| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第11-12页 |
| 1.2 稻瘟菌生物学 | 第12-13页 |
| 1.3 稻瘟菌寄主侵染的分子机理研究 | 第13-18页 |
| 1.3.1 稻瘟菌附着胞形成过程的信号转导途径 | 第13-15页 |
| 1.3.2 附着胞形成的细胞周期调控 | 第15-16页 |
| 1.3.3 侵染钉形成前期的细胞极性调控 | 第16-17页 |
| 1.3.4 稻瘟菌侵染菌丝活体营养型生长 | 第17-18页 |
| 1.4 泛素化修饰系统综述 | 第18-21页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-32页 |
| 2.1 实验菌株及培养条件 | 第22页 |
| 2.2 基因敲除与互补载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.3 PEG介导的原生质体转化 | 第23-24页 |
| 2.4 基因敲除的验证 | 第24-25页 |
| 2.5 Ubp14蛋白的亚细胞定位观察 | 第25-26页 |
| 2.6 稻瘟菌产孢及产孢量测定 | 第26页 |
| 2.7 分生孢子梗以及分生孢子萌发过程观察 | 第26-27页 |
| 2.8 附着胞膨压测试 | 第27页 |
| 2.9 致病力测试以及侵染过程观察 | 第27页 |
| 2.10 MoUBP14表达动态荧光定量PCR分析 | 第27-29页 |
| 2.11 细胞学染色试验 | 第29-30页 |
| 2.12 样品的透射电镜观察 | 第30页 |
| 2.13 MoUbp14GFP蛋白的Pulldown试验 | 第30-31页 |
| 2.14 菌丝总蛋白泛素化水平及Fbp1、Pck1泛素化水平检测 | 第31页 |
| 2.15 系统进化树构建 | 第31-32页 |
| 2.16 统计学分析 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-49页 |
| 3.1 去泛素化酶MoUbp14蛋白结构描述以及系统进化树分析 | 第32-33页 |
| 3.2 不同发育阶段MoUBP14的表达量分析 | 第33-34页 |
| 3.3 稻瘟菌ΔMoubp14敲除体的获得 | 第34-35页 |
| 3.4 敲除体菌丝营养生长表型分析 | 第35-36页 |
| 3.5 敲除突变体产孢表型分析 | 第36-38页 |
| 3.6 敲除突变体致病性分析 | 第38-39页 |
| 3.7 MoUBP14基因敲除体附着胞发育过程观察及膨压测定 | 第39-41页 |
| 3.8 MoUBP14基因敲除体寄主侵染过程观察 | 第41-42页 |
| 3.9 MoUBP14基因敲除体相应不同胁迫条件分析 | 第42-43页 |
| 3.10 敲除突变体对碳源利用能力分析 | 第43页 |
| 3.11 敲除突变体对糖原和脂肪代谢过程染色观察 | 第43-45页 |
| 3.12 ΔMoubp14敲除体清除寄主ROS分析 | 第45-46页 |
| 3.13 MoUbp14在附着胞发育以及侵染生长时的亚细胞定位观察 | 第46-47页 |
| 3.14 敲除突变体总蛋白泛素化水平分析 | 第47页 |
| 3.15 Pulldown鉴定潜在的MoUbp14互作蛋白 | 第47-48页 |
| 3.16 敲除突变体中Fbp1和Pck1的泛素化水平分析 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 参考文献 | 第53-64页 |
| 附录 | 第64-74页 |
| 在读期间与课题有关的成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
