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缝隙连接蛋白43参与脑血管痉挛的体外实验研究

摘要第3-6页
Abstract第6-8页
中英文缩略词表第11-12页
第1章 前言第12-14页
第2章 材料与仪器第14-19页
    2.1 实验动物及实验细胞第14页
    2.2 实验试剂第14-18页
        2.2.1 主要购置试剂第14-15页
        2.2.2 主要配置试剂第15-18页
    2.3 实验仪器与器材第18-19页
第3章 实验方法第19-30页
    3.1 SD-大鼠基底动脉平滑肌细胞原代培养与鉴定第19-21页
        3.1.1 基底动脉平滑肌细胞原代培养第19页
        3.1.2 细胞分散第19页
        3.1.3 传代培养第19-20页
        3.1.4 细胞冻存第20页
        3.1.5 细胞复苏第20页
        3.1.6 原代平滑肌细胞鉴定第20-21页
    3.2 腺病毒载体构建第21-26页
        3.2.1 构建 PAV.KdSi.U/eGFP-U6-shCx43第21页
        3.2.2 病毒的包装第21-22页
        3.2.3 腺病毒滴度检测第22页
        3.2.4 腺病毒感染平滑肌细胞预实验第22-23页
        3.2.5 Western blot 检测病毒感染后 Cx43 表达水平的变化第23-26页
    3.3 脑血管痉挛双层细胞共培养模型的构建及 Cx43 表达量的降低对其细胞间信号交流的影响第26-29页
        3.3.1 OxyHb 诱导的脑血管痉挛细胞模型的建立及其细胞间的收缩信号交流第26-28页
        3.3.2 Cx43 表达量的降低对脑血管痉挛细胞模型收缩信号交流的影响第28-29页
    3.4 数据统计分析第29-30页
第4章 实验结果第30-34页
    4.1 大鼠基底动脉平滑肌细胞原代培养与鉴定第30页
    4.2 shRNA-Cx43 腺病毒载体的构建第30-31页
        4.2.1 质粒 PAV.KdSi.U/eGFP-U6-shCx43 的构建第30页
        4.2.2 腺病毒的包装和滴度的检测第30-31页
        4.2.3 腺病毒感染效率检测第31页
        4.2.4 Western blot 检测病毒感染后 Cx43 表达水平的变化(表 1)第31页
    4.3 光镜下观察各组 HE 染色平滑肌细胞长度变化(表 2)第31-32页
    4.4 Western blot 检测各组 Cx43 蛋白表达变化(表 3)第32页
    4.5 共聚焦显微镜观察各组信号传输的变化(表 4)第32-34页
第5章 讨论第34-42页
    5.1 脑血管痉挛与 OxyHb第34-35页
    5.2 Ca~(2+)与血管收缩第35-36页
    5.3 缝隙连接(Gap junction,GJ)第36-37页
        5.3.1 缝隙连接的基本结构和功能第36-37页
        5.3.2 缝隙连接与血管功能第37页
    5.4 缝隙连接蛋白 Cx43第37-42页
        5.4.1 缝隙连接蛋白 Cx43 与血管功能第37-39页
        5.4.2 缝隙连接蛋白 Cx43 与 CVS第39-40页
        5.4.3 初步探讨缝隙连接蛋白 Cx43 参与 CVS 发生发展的机制第40-42页
第6章 结论与展望第42-43页
    6.1 结论第42页
    6.2 展望第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-49页
附图第49-60页
综述第60-66页
    参考文献第64-66页

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