摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 植物干旱 | 第11页 |
1.2 干旱胁迫对植物的伤害 | 第11-12页 |
1.2.1 干旱对膜系统的伤害 | 第11页 |
1.2.2 干旱对光合作用的影响 | 第11-12页 |
1.2.3 干旱引发的活性氧对植物的氧化伤害 | 第12页 |
1.3 植物抗旱的生理机制 | 第12-13页 |
1.3.1 气孔反应 | 第12页 |
1.3.2 脱落酸(ABA)的变化 | 第12-13页 |
1.3.3 渗透物质的变化 | 第13页 |
1.3.4 抗氧化防御系统的启动 | 第13页 |
1.4 植物抗旱分子机制 | 第13-14页 |
1.5 转录辅调节因子 | 第14页 |
1.6 MBF1 的结构 | 第14-15页 |
1.7 MBF1 的功能 | 第15-17页 |
1.7.1 植物中 MBF1 的研究 | 第15-16页 |
1.7.1.1 植物 MBF1 调节生长发育过程 | 第15页 |
1.7.1.2 植物 MBF1 响应多种环境胁迫 | 第15-16页 |
1.7.2 人类 MBF1 | 第16-17页 |
1.7.3 其他真核生物 MBF1 | 第17页 |
1.8 研究目的及意义 | 第17-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-26页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 引物 | 第18页 |
2.1.3 菌株及质粒 | 第18-19页 |
2.1.4 序列 | 第19页 |
2.1.5 主要仪器设备及化学试剂 | 第19页 |
2.2 方法 | 第19-26页 |
2.2.1 VvMBF1 基因克隆及其表达分析 | 第19-21页 |
2.2.1.1 植物材料的处理 | 第19页 |
2.2.1.2 总 RNA 提取 | 第19-20页 |
2.2.1.3 cDNA 第一链的合成 | 第20页 |
2.2.1.4 qRT-PCR 检测干旱和 ABA 处理后 VvMBF1 的表达 | 第20页 |
2.2.1.5 VvMBF1 基因的克隆和测序 | 第20-21页 |
2.2.1.6 VvMBF1 基因氨基酸序列分析 | 第21页 |
2.2.2 VvMBF1 基因在拟南芥中的抗旱功能分析 | 第21-26页 |
2.2.2.1 VvMBF1 基因过量表达载体的构建 | 第21页 |
2.2.2.2 农杆菌感受态细胞的制备 | 第21页 |
2.2.2.3 农杆菌的转化 | 第21-22页 |
2.2.2.4 菌液 PCR 检测 | 第22页 |
2.2.2.5 花序浸染法转化拟南芥 | 第22页 |
2.2.2.6 转基因拟南芥的筛选 | 第22页 |
2.2.2.7 转基因拟南芥 DNA 水平检测 | 第22-23页 |
2.2.2.8 转基因拟南芥 qRT-PCR 检测 | 第23页 |
2.2.2.9 qRT-PCR 检测甘露醇处理拟南芥后 VvMBF1 的表达 | 第23页 |
2.2.2.10 甘露醇处理后拟南芥种子的发芽率统计 | 第23页 |
2.2.2.11 拟南芥植株对干旱胁迫的响应 | 第23页 |
2.2.2.12 干旱处理后拟南芥生理指标的测定 | 第23-25页 |
2.2.2.13 ABA 处理后拟南芥植株的气孔反应 | 第25页 |
2.2.2.14 qRT-PCR 检测干旱相关基因的表达 | 第25-26页 |
第三章 结果与分析 | 第26-37页 |
3.1 VvMBF1 基因克隆及其表达分析 | 第26-30页 |
3.1.1 VvMBF1 基因在干旱和 ABA 处理后的表达分析 | 第26页 |
3.1.2 VvMBF1 基因的克隆 | 第26-27页 |
3.1.3 VvMBF1 基因氨基酸序列分析 | 第27-30页 |
3.2 葡萄 VvMBF1 基因在拟南芥中的抗旱功能分析 | 第30-37页 |
3.2.1 VvMBF1 基因过量表达载体的构建 | 第30页 |
3.2.2 VvMBF1 转基因拟南芥的筛选结果 | 第30-32页 |
3.2.3 甘露醇处理增加了转基因拟南芥中 VvMBF1 的表达量 | 第32页 |
3.2.4 VvMBF1 提高了转基因株系在甘露醇处理下的种子发芽率 | 第32-34页 |
3.2.5 VvMBF1 提高了转基因株系对干旱胁迫的抵抗力 | 第34页 |
3.2.6 干旱处理后拟南芥生理指标的变化 | 第34-35页 |
3.2.7 ABA 处理后拟南芥植株叶片的气孔反应 | 第35-36页 |
3.2.8 实时定量 RT-PCR 检测干旱相关基因的表达 | 第36-37页 |
第四章 讨论 | 第37-39页 |
第五章 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |