| 摘要 | 第11-15页 |
| ABSTRACT | 第15-19页 |
| 缩略词表 | 第20-22页 |
| 第一章 文献综述 | 第22-50页 |
| 第一节 家禽卵泡的发育过程 | 第22-30页 |
| 1.1 胚胎期家禽卵巢的发育 | 第22-23页 |
| 1.2 出壳后早期家禽卵巢的发育 | 第23-26页 |
| 1.3 家禽卵泡的等级发育和卵泡选择 | 第26-29页 |
| 1.3.1 卵泡的等级发育 | 第26-27页 |
| 1.3.2 家禽的卵泡选择 | 第27-29页 |
| 1.4 小结 | 第29-30页 |
| 第二节 细胞因子对卵泡发育的调节作用 | 第30-37页 |
| 2.1 胰岛素样生长因子家族对卵泡发育的调节作用 | 第30-31页 |
| 2.2 转化生长因子β家族对卵泡发育的调节作用 | 第31-35页 |
| 2.2.1 TGF-β家族 | 第32-33页 |
| 2.2.2 抑制素和激活素家族 | 第33页 |
| 2.2.3 BMP家族 | 第33-35页 |
| 2.3 白细胞介素家族对卵泡发育的调节作用 | 第35-36页 |
| 2.4 表皮生长因子家族对卵泡发育的调节作用 | 第36页 |
| 2.5 肿瘤坏死因子家族对卵泡发育的调节作用 | 第36-37页 |
| 第三节 激素对家禽不同发育阶段卵巢的调节作用 | 第37-40页 |
| 3.1 性腺激素 | 第37-38页 |
| 3.2 促性腺激素 | 第38-40页 |
| 第四节 卵泡的分离和体外培养模型的建立 | 第40-48页 |
| 4.1 卵泡的分离方法 | 第40-42页 |
| 4.1.1 机械分离法 | 第40-41页 |
| 4.1.2 酶消化分离法 | 第41-42页 |
| 4.1.2.1 胶原酶 | 第41页 |
| 4.1.2.2 胰蛋白酶 | 第41-42页 |
| 4.2 卵泡的培养方法 | 第42-44页 |
| 4.2.1 培养基 | 第42页 |
| 4.2.2 二维培养 | 第42-43页 |
| 4.2.3 三维培养 | 第43-44页 |
| 4.3 影响卵泡生长的其他因素 | 第44-48页 |
| 4.3.1 血清 | 第44-46页 |
| 4.3.2 激素类物质 | 第46-48页 |
| 4.3.2.1 促性腺激素 | 第46页 |
| 4.3.2.2 生长激素 | 第46-48页 |
| 第五节 本研究的目的和内容 | 第48-50页 |
| 5.1 研究目的和研究意义 | 第48页 |
| 5.2 研究内容 | 第48-50页 |
| 第二章 鸡卵巢早期发育的组织学研究 | 第50-62页 |
| 2.1 引言 | 第50-51页 |
| 2.2 材料与方法 | 第51-53页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第51页 |
| 2.2.2 实验器材 | 第51页 |
| 2.2.3 主要试剂及配制 | 第51-52页 |
| 2.2.4 石蜡切片的制作 | 第52页 |
| 2.2.5 石蜡切片HE染色的方法 | 第52-53页 |
| 2.2.6 卵泡的体外培养 | 第53页 |
| 2.2.7 数据分析 | 第53页 |
| 2.3. 实验结果 | 第53-61页 |
| 2.3.1 出壳前后雏鸡卵巢组织的形态学观察 | 第53-55页 |
| 2.3.2 1～4wk雏鸡卵巢形态的观察及卵泡统计结果 | 第55-56页 |
| 2.3.3 1～4wk雏鸡卵巢组织中多核卵泡的形态及其数目的统计结果 | 第56-58页 |
| 2.3.4 分离卵泡进行体外培养形成融合卵泡 | 第58-59页 |
| 2.3.5 1～4月龄鸡卵巢形态及各级卵泡统计结果 | 第59-61页 |
| 2.4 小结 | 第61-62页 |
| 第三章 雌激素对鸡原始卵泡发育和激活的影响 | 第62-81页 |
| 3.1 引言 | 第62-63页 |
| 3.2 材料与方法 | 第63-73页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第63页 |
| 3.2.2 主要器材 | 第63-64页 |
| 3.2.3 主要试剂及配制 | 第64-65页 |
| 3.2.4 样品采集 | 第65-66页 |
| 3.2.5 石蜡切片制备及组织形态学观察 | 第66页 |
| 3.2.6 PCNA免疫组织化学染色 | 第66页 |
| 3.2.7 免疫印迹分析 | 第66-69页 |
| 3.2.8 雏鸡卵巢组织的培养和药物处理 | 第69页 |
| 3.2.9 RNA的提取 | 第69-70页 |
| 3.2.10 cDNA合成 | 第70页 |
| 3.2.11 Real-time PCR | 第70-72页 |
| 3.2.12 数据分析 | 第72-73页 |
| 3.3 实验结果 | 第73-79页 |
| 3.3.1 E_2处理雏鸡卵巢后卵泡发育形态的变化 | 第73-74页 |
| 3.3.2 E_2处理雏鸡后卵巢中卵泡数量的变化 | 第74-75页 |
| 3.3.3 E_2处理雏鸡后卵巢中卵泡和卵母细胞体积的变化 | 第75-76页 |
| 3.3.4 他莫昔芬对E_2促进卵泡生长的抑制作用 | 第76-77页 |
| 3.3.5 E_2处理雏鸡后卵巢中卵泡细胞增殖的变化 | 第77-78页 |
| 3.3.6 E_2处理雏鸡后卵巢中ER和Cadherins的mRNA表达的变化 | 第78-79页 |
| 3.4 讨论 | 第79-81页 |
| 第四章 TGF-β1在鸡原始卵泡发育中的调节作用 | 第81-97页 |
| 4.1 引言 | 第81-82页 |
| 4.2 材料和方法 | 第82-85页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第82页 |
| 4.2.2 主要器材 | 第82-83页 |
| 4.2.3 主要试剂及配制 | 第83页 |
| 4.2.4 石蜡切片的制作和HE染色方法 | 第83页 |
| 4.2.5 雏鸡卵巢组织的体外培养 | 第83页 |
| 4.2.6 RNA的提取 | 第83页 |
| 4.2.7 cDNA合成 | 第83页 |
| 4.2.8 Real time PCR | 第83-84页 |
| 4.2.9 TGF-pl和TGFpRl免疫组织化学染色方法 | 第84-85页 |
| 4.2.10 PCNA免疫组织化学染色方法 | 第85页 |
| 4.2.11 TUNEL检测细胞凋亡染色方法 | 第85页 |
| 4.2.12 免疫印迹分析 | 第85页 |
| 4.2.13 数据分析 | 第85页 |
| 4.3 结果 | 第85-94页 |
| 4.3.1 TGF-β1和TGFβR1的蛋白和mRNA在雏鸡卵巢中的表达 | 第85-87页 |
| 4.3.2 原始卵泡发育为生长卵泡形态的变化 | 第87-88页 |
| 4.3.3 TGF-β1处理雏鸡后卵巢的形态变化和卵泡数目的统计结果 | 第88-89页 |
| 4.3.4 TGF-β1处理雏鸡卵巢后卵泡和卵母细胞体积的变化 | 第89-90页 |
| 4.3.5 TGF-β1处理雏鸡卵巢后卵泡细胞增殖和凋亡的变化 | 第90-92页 |
| 4.3.6 TGF-β1处理卵巢组织后卵巢形态和卵泡数目的变化结果 | 第92页 |
| 4.3.7 TGF-β1和SD208处理培养雏鸡卵巢后相关基因表达的变化 | 第92-94页 |
| 4.4 讨论 | 第94-97页 |
| 第五章 鸡生长卵泡的分离和体外培养模型的建立 | 第97-124页 |
| 5.1 引言 | 第97-98页 |
