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葡萄转录辅激活因子VvMBF1基因功能研究

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第11-18页
    1.1 植物干旱第11页
    1.2 干旱胁迫对植物的伤害第11-12页
        1.2.1 干旱对膜系统的伤害第11页
        1.2.2 干旱对光合作用的影响第11-12页
        1.2.3 干旱引发的活性氧对植物的氧化伤害第12页
    1.3 植物抗旱的生理机制第12-13页
        1.3.1 气孔反应第12页
        1.3.2 脱落酸(ABA)的变化第12-13页
        1.3.3 渗透物质的变化第13页
        1.3.4 抗氧化防御系统的启动第13页
    1.4 植物抗旱分子机制第13-14页
    1.5 转录辅调节因子第14页
    1.6 MBF1 的结构第14-15页
    1.7 MBF1 的功能第15-17页
        1.7.1 植物中 MBF1 的研究第15-16页
            1.7.1.1 植物 MBF1 调节生长发育过程第15页
            1.7.1.2 植物 MBF1 响应多种环境胁迫第15-16页
        1.7.2 人类 MBF1第16-17页
        1.7.3 其他真核生物 MBF1第17页
    1.8 研究目的及意义第17-18页
第二章 材料和方法第18-26页
    2.1 材料第18-19页
        2.1.1 植物材料第18页
        2.1.2 引物第18页
        2.1.3 菌株及质粒第18-19页
        2.1.4 序列第19页
        2.1.5 主要仪器设备及化学试剂第19页
    2.2 方法第19-26页
        2.2.1 VvMBF1 基因克隆及其表达分析第19-21页
            2.2.1.1 植物材料的处理第19页
            2.2.1.2 总 RNA 提取第19-20页
            2.2.1.3 cDNA 第一链的合成第20页
            2.2.1.4 qRT-PCR 检测干旱和 ABA 处理后 VvMBF1 的表达第20页
            2.2.1.5 VvMBF1 基因的克隆和测序第20-21页
            2.2.1.6 VvMBF1 基因氨基酸序列分析第21页
        2.2.2 VvMBF1 基因在拟南芥中的抗旱功能分析第21-26页
            2.2.2.1 VvMBF1 基因过量表达载体的构建第21页
            2.2.2.2 农杆菌感受态细胞的制备第21页
            2.2.2.3 农杆菌的转化第21-22页
            2.2.2.4 菌液 PCR 检测第22页
            2.2.2.5 花序浸染法转化拟南芥第22页
            2.2.2.6 转基因拟南芥的筛选第22页
            2.2.2.7 转基因拟南芥 DNA 水平检测第22-23页
            2.2.2.8 转基因拟南芥 qRT-PCR 检测第23页
            2.2.2.9 qRT-PCR 检测甘露醇处理拟南芥后 VvMBF1 的表达第23页
            2.2.2.10 甘露醇处理后拟南芥种子的发芽率统计第23页
            2.2.2.11 拟南芥植株对干旱胁迫的响应第23页
            2.2.2.12 干旱处理后拟南芥生理指标的测定第23-25页
            2.2.2.13 ABA 处理后拟南芥植株的气孔反应第25页
            2.2.2.14 qRT-PCR 检测干旱相关基因的表达第25-26页
第三章 结果与分析第26-37页
    3.1 VvMBF1 基因克隆及其表达分析第26-30页
        3.1.1 VvMBF1 基因在干旱和 ABA 处理后的表达分析第26页
        3.1.2 VvMBF1 基因的克隆第26-27页
        3.1.3 VvMBF1 基因氨基酸序列分析第27-30页
    3.2 葡萄 VvMBF1 基因在拟南芥中的抗旱功能分析第30-37页
        3.2.1 VvMBF1 基因过量表达载体的构建第30页
        3.2.2 VvMBF1 转基因拟南芥的筛选结果第30-32页
        3.2.3 甘露醇处理增加了转基因拟南芥中 VvMBF1 的表达量第32页
        3.2.4 VvMBF1 提高了转基因株系在甘露醇处理下的种子发芽率第32-34页
        3.2.5 VvMBF1 提高了转基因株系对干旱胁迫的抵抗力第34页
        3.2.6 干旱处理后拟南芥生理指标的变化第34-35页
        3.2.7 ABA 处理后拟南芥植株叶片的气孔反应第35-36页
        3.2.8 实时定量 RT-PCR 检测干旱相关基因的表达第36-37页
第四章 讨论第37-39页
第五章 结论第39-40页
参考文献第40-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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