| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 本论文所用英文缩写单词表 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 miRNA的检测意义 | 第12-14页 |
| 1.2 脱氧核酶荧光探针用于细胞内传感 | 第14-16页 |
| 1.3 脱氧核酶荧光探针用于细胞内传感的基础 | 第16-17页 |
| 1.4 脱氧核酶荧光探针用于细胞内传感的研究 | 第17-23页 |
| 1.4.1 脱氧核酶荧光探针用于细胞内金属离子的检测 | 第17-20页 |
| 1.4.2 脱氧核酶荧光探针用于细胞内核酸的检测 | 第20-22页 |
| 1.4.3 脱氧核酶荧光探针用于细胞内其它物质的检测 | 第22-23页 |
| 1.5 本文拟开展的研究工作 | 第23-24页 |
| 第2章 基于金纳米颗粒的裂开型脱氧核酶探针用于细胞内miRNA-21的放大检测 | 第24-41页 |
| 2.1 前言 | 第24页 |
| 2.2 实验部分 | 第24-31页 |
| 2.2.1 主要试剂和仪器 | 第24-27页 |
| 2.2.2 缓冲溶液的配制 | 第27页 |
| 2.2.3 细胞的培养 | 第27-28页 |
| 2.2.4 金纳米颗粒的合成与表征 | 第28页 |
| 2.2.5 纳米探针的制备与表征 | 第28页 |
| 2.2.6 金纳米颗粒表面修饰的DNA双链数量的确定 | 第28-29页 |
| 2.2.7 凝胶电泳实验 | 第29页 |
| 2.2.8 荧光实验 | 第29页 |
| 2.2.9 探针稳定性分析 | 第29-30页 |
| 2.2.10 细胞TEM成像 | 第30页 |
| 2.2.11 探针的细胞毒性分析 | 第30页 |
| 2.2.12 激光共聚焦成像分析 | 第30-31页 |
| 2.2.13 流式细胞术分析 | 第31页 |
| 2.2.14 实时荧光定量PCR分析 | 第31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-40页 |
| 2.3.1 实验原理 | 第31-32页 |
| 2.3.2 纳米探针的合成与表征 | 第32-33页 |
| 2.3.3 实验可行性的验证 | 第33-34页 |
| 2.3.4 探针在体外对miRNA-21的检测 | 第34-35页 |
| 2.3.5 探针稳定性分析 | 第35页 |
| 2.3.6 细胞毒性分析 | 第35-36页 |
| 2.3.7 细胞内荧光共定位成像 | 第36-37页 |
| 2.3.8 最佳成像时间的优化 | 第37-38页 |
| 2.3.9 细胞内荧光特异性分析 | 第38-39页 |
| 2.3.10 探针在不同细胞内对miRNA-21的成像分析 | 第39-40页 |
| 2.4 小结 | 第40-41页 |
| 第3章 脱氧核酶级联放大体系用于细胞内miRNA-141的高灵敏检测 | 第41-57页 |
| 3.1 前言 | 第41页 |
| 3.2 实验部分 | 第41-46页 |
| 3.2.1 主要试剂和仪器 | 第41-43页 |
| 3.2.2 缓冲溶液的配制 | 第43页 |
| 3.2.3 细胞的培养 | 第43-44页 |
| 3.2.4 可行性验证实验 | 第44页 |
| 3.2.5 动力学考察 | 第44页 |
| 3.2.6 体外标准曲线的绘制 | 第44-45页 |
| 3.2.7 选择性考察 | 第45页 |
| 3.2.8 探针稳定性考察 | 第45页 |
| 3.2.9 激光共聚焦成像分析 | 第45-46页 |
| 3.2.10 流式细胞术分析 | 第46页 |
| 3.2.11 实时荧光定量PCR分析 | 第46页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第46-56页 |
| 3.3.1 实验原理 | 第46-47页 |
| 3.3.2 实验可行性的验证 | 第47-49页 |
| 3.3.3 动力学考察 | 第49-50页 |
| 3.3.4 探针对miRNA-141的体外响应曲线 | 第50-51页 |
| 3.3.5 选择性考察 | 第51页 |
| 3.3.6 探针的稳定性分析 | 第51-52页 |
| 3.3.7 细胞内荧光共定位成像 | 第52页 |
| 3.3.8 最佳成像时间的考察 | 第52-53页 |
| 3.3.9 细胞内荧光特异性考察 | 第53-55页 |
| 3.3.10 探针在不同细胞内对miRNA-141的检测 | 第55-56页 |
| 3.4 小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-71页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