| 5.2 材料和方法 | 第98-104页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第98页 |
| 5.2.2 主要器材 | 第98页 |
| 5.2.3 主要试剂及配制 | 第98-99页 |
| 5.2.4 家禽生长卵泡的分离 | 第99页 |
| 5.2.5 中性红鉴别细胞死活的染色方法 | 第99-100页 |
| 5.2.6 家禽生长卵泡的体外培养 | 第100页 |
| 5.2.7 石蜡切片的制作及HE染色方法 | 第100-101页 |
| 5.2.8 反转录与定量PCR | 第101-102页 |
| 5.2.9 BrdU的掺入和染色方法 | 第102-103页 |
| 5.2.10 TUNEL检测凋亡细胞的染色方法 | 第103页 |
| 5.2.11 透射电镜样品的制备和细胞超微结构的观察 | 第103-104页 |
| 5.3 实验结果 | 第104-121页 |
| 5.3.1 不同方法分离得到的卵泡质量和数量的统计 | 第104-105页 |
| 5.3.2 分离卵泡的形态观察 | 第105-107页 |
| 5.3.3 不同级别的分离卵泡的形态和相关基因表达的检测 | 第107-110页 |
| 5.3.4 2D和3D培养模型中卵泡形态的变化 | 第110-111页 |
| 5.3.5 2D和3D培养模型中卵泡体积和卵泡活率的变化 | 第111-112页 |
| 5.3.6 2D和3D培养模型中卵泡的形态及细胞增殖的变化 | 第112-116页 |
| 5.3.7 2D和3D培养模型中卵泡中细胞凋亡的变化 | 第116-118页 |
| 5.3.8 2D和3D培养模型中卵泡超微结构的观察 | 第118-119页 |
| 5.3.9 体外培养卵泡对卵泡刺激素的反应性 | 第119-121页 |
| 5.4 讨论 | 第121-124页 |
| 第六章 E_2和TGF-β1对体外培养卵泡发育的调节作用 | 第124-138页 |
| 6.1 引言 | 第124-125页 |
| 6.2 材料与方法 | 第125-127页 |
| 6.2.1 实验动物 | 第125-126页 |
| 6.2.2 主要器材 | 第126页 |
| 6.2.3 主要试剂及配制 | 第126页 |
| 6.2.4 生长卵泡的分离和培养 | 第126页 |
| 6.2.5 卵泡的石蜡切片制作 | 第126页 |
| 6.2.6 卵泡中雌二醇、睾酮和孕酮水平测定 | 第126页 |
| 6.2.7 反转录与定量PCR | 第126页 |
| 6.2.8 BrdU掺入及检测 | 第126页 |
| 6.2.9 TUNEL检测 | 第126页 |
| 6.2.10 PCNA的免疫组织化学染色 | 第126页 |
| 6.2.11 数据分析 | 第126-127页 |
| 6.3 实验结果 | 第127-135页 |
| 6.3.1 不同级别卵泡P_4、T和E_2水平的变化 | 第127页 |
| 6.3.2 E_2对培养卵泡细胞增殖的变化 | 第127-128页 |
| 6.3.3 E_2对培养卵泡细胞凋亡的变化 | 第128-129页 |
| 6.3.4 不同剂量E_2处理卵泡后激素受体mRNA表达的变化 | 第129-130页 |
| 6.3.5 ICI182780抑制剂对E_2效应的阻断作用 | 第130-131页 |
| 6.3.6 TGF-β1和E_2联合处理后培养卵泡细胞增殖和凋亡的变化 | 第131-134页 |
| 6.3.7 SD208抑制剂对TGF-β1效应的阻断作用 | 第134-135页 |
| 6.4 讨论 | 第135-138页 |
| 第七章 提示和创新点 | 第138-139页 |
| 参考文献 | 第139-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 个人简介 | 第149页 |
