 方法 | 第93-98页 |
7.2 结果与分析 | 第98-102页 |
7.2.1 香菇gpd启动子克隆 | 第98-99页 |
7.2.2 重组质粒pCAMBIA 1301-gpd的检测 | 第99-100页 |
7.2.3 重组质粒pCAMBIA 1301-gpd-gpd的检测 | 第100-101页 |
7.2.4 过表达载体pCAMBIA 1301-gpd-gpd-SE的检测 | 第101-102页 |
7.3 讨论 | 第102-103页 |
7.4 本章小结 | 第103-104页 |
结论 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-115页 |
附录 | 第115-123页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第123-124页 |
致谢 | 第124-125页 |