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产氢菌株的筛选及其利用木质纤维素发酵产氢机理研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
略缩词索引第16-17页
第一章 绪论第17-34页
    1.1 生物质的介绍及其利用现状第17-19页
        1.1.1 生物质的定义第17-18页
        1.1.2 生物质的组成第18-19页
    1.2 生物质暗发酵产氢技术第19-24页
        1.2.1 暗发酵产氢细菌的筛选第20-21页
        1.2.2 暗发酵细菌的介绍第21-22页
        1.2.3 发酵制氢技术的发酵类型第22-24页
            1.2.3.1 丁酸型发酵制氢类型第22-23页
            1.2.3.2 丙酸型发酵制氢类型第23页
            1.2.3.3 乙醇型发酵制氢类型第23页
            1.2.3.4 混合酸型发酵制氢类型第23-24页
    1.3 生物质的预处理技术第24-27页
        1.3.1 物理预处理法第24-25页
        1.3.2 化学预处理法第25-26页
        1.3.3 物理化学预处理法第26页
        1.3.4 离子液体预处理法第26-27页
        1.3.5 生物预处理法第27页
    1.4 酸预处理抑制剂的研究进展第27-31页
        1.4.1 酸预处理抑制剂的种类第27-29页
        1.4.2 酸预处理抑制剂对细胞的影响第29-30页
        1.4.3 酸预处理抑制剂的解毒研究进展第30-31页
    1.5 本课题的主要意义及内容第31-34页
        1.5.1 本课题的主要意义第31-32页
        1.5.2 本课题的主要研究第32-34页
第二章 嗜热解糖厌氧杆菌MJ1的分离鉴定及其直接利用甘蔗渣酸预处理液产氢特性研究第34-54页
    2.1 引言第34页
    2.2 材料和方法第34-40页
        2.2.1 样品来源第34页
        2.2.2 仪器和试剂第34-36页
            2.2.2.1 主要仪器设备第34-35页
            2.2.2.2 主要试剂耗材第35-36页
        2.2.3 筛选培养基及其制备第36-37页
        2.2.4 实验方法第37-39页
            2.2.4.1 菌种的筛选第37页
            2.2.4.2 菌种的16SrDNA鉴定第37-38页
            2.2.4.3 菌种的原子力显微观察第38页
            2.2.4.4 嗜热解糖厌氧杆菌利用不同碳源的产氢特性研究第38页
            2.2.4.5 分离菌株利用甘蔗渣酸预处理液的产氢特性研究第38-39页
        2.2.5 分析测定方法第39-40页
            2.2.5.1 细胞浓度的测定第39页
            2.2.5.2 酸预处理抑制剂浓度的测定第39页
            2.2.5.3 酸预处理液中总酚含量的测定第39页
            2.2.5.4 氢气含量的测定第39-40页
            2.2.5.5 还原糖和代谢产物浓度的测定第40页
    2.3 结果与讨论第40-52页
        2.3.1 共发酵菌株的筛选第40-41页
        2.3.2 筛选菌株的分子鉴定及其原子力显微观察第41-42页
        2.3.3 MJ1利用不同碳源的生长曲线第42-43页
        2.3.4 MJ1利用不同碳源的产氢特性分析第43-45页
        2.3.5 木糖浓度对MJ1发酵产氢的影响第45-46页
        2.3.6 MJ1利用酸预处理液的产氢特性分析及其发酵条件优化第46-49页
        2.3.7 MJ1利用酸预处理液的产氢和代谢产物时间曲线的研究第49页
        2.3.8 酸预处理液碳源组成对MJ1产氢的影响第49-50页
        2.3.9 碳酸钙浓度对MJ1产氢的影响第50-51页
        2.3.10 初始pH值和缓冲液体系对MJ1产氢的影响第51-52页
    2.4 本章小结第52-54页
第三章 嗜热解糖厌氧杆菌MJ1利用酸预处理甘蔗渣的产氢特性研究第54-72页
