摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-16页 |
1.1 FcRn的结构 | 第11页 |
1.2 FcRn的分布 | 第11-12页 |
1.3 FcRn的结合位点 | 第12页 |
1.4 FcRn的免疫学功能 | 第12-13页 |
1.4.1 FcRn介导抗原-抗体复合物的胞吞转运作用 | 第12-13页 |
1.4.2 粘膜递呈作用 | 第13页 |
1.5 FcRn在疾病治疗中的作用 | 第13-14页 |
1.5.1 FcRn保护IgG免受降解的作用 | 第13-14页 |
1.5.2 调节配体改变FcRn与IgG的结合能力 | 第14页 |
1.6 奶牛乳房炎的分类 | 第14-15页 |
1.6.1 无乳链球菌的生物学特性 | 第14-15页 |
1.6.2 金黄色葡萄球菌的生物学特性 | 第15页 |
1.7 奶牛乳腺免疫防御机制 | 第15-16页 |
1.8 无乳链球菌疫苗和金黄色葡萄球菌疫苗的研究现状 | 第16页 |
1.9 本研究的意义 | 第16页 |
2 研究一目的蛋白pET-22b-Fc-Sip的原核表达 | 第16-31页 |
2.1 试验材料 | 第16-18页 |
2.1.1 菌株 | 第16-17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17页 |
2.1.3 主要仪器 | 第17页 |
2.1.4 主要溶液的配制 | 第17-18页 |
2.2 试验方法 | 第18-25页 |
2.2.1 Fc基因和Sip基因的PCR扩增 | 第18-19页 |
2.2.2 Fc基因与Sip基因的纯化 | 第19页 |
2.2.3 Fc-Sip基因的连接 | 第19-20页 |
2.2.4 表达载体 | 第20页 |
2.2.5 目的基因Fc-Sip与表达载体的双酶切 | 第20-21页 |
2.2.6 目的基因Fc-Sip与表达载体的连接 | 第21页 |
2.2.7 重组质粒Fc-Sip的构建 | 第21页 |
2.2.8 重组质粒Fc-Sip的PCR鉴定 | 第21-22页 |
2.2.9 重组质粒Fc-Sip的提取 | 第22页 |
2.2.10 重组质粒Fc-Sip的双酶切鉴定 | 第22-23页 |
2.2.11 重组质粒Fc-Sip的序列测定 | 第23页 |
2.2.12 重组质粒Fc-Sip的转化与保存 | 第23页 |
2.2.13 目的蛋白Fc-Sip最佳诱导浓度的确定 | 第23-24页 |
2.2.14 目的蛋白Fc-Sip最佳诱导时间的确定 | 第24页 |
2.2.15 目的蛋白Fc-SipSDS-PAGE电泳 | 第24-25页 |
2.2.16 目的蛋白Fc-Sip的纯化 | 第25页 |
2.2.17 目的蛋白Fc-Sip浓度的测定 | 第25页 |
2.3 试验结果 | 第25-30页 |
2.3.1 Fc、Sip、Fc-Sip基因的扩增结果及重组质粒双酶切鉴定结果 | 第25-26页 |
2.3.2 重组质粒pET-22b-Fc-Sip的序列测定结果 | 第26-27页 |
2.3.3 目的蛋白Fc-Sip最佳诱导浓度的确定结果 | 第27-28页 |
2.3.4 目的蛋白Fc-Sip最佳诱导时间的确定结果 | 第28-29页 |
2.3.5 目的蛋白Fc-Sip的纯化结果 | 第29页 |
2.3.6 目的蛋白Fc-Sip浓度测定结果 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30页 |
2.5 小结 | 第30-31页 |
3 研究二Fc-Sip和Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗的临床试验研究 | 第31-39页 |
3.1 试验材料 | 第31页 |
3.1.1 试验动物 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
3.1.3 亚单位疫苗的制备 | 第31页 |
3.1.4 亚单位疫苗的安全性评价 | 第31页 |
3.2 试验方法 | 第31-33页 |
3.2.1 试验动物的免疫程序及分组情况 | 第31-32页 |
3.2.2 免疫前后奶牛乳汁中细菌的分离与体细胞数的测定 | 第32页 |
3.2.3 免疫血清和乳清特异性抗体动态监测 | 第32-33页 |
3.3 试验结果 | 第33-38页 |
3.3.1 乳样细菌分离结果与体细胞数测定结果 | 第33-35页 |
3.3.2 血清抗体效价检测结果 | 第35-38页 |
3.4 讨论 | 第38页 |
3.5 小结 | 第38-39页 |
4 总体讨论 | 第39-40页 |
5 总体结论 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
作者简介 | 第49页 |