| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第11-26页 |
| 1.1 生物传感器概述 | 第11页 |
| 1.2 石墨烯及其衍生物纳米材料 | 第11-20页 |
| 1.2.1 石墨烯及其衍生物的发展史 | 第12-13页 |
| 1.2.2 基于石墨烯及其衍生物的生物传感器 | 第13-14页 |
| 1.2.3 石墨烯及其衍生物应用于生物分子体外检测 | 第14-18页 |
| 1.2.4 石墨烯及其衍生物应用于生物分子体内检测 | 第18-19页 |
| 1.2.5 石墨烯及其衍生物的毒性 | 第19-20页 |
| 1.3 核酸探针 | 第20-24页 |
| 1.3.1 核酸探针类型 | 第21-22页 |
| 1.3.2 核酸探针在生物传感中的应用 | 第22-24页 |
| 1.4 本论文的工作 | 第24-26页 |
| 第2章 DSN辅助的基于DNA探针和GONS的p21mRNA超灵敏及定量检测 | 第26-41页 |
| 2.1 前言 | 第26-27页 |
| 2.2 实验部分 | 第27-30页 |
| 2.2.1 试剂材料与仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.2 核酸探针与GONS反应时间优化 | 第28页 |
| 2.2.3 杂交反应时间优化 | 第28页 |
| 2.2.4 荧光检测 | 第28-29页 |
| 2.2.5 细胞的培养和转染 | 第29页 |
| 2.2.6 肿瘤细胞/组织总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.7 RT-PCR分析p21mRNA表达水平 | 第29-30页 |
| 2.2.8 PAGE凝胶电泳与银染法分析SMB与T1的结合效果 | 第30页 |
| 2.2.9 细胞固定及成像 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-40页 |
| 2.3.1 基于荧光探针mRNA检测的设计原理 | 第30-31页 |
| 2.3.2 氧化石墨烯的表征 | 第31-32页 |
| 2.3.3 氧化石墨烯纳米材料的荧光猝灭效率 | 第32-33页 |
| 2.3.4 Mg~(2+)对荧光猝灭效率的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.5 灵敏度检测 | 第34-36页 |
| 2.3.6 基于GONS猝灭探针mRNA检测的特异性研究 | 第36-37页 |
| 2.3.7 复杂生物样品中p21mRNA的检测 | 第37-39页 |
| 2.3.8 应用GONS/P1-DSN系统实现p21mRNA原位成像 | 第39-40页 |
| 2.4 小结 | 第40-41页 |
| 第3章 基于多功能纳米传感体系的双靶点mRNA同步监测 | 第41-57页 |
| 3.1 前言 | 第41-42页 |
| 3.2 实验部分 | 第42-45页 |
| 3.2.1 试剂材料与仪器 | 第42页 |
| 3.2.2 还原型氧化石墨烯纳米材料的制备 | 第42-43页 |
| 3.2.3 p53&p21@rGONS传感平台检测mRNA | 第43页 |
| 3.2.4 体外rGONS-RB细胞摄取 | 第43页 |
| 3.2.5 rGONS的细胞毒性分析 | 第43-44页 |
| 3.2.6 活细胞中mRNA原位检测 | 第44页 |
| 3.2.7 细胞中总mRNA的提取及PCR分析 | 第44-45页 |
| 3.2.8 Westernblot分析 | 第45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-56页 |
| 3.3.1 多靶标mRNA实时监测探针设计原理 | 第45-46页 |
| 3.3.2 rGONS的表征 | 第46-47页 |
| 3.3.3 GO和rGONS荧光猝灭效率分析 | 第47-48页 |
| 3.3.4 p21&p53@rGONS传感系统的可行性分析 | 第48-49页 |
| 3.3.5 p21&p53@rGONS传感系统的灵敏度分析 | 第49-50页 |
| 3.3.6 rGONS在不同细胞系中的毒性分析 | 第50-51页 |
| 3.3.7 细胞摄取时间优化及摄取机制研究 | 第51-52页 |
| 3.3.8 不同细胞系中T_(21)表达量的检测 | 第52-54页 |
| 3.3.9 p21&p53@rGONS传感系统用于活细胞中mRNA的监控 | 第54-56页 |
| 3.4 小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-70页 |
| 附录A 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
