| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 低密度脂蛋白(LDL)受体家族与LRP4蛋白结构 | 第11-12页 |
| 1.2 LRP4与人类罕见遗传病 | 第12-16页 |
| 1.2.1 LRP4与CLS并指(趾)症 | 第12-13页 |
| 1.2.2 LRP4与二型硬化性骨病 | 第13-14页 |
| 1.2.3 LRP4与CMS17肌无力症 | 第14-15页 |
| 1.2.4 LRP4点突变与三种罕见遗传疾病 | 第15-16页 |
| 1.3 LRP4调节的信号通路及关联基因 | 第16-17页 |
| 1.4 立题依据与研究意义 | 第17-19页 |
| 第二章 材料及方法 | 第19-35页 |
| 2.1 实验使用材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 实验使用仪器 | 第19页 |
| 2.1.2 实验相关耗材 | 第19-20页 |
| 2.1.3 实验相关材料及试剂 | 第20-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 小鼠Lrp4全长质粒构建及改造 | 第23-25页 |
| 2.2.2 SiRNA干扰实验 | 第25-27页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 2.2.4 双荧光素酶实验 | 第28-29页 |
| 2.2.5 Western Blotting实验 | 第29-30页 |
| 2.2.6 Lrp4稳转过表达细胞系构建 | 第30-32页 |
| 2.2.7 Lrp4稳转过表达细胞系功能验证 | 第32页 |
| 2.2.8 构建Crispr/Cas9 Lrp4~(-/-)敲除ES17细胞系 | 第32-34页 |
| 2.2.9 Lrp4~(-/-)敲除ES17细胞系转录组分析 | 第34页 |
| 2.2.10 斑马鱼lrp4体内功能验证 | 第34-35页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第35-53页 |
| 3.1 小鼠Lrp4全长质粒及突变体质粒构建 | 第35-37页 |
| 3.2 SiRNA干扰实验结果 | 第37-39页 |
| 3.3 双荧光素酶实验体外验证Lrp4与Wnt信号和Bmp信号的关系 | 第39-40页 |
| 3.4 Lrp4稳转过表达细胞系构建及功能验证 | 第40-44页 |
| 3.5 Lrp4~(-/-)ES17细胞系构建及功能验证 | 第44-49页 |
| 3.6 斑马鱼lrp4体内功能验证 | 第49-52页 |
| 3.7 CLS并指症与Bmp信号通路 | 第52-53页 |
| 第四章 结论与展望 | 第53-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第61-63页 |
| 1.发表学术论文 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
