| 中文摘要 | 第1-15页 |
| ABSTRACT | 第15-17页 |
| 第一章 中心蛋白综述 | 第17-28页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·中心蛋白的结构 | 第17-21页 |
| ·EF-手结构的概况 | 第17-18页 |
| ·EF-手结构蛋白钙配位性质 | 第18页 |
| ·中心蛋白的结构 | 第18-21页 |
| ·中心蛋白在细胞内的分布和定位 | 第21-22页 |
| ·中心蛋白的功能 | 第22-24页 |
| ·EF-手钙结合蛋白的作用机制 | 第24-26页 |
| ·本课题研究背景及意义 | 第26-28页 |
| 第二章 中心蛋白及突变蛋白的表达、纯化 | 第28-36页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·菌种与质粒 | 第28页 |
| ·主要试剂及材料 | 第28页 |
| ·主要试剂的配制 | 第28-29页 |
| ·主要仪器及设备 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·中心蛋白及突变体的表达 | 第30页 |
| ·中心蛋白及突变体的纯化 | 第30-32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-35页 |
| ·突变蛋白的序列分析 | 第32页 |
| ·突变蛋白的表达、纯化后的鉴定 | 第32-35页 |
| ·本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 四个保守天冬氨酸在中心蛋白金属结合性质中的作用 | 第36-48页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·试剂与材料 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·蛋白的分离纯化与制备 | 第36-37页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第37页 |
| ·稀土离子(Tb~(3+))储备液的配制 | 第37页 |
| ·紫外光谱的测定 | 第37页 |
| ·荧光光谱的测定 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-47页 |
| ·中心蛋白野生型及四个突变体的紫外可见吸收光谱 | 第37-38页 |
| ·中心蛋白野生型及四个突变体的荧光光谱 | 第38-39页 |
| ·铽离子与野生型中心蛋白及突变体相互作用的敏化荧光研究 | 第39-41页 |
| ·铽离子与四个突变体相互作用的敏化荧光研究 | 第41-43页 |
| ·铽离子与钙离子与loop Ⅱ的结合常数的测定 | 第43-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 突变对中心蛋白聚集性质影响的研究 | 第48-59页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·试剂与材料 | 第48-49页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·化学交联相关试剂 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第49页 |
| ·稀土离子(Tb~(3+))储备液的配制 | 第49页 |
| ·TNS溶液的配制 | 第49页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第49页 |
| ·荧光光谱的测定 | 第49页 |
| ·化学交联实验 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-58页 |
| ·共振光散射理论 | 第50页 |
| ·金属离子引起的中心蛋白自聚集行为 | 第50-51页 |
| ·金属离子引起的突变体自聚集行为 | 第51-53页 |
| ·TNS对中心蛋白及突变体自聚集的影响 | 第53-55页 |
| ·离子强度对中心蛋白及突变体自聚集的影响 | 第55-56页 |
| ·pH对中心蛋白及突变体自聚集的影响 | 第56-57页 |
| ·化学交联研究中心蛋白及突变体的自聚集 | 第57-58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 第五章 四个保守天冬氨酸在保持中心蛋白正确构象中的作用 | 第59-68页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·试剂与材料 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-60页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第59-60页 |
| ·稀土离子(Tb~(3+))储备液的配制 | 第60页 |
| ·TNS溶液的配制 | 第60页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第60页 |
| ·荧光光谱的测定 | 第60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-67页 |
| ·TNS与中心蛋白作用的荧光光谱测定 | 第60-61页 |
| ·中心蛋白及其四个突变体圆二色谱研究 | 第61页 |
| ·TNS与不同中心蛋白作用的荧光光谱研究 | 第61-62页 |
| ·TNS与金属离子饱和的不同中心蛋白作用的荧光光谱研究 | 第62-63页 |
| ·TNS与金属离子饱和的不同中心蛋白作用的结合常数测定 | 第63-65页 |
| ·铽滴定TNS结合后的中心蛋白的荧光研究 | 第65-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第六章 分子模拟 | 第68-75页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·方法与模型 | 第68-71页 |
| ·分子力场的基本原理 | 第68-69页 |
| ·分子结构优化方法 | 第69-70页 |
| ·模型的搭建 | 第70页 |
| ·模拟的方法 | 第70-71页 |
| ·结果与讨论 | 第71-74页 |
| ·Asp37和Asp73在N-EoCen金属结合中的作用 | 第71-72页 |
| ·Asp37、Asp73、Asp110和Asp146在中心蛋白金属结合中的作用 | 第72-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 总结与展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第86页 |
| 个人简况 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
