| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 1 引言 | 第9-22页 |
| 1.1 獭兔概述 | 第9-10页 |
| 1.2 CRISPR/Cas9系统介绍 | 第10-14页 |
| 1.2.1 CRISPR/Cas9发展历程 | 第10-11页 |
| 1.2.2 CRISPR/Cas9的分子机制 | 第11-13页 |
| 1.2.3 CRISPR/Cas9的分类 | 第13-14页 |
| 1.2.4 CRISPR/Cas9系统的应用 | 第14页 |
| 1.3 精子介导法简介 | 第14-19页 |
| 1.3.1 精子介导法发展历程 | 第14-15页 |
| 1.3.2 精子介导法的原理 | 第15页 |
| 1.3.3 精子介导法的方法简介 | 第15-19页 |
| 1.4 MSTN基因简介 | 第19-21页 |
| 1.4.1 MSTN基因及结构 | 第19-20页 |
| 1.4.2 MSTN的作用机制 | 第20-21页 |
| 1.4.3 MSTN基因应用前景及研究进展 | 第21页 |
| 1.5 本研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 2 獭兔MSTN基因CRISPR/Cas9打靶载体的构建 | 第22-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.2 主要使用的仪器及耗材 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-28页 |
| 2.2.1 靶向MSTN基因的gRNA的设计 | 第23-24页 |
| 2.2.2 引物合成 | 第24-25页 |
| 2.2.3 质粒pX330-gRNA的构建 | 第25-28页 |
| 2.2.4 重组质粒的去毒素质粒的提取 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-31页 |
| 2.3.1 pX330-gRNA的PCR鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.2 pX330-gRNA的测序 | 第29-30页 |
| 2.3.3 讨论 | 第30-31页 |
| 3 利用精子介导法介导的CRISPR/Cas9编辑獭兔MSTN基因 | 第31-41页 |
| 3.1 试验材料 | 第31页 |
| 3.1.1 动物材料 | 第31页 |
| 3.1.2 主要实验试剂耗材及试剂配制 | 第31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 精子的采集及品质鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2.2 精子的处理 | 第32-33页 |
| 3.2.3 人工授精 | 第33页 |
| 3.2.4 仔兔组织的PCR鉴定 | 第33-35页 |
| 3.3 结果 | 第35-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 3.4.1 精子处理方法对试验的影响讨论 | 第39页 |
| 3.4.2 精子介导法随机性对实验的影响讨论 | 第39-41页 |
| 4 全文结论 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |