| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要英文缩写词表 | 第12-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-41页 |
| 一、突变的DNA修复基因在膀胱癌中的作用和意义 | 第13-22页 |
| 1.1 膀胱癌的发病机制及治疗进展 | 第13页 |
| 1.1.1 膀胱癌的发病机制即DDR基因的发现 | 第13页 |
| 1.1.2 MIBC的新的治疗方法和靶点 | 第13页 |
| 1.2 MIBC中DDR基因量的改变 | 第13-19页 |
| 1.2.1 ERCC2在膀胱癌中的作用 | 第14-16页 |
| 1.2.2 最常见的突变DDR基因ATM | 第16-17页 |
| 1.2.3 错配修复基因MMR | 第17-19页 |
| 1.3 MIBC中DDR基因生物学特性的改变 | 第19-21页 |
| 1.4 目前的治疗方法在临床中的应用 | 第21-22页 |
| 二、微小RNA概述 | 第22-33页 |
| 2.1 miRNA | 第22页 |
| 2.2 miRNA生物发生途径 | 第22-25页 |
| 2.2.1 转录 | 第22-23页 |
| 2.2.2 由Drosha和Dicer处理 | 第23页 |
| 2.2.3 RISC | 第23-24页 |
| 2.2.4 替代途径 | 第24-25页 |
| 2.3 miRNA靶标鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.1 生物信息学目标预测 | 第25页 |
| 2.3.2 生化目标识别 | 第25-26页 |
| 2.3.3 基于组学的靶标识别策略 | 第26页 |
| 2.4 miRNA调节途径 | 第26-27页 |
| 2.5 miRNAs的生物学作用 | 第27页 |
| 2.6 疾病中miRNA的失调 | 第27-29页 |
| 2.6.1 癌症中miRNA的表达 | 第28页 |
| 2.6.2 miRNA与代谢性疾病 | 第28-29页 |
| 2.6.3 病毒的发病机理 | 第29页 |
| 2.7 miRNA的诊断标记 | 第29-31页 |
| 2.7.1 miRNA的检测方法 | 第30页 |
| 2.7.2 细胞外液的miRNA | 第30-31页 |
| 2.8 miRNA作为治疗靶点 | 第31-32页 |
| 2.8.1 miRNA的模仿和抑制剂 | 第31-32页 |
| 2.8.2 miRNA通路的小分子抑制剂 | 第32页 |
| 2.9 基因组编辑方法 | 第32-33页 |
| 三、Rb通路在抑癌功能，干细胞，代谢和炎症反应中的作用 | 第33-41页 |
| 3.1 Rb基因突变与肿瘤 | 第33-35页 |
| 3.1.1 RB基因失活与视网膜母细胞瘤 | 第33-34页 |
| 3.1.2 Rb在肿瘤进展中的作用机制 | 第34-35页 |
| 3.2 Rb失活诱导的干细胞样特征 | 第35-36页 |
| 3.3 Rb的失活促进促炎信号传导 | 第36-37页 |
| 3.4 Rb失活细胞内ROS微调的调节反馈机制 | 第37-39页 |
| 3.5 RB对促炎因子的转录和转录后调控 | 第39-41页 |
| 引言 | 第41-43页 |
| 第2章 实验部分 | 第43-67页 |
| 第一部分 MiR-6838和Rb在膀胱癌细胞和组织中的表达研究 | 第43-49页 |
| 1 实验材料 | 第43-45页 |
| 1.1 膀胱癌细胞 | 第43页 |
| 1.2 膀胱癌癌组织及癌旁组织 | 第43页 |
| 1.3 主要仪器 | 第43-44页 |
| 1.4 主要试剂 | 第44页 |
| 1.5 主要溶剂配制 | 第44-45页 |
| 2 实验方法 | 第45-46页 |
| 2.1 细胞培养 | 第45页 |
| 2.2 实时荧光定量PCR分析 | 第45页 |
| 2.3 Western blot | 第45-46页 |
| 2.4 统计分析 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-48页 |
| 3.1 膀胱癌组织中MiR-6838表达水平的检测 | 第46页 |
| 3.2 膀胱癌细胞中MiR-6838表达水平的检测 | 第46-47页 |
| 3.3 膀胱癌细胞中Rb蛋白表达水平的检测 | 第47-48页 |
| 4 小结 | 第48-49页 |
| 第二部分 MiR-6838对膀胱癌细胞生物学行为的影响 | 第49-59页 |
| 1 实验材料 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-50页 |
| 2.1 细胞培养 | 第49页 |
| 2.2 细胞转染 | 第49-50页 |
| 2.3 荧光定量PCR分析 | 第50页 |
| 2.4 细胞侵袭实验 | 第50页 |
| 2.5 细胞增殖和凋亡检测 | 第50页 |
| 2.6 统计分析 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-58页 |
| 3.1 MiR-6838过表达对膀胱癌细胞生物学行为的影响 | 第50-54页 |
| 3.1.1 MiR-6838过表达对膀胱癌细胞增殖的影响 | 第50-52页 |
| 3.1.2 MiR-6838过表达对膀胱癌细胞凋亡的影响 | 第52-53页 |
| 3.1.3 MiR-6838过表达对膀胱癌细胞侵袭的影响 | 第53-54页 |
| 3.2 抑制MiR-6838表达对膀胱癌细胞生物学行为的影响 | 第54-58页 |
| 3.2.1 抑制MiR-6838表达对膀胱癌细胞增殖的影响 | 第54-56页 |
| 3.2.2 抑制MiR-6838表达对膀胱癌细胞凋亡的影响 | 第56-57页 |
| 3.2.3 抑制MiR-6838表达对膀胱癌细胞侵袭的影响 | 第57-58页 |
| 4 小结 | 第58-59页 |
| 第三部分 MiR-6838靶基因及其促癌机制初步研究 | 第59-67页 |
| 1 实验材料 | 第59页 |
| 2 实验方法 | 第59-60页 |
| 2.1 细胞培养 | 第59页 |
| 2.2 'UTR萤光素酶基因报道分析 | 第59页 |
| 2.3 细胞侵袭实验 | 第59-60页 |
| 2.4 细胞增殖和凋亡检测 | 第60页 |
| 2.5 Western blot | 第60页 |
| 2.6 统计分析 | 第60页 |
| 3 结果 | 第60-66页 |
| 3.1 MiR-6838直接靶向Rb基因 | 第60-62页 |
| 3.2 调节MiR-6838对Rb蛋白及细胞周期蛋白和侵袭相关蛋白的影响 | 第62-64页 |
| 3.3 调节Rb蛋白对T24细胞的增殖、凋亡和侵袭能力的影响 | 第64-66页 |
| 4 小结 | 第66-67页 |
| 第3章 讨论 | 第67-71页 |
| 第4章 全文结论 | 第71-73页 |
| 第5章 参考文献 | 第73-109页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
