| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 副猪嗜血杆菌研究现状 | 第12-18页 |
| 1.1.1 病原学 | 第12-13页 |
| 1.1.2 流行病学与分型 | 第13-14页 |
| 1.1.3 致病机理与毒力因子 | 第14-15页 |
| 1.1.4 病理变化 | 第15页 |
| 1.1.5 诊断 | 第15-17页 |
| 1.1.6 防治 | 第17-18页 |
| 1.2 抑制消减杂交 | 第18-22页 |
| 1.2.1 抑制消减杂交技术的原理 | 第18-20页 |
| 1.2.2 抑制消减杂交技术的特点 | 第20页 |
| 1.2.3 抑制消减杂交技术的应用 | 第20-22页 |
| 1.3 本试验研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-33页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌种及载体 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 培养基配制 | 第24页 |
| 2.1.4 Southern blot溶液配制 | 第24页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 细菌纯培养及基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.2 抑制消减杂交(SSH) | 第26-30页 |
| 2.2.3 差异片断的克隆 | 第30页 |
| 2.2.4 Southern blot分析 | 第30-31页 |
| 2.2.5 差异片段序列测定与分析 | 第31页 |
| 2.2.6 副猪嗜血杆菌PCR诊断方法的建立 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-40页 |
| 3.1 基因组DNA提取 | 第33页 |
| 3.2 酶切 | 第33-34页 |
| 3.3 Hps基因组DNA接头连接效率分析 | 第34页 |
| 3.4 抑制消减杂交结果及效率分析 | 第34-35页 |
| 3.5 差异片断克隆的筛选 | 第35-36页 |
| 3.6 Southern blot分析 | 第36页 |
| 3.7 差异基因同源性分析 | 第36-37页 |
| 3.8 PCR诊断方法的建立 | 第37-40页 |
| 3.8.1 PCR特异性分析 | 第37-38页 |
| 3.8.2 PCR敏感性分析 | 第38-39页 |
| 3.8.3 临床样品的检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-45页 |
| 4.1 基因组DNA质量 | 第40页 |
| 4.2 抑制消减杂交技术在细菌差异基因筛选中的应用 | 第40-41页 |
| 4.3 抑制消减杂交技术的影响因素 | 第41-42页 |
| 4.4 Southern blot分析 | 第42-43页 |
| 4.5 PCR诊断方法的建立 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53页 |