| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 中英文缩略语表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 1 研究背景 | 第13-17页 |
| 2 技术路线图 | 第17-18页 |
| 第一部分 Aβ_(25-35)对原代海马神经细胞损伤及其Cy3G干预的研究 | 第18-36页 |
| 1 实验材料 | 第18-20页 |
| 1.1 实验动物 | 第18页 |
| 1.2 实验器材 | 第18-19页 |
| 1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 1.4 试剂配制 | 第19-20页 |
| 2 试验方法 | 第20-26页 |
| 2.1 原代海马神经细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.2 免疫荧光法检测原代海马神经细胞纯度 | 第21页 |
| 2.3 筛选Cy3G干预Aβ_(25-35)损伤的海马神经元的适宜浓度和时机 | 第21-22页 |
| 2.4 LDH试剂盒检测细胞上清液中LDH活性 | 第22-23页 |
| 2.5 罗丹明123检测线粒体膜电位水平 | 第23-24页 |
| 2.6 Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率 | 第24页 |
| 2.7 统计学处理 | 第24-25页 |
| 2.8 技术路线图 | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-33页 |
| 3.1 原代培养的海马神经细胞培养及形态观察 | 第26页 |
| 3.2 原代培养的海马神经细胞纯度鉴定 | 第26-27页 |
| 3.3 Cy3G干预Aβ_(25-35)损伤的原代海马神经元的适宜浓度和时机 | 第27-29页 |
| 3.4 Aβ_(25-35)及Cy3G对海马神经细胞上清液中LDH活力的影响 | 第29-30页 |
| 3.5 Aβ_(25-35)及Cy3G干预对海马神经细胞膜电位的影响 | 第30-31页 |
| 3.6 Aβ_(25-35)及Cy3G干预对海马神经元细胞凋亡的影响 | 第31-33页 |
| 4 讨论 | 第33-34页 |
| 4.1 AD细胞模型的建立和Cy3G干预浓度和时机的筛选 | 第33-34页 |
| 4.2 Aβ_(25-35)和Cy3G的作用与线粒体诱导的细胞凋亡相关 | 第34页 |
| 5 小结 | 第34-36页 |
| 第二部分 Aβ_(25-35)诱导的海马神经细胞线粒体凋亡的机制研究及其Cy3G干预 | 第36-53页 |
| 1 实验材料 | 第36-39页 |
| 1.1 实验器材 | 第36-37页 |
| 1.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 1.3 试剂配制 | 第38-39页 |
| 2 试验方法 | 第39-44页 |
| 2.1 DCFH-DA探针检测细胞内ROS含量 | 第39页 |
| 2.2 Western Blot法检测Bax、Bcl-2和Caspase-9等凋亡相关蛋白的表达水平 | 第39-42页 |
| 2.3 Western Blot法检测海马神经细胞线粒体外膜上VDAC1蛋白的表达水平,蛋白质交联技术检测VDAC1寡聚体的表达 | 第42页 |
| 2.4 统计学处理 | 第42-43页 |
| 2.5 技术路线图 | 第43-44页 |
| 3 实验结果 | 第44-49页 |
| 3.1 Aβ_(25-35)及Cy3G干预对海马神经细胞内ROS含量的影响 | 第44-45页 |
| 3.2 Aβ_(25-35)及Cy3G干预对海马神经细胞细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase-9的影响 | 第45-48页 |
| 3.3 Aβ_(25-35)干预对海马神经细胞线粒体膜蛋白VDAC1表达和其寡聚化的影响 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 Cy3G的神经保护作用和氧化应激相关 | 第49页 |
| 4.2 Aβ_(25-35)诱导的细胞凋亡与Bcl-2家族蛋白的表达水平相关 | 第49-50页 |
| 4.3 Aβ_(25-35)诱导的线粒体细胞凋亡与促凋亡蛋白Caspase-9蛋白表达水平有关 | 第50-51页 |
| 4.4 Aβ_(25-35)诱导的细胞凋亡与VDAC1蛋白表达水平及其寡聚化相关 | 第51-52页 |
| 5 小结 | 第52-53页 |
| 第三部分 Aβ_(25-35)对原代海马神经细胞miRNA表达谱的影响及其Cy3G干预 | 第53-76页 |
| 1 实验材料 | 第53-55页 |
| 1.1 实验器材 | 第53-54页 |
| 1.2 主要试剂 | 第54页 |
| 1.3 试剂配制 | 第54-55页 |
| 2 试验方法 | 第55-58页 |
| 2.1 细胞培养与分组 | 第55页 |
| 2.2 细胞miRNA表达谱分析 | 第55-57页 |
| 2.3 数据处理 | 第57页 |
| 2.4 技术路线图 | 第57-58页 |
| 3 实验结果 | 第58-73页 |
| 3.1 样品质量检测结果 | 第58-59页 |
| 3.2 差异筛选结果 | 第59-61页 |
| 3.3 靶基因预测 | 第61-62页 |
| 3.4 GO分析 | 第62-66页 |
| 3.5 Pathway分析 | 第66-71页 |
| 3.6 聚类分析 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-74页 |
| 5 小结 | 第74-76页 |
| 讨论 | 第76-79页 |
| 1 对Aβ_(25-35)致海马神经细胞凋亡现象及其Cy3G干预效果的观察 | 第76页 |
| 2 Aβ_(25-35)致原代海马神经细胞凋亡的机制探索和Cy3G抗凋亡机制的探索 | 第76-78页 |
| 3 Aβ_(25-35)和Cy3G干预后差异表达的miRNA与细胞凋亡的关系 | 第78-79页 |
| 结论 | 第79页 |
| 本研究的创新点 | 第79-80页 |
| 问题与展望 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-91页 |
| 附件一：文献综述 | 第91-100页 |
| 参考文献 | 第95-100页 |
| 附件二：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第100页 |
