| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略符号说明 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 抗生素的耐药机制介绍 | 第13-14页 |
| 1.2 整合子 | 第14-17页 |
| 1.2.1 整合子简介 | 第14页 |
| 1.2.2 Ⅰ型整合子结构 | 第14-16页 |
| 1.2.3 P_c启动子 | 第16-17页 |
| 1.3 影响Ⅰ型整合子整合酶及基因盒表达的因素 | 第17-20页 |
| 1.3.1 位置效应对基因盒表达水平的影响 | 第18页 |
| 1.3.2 SOS对Ⅰ型整合酶表达的影响 | 第18-19页 |
| 1.3.3 cAMP-CRP途径对Ⅰ型整合酶表达的影响 | 第19-20页 |
| 1.4 课题意义及立题依据 | 第20-21页 |
| 第二章 微量抗生素对crp转录水平的影响 | 第21-31页 |
| 2.1 前言 | 第21-22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验所用培养基及其配制 | 第23-24页 |
| 2.2.3 实验所用抗生素及其配制 | 第24页 |
| 2.2.4 实验所用溶液及其配制 | 第24-25页 |
| 2.2.5 本章所用引物 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.3.1 实验菌株活化及纯化 | 第26页 |
| 2.3.2 细菌总基因组DNA的提取(CTAB法) | 第26-27页 |
| 2.3.3 crp基因的检测 | 第27页 |
| 2.3.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| 2.3.5 诱导实验 | 第27-28页 |
| 2.3.6 细菌总RNA提取 | 第28页 |
| 2.3.7 反转录实验 | 第28页 |
| 2.3.8 qPCR检测微量抗生素对crp转录水平的影响 | 第28-29页 |
| 2.3.9 数据处理 | 第29页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第29-31页 |
| 2.4.1 实验结果 | 第29-30页 |
| 2.4.2 本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 实验菌株及双向启动子载体构建 | 第31-52页 |
| 3.1 引言 | 第31-32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-37页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第32-33页 |
| 3.2.2 实验所用培养基及其配制 | 第33页 |
| 3.2.3 实验所用抗生素及其配制 | 第33页 |
| 3.2.4 实验所用溶液及其配制 | 第33-34页 |
| 3.2.5 本章所用引物 | 第34-37页 |
| 3.3 试验方法 | 第37-44页 |
| 3.3.1 用于构建的PCR | 第37页 |
| 3.3.2 质粒小提 | 第37页 |
| 3.3.3 切胶回收 | 第37页 |
| 3.3.4 crp基因敲除 | 第37-40页 |
| 3.3.5 双向启动子载体构建 | 第40-42页 |
| 3.3.6 P_c+gfp报告基因敲入 | 第42-44页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第44-52页 |
| 3.4.1 crp基因敲除结果 | 第44-45页 |
| 3.4.2 新构建双向启动子结果 | 第45-48页 |
| 3.4.3 基因敲入结果 | 第48-51页 |
| 3.4.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 微量抗生素对P_(int)以及P_c转录及表达水平的影响 | 第52-67页 |
| 4.1 引言 | 第52页 |
| 4.2 实验材料 | 第52-54页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第52页 |
| 4.2.2 实验所用培养基及其配制 | 第52-53页 |
| 4.2.3 实验所用抗生素及其配制 | 第53-54页 |
| 4.2.4 实验所用溶液及其配制 | 第54页 |
| 4.2.5 实验仪器 | 第54页 |
| 4.2.6 本章所用引物 | 第54页 |
| 4.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.3.1 实验菌株活化及纯化 | 第54-55页 |
| 4.3.2 诱导实验 | 第55页 |
| 4.3.3 细菌总RNA的提取 | 第55页 |
| 4.3.4 反转录实验 | 第55页 |
| 4.3.5 qPCR检测微量抗生素对P_c以及P+(int)转录水平的影响 | 第55页 |
| 4.3.6 数据处理 | 第55页 |
| 4.3.7 绿色荧光蛋白的检测 | 第55-56页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第56-67页 |
| 4.4.1 IntI1及dfrA1 qPCR检测结果 | 第56-61页 |
| 4.4.2 GFP检测结果 | 第61-65页 |
| 4.4.3 本章小结 | 第65-67页 |
| 第五章 总结与展望 | 第67-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 硕士期间发表论文 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第76页 |