    3.1 引言第54页
    3.2 材料和方法第54-59页
        3.2.1 实验菌株第54页
        3.2.2 仪器和试剂第54页
        3.2.3 培养基第54-55页
        3.2.4 实验方法第55-57页
            3.2.4.1 甘蔗渣的预处理方法第55页
            3.2.4.2 种子液的制备第55页
            3.2.4.3 纤维素酶和β-葡萄糖苷酶活性的测定方法第55-56页
            3.2.4.4 MJ1利用酸预处理甘蔗渣的产氢特性研究第56页
            3.2.4.5 代谢产物和pH值对纤维素酶活性的影响研究第56页
            3.2.4.6 有机酸对MJ1产氢特性的影响研究第56-57页
            3.2.4.7 有机酸对MJ1生长的影响研究第57页
        3.2.5 分析测定方法第57-59页
            3.2.5.1 细胞浓度的测定第57页
            3.2.5.2 总酚含量的测定第57页
            3.2.5.3 氢气含量的测定第57页
            3.2.5.4 代谢产物的测定第57页
            3.2.5.5 总还原糖的测定第57页
            3.2.5.6 甘蔗渣成分含量的测定第57-59页
    3.3 结果与讨论第59-70页
        3.3.1 酸预处理甘蔗渣第一阶段的产氢特性研究第59-60页
        3.3.2 酸预处理甘蔗渣第二阶段的产氢特性研究第60-61页
        3.3.3 pH值和代谢产物对CTec2纤维素酶活性的影响第61-63页
        3.3.4 PSSF模式下代谢产物的产量及其丁酸/乙酸的摩尔比变化第63-64页
        3.3.5 代谢产物对MJ1产氢特性的影响第64-68页
            3.3.5.1 NDSCB为底物时代谢产物对MJ1产氢特性的影响第64-66页
            3.3.5.2 木糖为底物时代谢产物对MJ1产氢特性的影响第66-67页
            3.3.5.3 乙酸浓度与氢气产量间的相关性模拟第67-68页
        3.3.6 代谢产物和乙酸浓度对MJ1生长的影响第68-70页
    3.4 本章小结第70-72页
第四章 酸预处理抑制剂对MJ1产氢特性影响的研究第72-98页
    4.1 引言第72页
    4.2 材料和方法第72-75页
        4.2.1 实验菌株第72页
        4.2.2 仪器和试剂第72页
        4.2.3 培养基第72-73页
        4.2.4 实验方法第73-74页
            4.2.4.1 种子液的制备第73页
            4.2.4.2 不同浓度和种类的抑制剂对MJ1和DSM1313生长的影响第73页
            4.2.4.3 不同浓度和种类的抑制剂对MJ1发酵产氢的影响第73-74页
            4.2.4.4 不同浓度的抑制剂混合物对MJ1生长的协同影响第74页
            4.2.4.5 不同浓度的抑制剂混合物对MJ1发酵产氢的协同影响第74页
        4.2.5 分析测定方法第74-75页
            4.2.5.1 细胞浓度的测定第74页
            4.2.5.2 氢气含量的测定第74页
            4.2.5.3 代谢产物的测定第74页
            4.2.5.4 产氢动力学参数的模拟第74-75页
            4.2.5.5 生长动力学参数的模拟第75页
            4.2.5.6 半抑制浓度的模拟第75页
    4.3 结果与讨论第75-96页
        4.3.1 不同浓度和种类的抑制剂对MJ1和DSM1313生长特性的影响研究第75-81页
        4.3.2 不同浓度和种类的抑制剂对MJ1产氢的影响研究第81-84页
        4.3.3 不同种类的抑制剂对MJ1产氢动力学参数的影响研究第84-86页
        4.3.4 不同浓度和种类的抑制剂对MJ1代谢产物的影响研究第86-90页
        4.3.5 不同浓度的抑制剂混合物协同对MJ1生长的影响研究第90-91页
        4.3.6 不同浓度的抑制剂混合物协同对MJ1产氢的影响研究第91-93页
        4.3.7 不同浓度抑制剂混合物协同对MJ1产氢动力学参数的影响研究第93-94页
