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探索FtsZ突变体影响E.coli中MreB细胞定位模式的分子机制

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
英文缩略词表(ABBREVIATION)第11-12页
前言第12-14页
1 材料、实验试剂与仪器第14-22页
    1.1 材料第14-15页
    1.2 实验试剂第15页
    1.3 实验仪器与设备第15-16页
    1.4 主要溶液的配制第16-22页
2 方法第22-36页
    2.1 载体的构建第22-26页
        2.1.1 引物设计第22-23页
        2.1.2 E.coli 基因组 DNA 的制备第23页
        2.1.3 PCR 扩增 FtsZ 基因第23-24页
        2.1.4 DNA 片段胶回收第24-25页
        2.1.5 酶切第25页
        2.1.6 连接(载体与目的片段的摩尔比为 1:3)第25-26页
    2.2 质粒的提取第26-30页
        2.2.1 制备超级感受态细胞第26页
        2.2.2 CaCl2法制备感受态细胞第26-27页
        2.2.3 电转化感受态细胞的制备第27-28页
        2.2.4 质粒的化学转化第28页
        2.2.5 质粒的电转化第28-29页
        2.2.6 质粒的提取第29-30页
    2.5 目标蛋白的诱导表达第30页
    2.6 细菌的冻存第30页
    2.7 细菌裂解及菌体蛋白的制备第30-31页
    2.8 蛋白质凝胶电泳第31页
    2.9 蛋白免疫印迹分析第31-33页
    2.10 荧光显微镜和激光共聚焦显微镜第33页
    2.11 PULL DOWN 分析第33-36页
3 结果第36-54页
    3.1 不同细菌来源的 FTSZ 同源性分析第36-38页
    3.2 E.COLI 的 FTSZ 蛋白结构预测第38-39页
    3.3 PFL13 表达载体构建第39-44页
    3.4 LF6(△MREB)菌株的构建第44-48页
    3.5 MREB 在 E.COLI 中形成螺旋状结构第48-49页
    3.6 MREB 在 LF6(△MREB)中的定位模式第49页
    3.7 FTSZ 在 E.COLI 中形成环状结构第49-50页
    3.8 FTSZ 的突变体是否影响 MREB 的定位第50-52页
    3.9 FTSZ 是否影响 E. COLI 中 MREB 的荧光定位模式第52页
    3.10 FTSZ 与 MREB 在细胞内相互作用,且在一定的时相共定位于 E.COLI 相应的部位第52-53页
    3.11 FTSZ 突变体影响 MREB 荧光定位模式的分子机制主要是影响了 FTSZ-MREB 间的相互作用第53-54页
4 讨论第54-56页
结论第56-58页
参考文献第58-60页
综述第60-68页
    参考文献第65-68页
致谢第68-70页

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