摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
英文缩略词表(ABBREVIATION) | 第11-12页 |
前言 | 第12-14页 |
1 材料、实验试剂与仪器 | 第14-22页 |
1.1 材料 | 第14-15页 |
1.2 实验试剂 | 第15页 |
1.3 实验仪器与设备 | 第15-16页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第16-22页 |
2 方法 | 第22-36页 |
2.1 载体的构建 | 第22-26页 |
2.1.1 引物设计 | 第22-23页 |
2.1.2 E.coli 基因组 DNA 的制备 | 第23页 |
2.1.3 PCR 扩增 FtsZ 基因 | 第23-24页 |
2.1.4 DNA 片段胶回收 | 第24-25页 |
2.1.5 酶切 | 第25页 |
2.1.6 连接(载体与目的片段的摩尔比为 1:3) | 第25-26页 |
2.2 质粒的提取 | 第26-30页 |
2.2.1 制备超级感受态细胞 | 第26页 |
2.2.2 CaCl2法制备感受态细胞 | 第26-27页 |
2.2.3 电转化感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
2.2.4 质粒的化学转化 | 第28页 |
2.2.5 质粒的电转化 | 第28-29页 |
2.2.6 质粒的提取 | 第29-30页 |
2.5 目标蛋白的诱导表达 | 第30页 |
2.6 细菌的冻存 | 第30页 |
2.7 细菌裂解及菌体蛋白的制备 | 第30-31页 |
2.8 蛋白质凝胶电泳 | 第31页 |
2.9 蛋白免疫印迹分析 | 第31-33页 |
2.10 荧光显微镜和激光共聚焦显微镜 | 第33页 |
2.11 PULL DOWN 分析 | 第33-36页 |
3 结果 | 第36-54页 |
3.1 不同细菌来源的 FTSZ 同源性分析 | 第36-38页 |
3.2 E.COLI 的 FTSZ 蛋白结构预测 | 第38-39页 |
3.3 PFL13 表达载体构建 | 第39-44页 |
3.4 LF6(△MREB)菌株的构建 | 第44-48页 |
3.5 MREB 在 E.COLI 中形成螺旋状结构 | 第48-49页 |
3.6 MREB 在 LF6(△MREB)中的定位模式 | 第49页 |
3.7 FTSZ 在 E.COLI 中形成环状结构 | 第49-50页 |
3.8 FTSZ 的突变体是否影响 MREB 的定位 | 第50-52页 |
3.9 FTSZ 是否影响 E. COLI 中 MREB 的荧光定位模式 | 第52页 |
3.10 FTSZ 与 MREB 在细胞内相互作用,且在一定的时相共定位于 E.COLI 相应的部位 | 第52-53页 |
3.11 FTSZ 突变体影响 MREB 荧光定位模式的分子机制主要是影响了 FTSZ-MREB 间的相互作用 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-60页 |
综述 | 第60-68页 |
参考文献 | 第65-68页 |
致谢 | 第68-70页 |