        4.3.8 不同浓度抑制剂混合物协同对MJ1代谢产物的影响研究第94-96页
    4.4 本章小结第96-98页
第五章 基于CBP工艺转化木质纤维素制氢的应用研究第98-131页
    5.1 引言第98-99页
    5.2 材料和方法第99-108页
        5.2.1 实验菌株与载体第99页
        5.2.2 仪器和试剂第99页
        5.2.3 培养基第99-100页
        5.2.4 实验方法第100-106页
            5.2.4.1 碳源底物的预处理第100页
            5.2.4.2 种子液的制备第100页
            5.2.4.3 β-葡萄糖苷酶和融合β-葡萄糖苷酶的克隆表达第100-102页
            5.2.4.4 β-葡萄糖苷酶和融合β-葡萄糖苷酶对热纤梭菌降解菇渣体系的影响第102-103页
            5.2.4.5 漆酶的克隆表达第103-104页
            5.2.4.6 漆酶酶学特性的研究第104-105页
            5.2.4.7 解毒方法对DSM1313产氢性能的影响第105页
            5.2.4.8 共培养发酵策略对WSCB发酵产氢性能的影响第105-106页
            5.2.4.9 转录组种子液的制备第106页
            5.2.4.10 转录组样本的制备第106页
        5.2.5 分析测定方法第106-108页
            5.2.5.1 蛋白质浓度的测定第106页
            5.2.5.2 β-葡萄糖苷酶活性的测定第106-107页
            5.2.5.3 漆酶活性的测定第107页
            5.2.5.4 氢气含量的测定第107页
            5.2.5.5 代谢产物的测定第107页
            5.2.5.6 转录组分析第107-108页
    5.3 结果与讨论第108-130页
        5.3.1 β-葡萄糖苷酶的克隆表达及其酶学特性研究第108-111页
            5.3.1.1 β-葡萄糖苷酶和粘连蛋白基因的克隆及其表达载体的构建第108-109页
            5.3.1.2 β-葡萄糖苷酶和融合β-葡萄糖苷酶的诱导表达及纯化第109页
            5.3.1.3 β-葡萄糖苷酶和融合β-葡萄糖苷酶酶学特性研究第109-111页
        5.3.2 MS和SMS生物制氢发酵条件的优化第111-112页
        5.3.3 重组β-葡萄糖苷酶在CBP中的功能研究第112-115页
            5.3.3.1 重组β-葡萄糖苷酶对热纤梭菌产氢的影响第112-113页
            5.3.3.2 重组β-葡萄糖苷酶对热纤梭菌生物糖化的影响第113-115页
        5.3.4 漆酶的克隆表达及其酶学特性研究第115-119页
            5.3.4.1 漆酶的克隆及其表达载体的构建第115-116页
            5.3.4.2 漆酶的诱导表达及其纯化第116-117页
            5.3.4.3 漆酶的酶学特性研究第117-119页
        5.3.5 不同解毒方法对酸预处理甘蔗渣降解性能的影响第119-120页
        5.3.6 共培养发酵策略对产氢的影响第120-122页
        5.3.7 碳酸钙和接种时间对共培养体系产氢量的影响第122-124页
        5.3.8 最佳共培养条件下的产氢时间曲线第124-125页
        5.3.9 共培养体系中菌体的reads比第125页
        5.3.10 转录组的差异表达基因分析第125-127页
        5.3.11 MJ1差异基因的功能分析第127-128页
        5.3.12 DSM1313差异基因的功能分析第128-130页
    5.5 本章小结第130-131页
结论与展望第131-134页
    结论第131-132页
    本研究的创新之处第132页
    展望第132-134页
参考文献第134-148页
附录第148-156页
攻读博士学位期间取得的研究成果第156-159页
致谢第159-160页
附件第160页

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