摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
中英文缩略词表 | 第11-12页 |
第1章 前言 | 第12-14页 |
第2章 材料与仪器 | 第14-19页 |
2.1 实验动物及实验细胞 | 第14页 |
2.2 实验试剂 | 第14-18页 |
2.2.1 主要购置试剂 | 第14-15页 |
2.2.2 主要配置试剂 | 第15-18页 |
2.3 实验仪器与器材 | 第18-19页 |
第3章 实验方法 | 第19-30页 |
3.1 SD-大鼠基底动脉平滑肌细胞原代培养与鉴定 | 第19-21页 |
3.1.1 基底动脉平滑肌细胞原代培养 | 第19页 |
3.1.2 细胞分散 | 第19页 |
3.1.3 传代培养 | 第19-20页 |
3.1.4 细胞冻存 | 第20页 |
3.1.5 细胞复苏 | 第20页 |
3.1.6 原代平滑肌细胞鉴定 | 第20-21页 |
3.2 腺病毒载体构建 | 第21-26页 |
3.2.1 构建 PAV.KdSi.U/eGFP-U6-shCx43 | 第21页 |
3.2.2 病毒的包装 | 第21-22页 |
3.2.3 腺病毒滴度检测 | 第22页 |
3.2.4 腺病毒感染平滑肌细胞预实验 | 第22-23页 |
3.2.5 Western blot 检测病毒感染后 Cx43 表达水平的变化 | 第23-26页 |
3.3 脑血管痉挛双层细胞共培养模型的构建及 Cx43 表达量的降低对其细胞间信号交流的影响 | 第26-29页 |
3.3.1 OxyHb 诱导的脑血管痉挛细胞模型的建立及其细胞间的收缩信号交流 | 第26-28页 |
3.3.2 Cx43 表达量的降低对脑血管痉挛细胞模型收缩信号交流的影响 | 第28-29页 |
3.4 数据统计分析 | 第29-30页 |
第4章 实验结果 | 第30-34页 |
4.1 大鼠基底动脉平滑肌细胞原代培养与鉴定 | 第30页 |
4.2 shRNA-Cx43 腺病毒载体的构建 | 第30-31页 |
4.2.1 质粒 PAV.KdSi.U/eGFP-U6-shCx43 的构建 | 第30页 |
4.2.2 腺病毒的包装和滴度的检测 | 第30-31页 |
4.2.3 腺病毒感染效率检测 | 第31页 |
4.2.4 Western blot 检测病毒感染后 Cx43 表达水平的变化(表 1) | 第31页 |
4.3 光镜下观察各组 HE 染色平滑肌细胞长度变化(表 2) | 第31-32页 |
4.4 Western blot 检测各组 Cx43 蛋白表达变化(表 3) | 第32页 |
4.5 共聚焦显微镜观察各组信号传输的变化(表 4) | 第32-34页 |
第5章 讨论 | 第34-42页 |
5.1 脑血管痉挛与 OxyHb | 第34-35页 |
5.2 Ca~(2+)与血管收缩 | 第35-36页 |
5.3 缝隙连接(Gap junction,GJ) | 第36-37页 |
5.3.1 缝隙连接的基本结构和功能 | 第36-37页 |
5.3.2 缝隙连接与血管功能 | 第37页 |
5.4 缝隙连接蛋白 Cx43 | 第37-42页 |
5.4.1 缝隙连接蛋白 Cx43 与血管功能 | 第37-39页 |
5.4.2 缝隙连接蛋白 Cx43 与 CVS | 第39-40页 |
5.4.3 初步探讨缝隙连接蛋白 Cx43 参与 CVS 发生发展的机制 | 第40-42页 |
第6章 结论与展望 | 第42-43页 |
6.1 结论 | 第42页 |
6.2 展望 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
附图 | 第49-60页 |
综述 | 第60-66页 |
参考文献 | 第64-66页 |