| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 大豆转座子 | 第12-14页 |
| 1.1.1 转座子的分类 | 第12-13页 |
| 1.1.2 转座子Tgm9的发现 | 第13-14页 |
| 1.2 转座子构建突变体库的方法 | 第14-16页 |
| 1.2.1 突变体库构建的常用方法 | 第14页 |
| 1.2.2 Tgm9的改造及突变体库构建 | 第14-16页 |
| 1.2.3 激活标签的应用 | 第16页 |
| 1.3 大豆转基因方法 | 第16-18页 |
| 1.3.1 常用的转基因技术 | 第16-17页 |
| 1.3.2 选择性标记基因的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 1.5 实验设计 | 第19-20页 |
| 第一章 Tgm9序列比对及演化过程分析 | 第20-26页 |
| 1.1 材料与工具 | 第20页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第20页 |
| 1.1.2 工具网站和软件 | 第20页 |
| 1.2 实验方法 | 第20-21页 |
| 1.2.1 序列查找与进化树构建方法 | 第20-21页 |
| 1.3 结果与分析 | 第21-24页 |
| 1.3.1 豆科植株转座子分类 | 第21-22页 |
| 1.3.2 Tgm9转座酶序列比对及进化树分析 | 第22-23页 |
| 1.3.3 Tgm9末端序列比对及进化树分析 | 第23-24页 |
| 1.4 小结与讨论 | 第24-26页 |
| 第二章 激活标签系表达载体的构建 | 第26-44页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第26-30页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.2 实验试剂与常用仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要试剂与配方 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-40页 |
| 2.2.1 目的片段4x35S的制备 | 第30-36页 |
| 2.2.2 pBS-dTgm9-4x35S质粒的构建 | 第36-38页 |
| 2.2.3 pLM-B001-dTgm9-4x35S表达载体的构建 | 第38-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-43页 |
| 2.3.1 激活标签系表达载体的构建过程 | 第40-41页 |
| 2.3.2 pBS-dTgm9-4x35S酶切验证结果分析 | 第41-42页 |
| 2.3.3 pLM-B001-dTgm9-4x35S表达载体酶切验证结果分析 | 第42-43页 |
| 2.4 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 根癌农杆菌介导的Tgm9转化 | 第44-71页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第44-47页 |
| 3.1.1 材料 | 第44-45页 |
| 3.1.2 试剂 | 第45-47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-58页 |
| 3.2.1 根癌农杆菌介导的转化方法 | 第47-51页 |
| 3.2.2 乙酰丁香酮(AS)对转化效率的影响 | 第51-52页 |
| 3.2.3 外植体再生比率的测定 | 第52页 |
| 3.2.4 出苗率的测定 | 第52页 |
| 3.2.5 转化效率测定 | 第52页 |
| 3.2.6 T0代转基因植株的鉴定方法 | 第52-58页 |
| 3.2.7 报告基因检测 | 第58页 |
| 3.2.8 T1代转基因植株鉴定与基因型分析 | 第58页 |
| 3.2.9 T2代转基因植株的鉴定与基因型分析 | 第58页 |
| 3.2.10 T3代纯合植株的筛选与基因型分析 | 第58页 |
| 3.3 转基因植株杂交 | 第58-59页 |
| 3.3.1 杂交方法 | 第58-59页 |
| 3.3.2 杂交植株的鉴定与基因型统计 | 第59页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第59-69页 |
| 3.4.1 根癌农杆菌介导的大豆转化结果分析 | 第59-60页 |
| 3.4.2 乙酰丁香酮(AS)促进转化的最适浓度分析 | 第60-62页 |
| 3.4.3 T0代转基因植株的鉴定结果分析 | 第62-64页 |
| 3.4.4 RT-PCR检测结果分析 | 第64-65页 |
| 3.4.5 报告基因(Pf)花色检测结果分析 | 第65-66页 |
| 3.4.6 T0代转基因植株株系统计分析 | 第66页 |
| 3.4.7 T1代转基因植株的鉴定与扩繁结果分析 | 第66-67页 |
| 3.4.8 T2代大豆中转基因株系结果分析 | 第67页 |
| 3.4.9 T3代纯合转基因植株的筛选结果分析 | 第67-68页 |
| 3.4.10 F1代杂交植株鉴定结果分析 | 第68-69页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第69-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 附录 I转座子 | 第80-81页 |
| 攻读硕士期间取得的科研成果 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
