中文摘要 | 第4-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
1. 文献综述 | 第18-41页 |
1.1 小麦基因组的起源和进化 | 第18-19页 |
1.1.1 二倍体一粒小麦及其基因组(AA,2n=14)的起源 | 第18页 |
1.1.2 四倍体二粒小麦及其基因组(AABB,2n=28)的起源 | 第18-19页 |
1.1.3 六倍体小麦及其基因组(AABBDD,2n=42)的起源 | 第19页 |
1.1.4 小麦G组染色体的起源 | 第19页 |
1.2 普通小麦的远缘杂交 | 第19-22页 |
1.3 黑麦属植物的研究背景 | 第22页 |
1.4 诱导外缘染色质进入小麦基因组的方法 | 第22-27页 |
1.4.1 染色体组转移 | 第22-23页 |
1.4.2 染色体的附加和代换 | 第23-24页 |
1.4.3 染色体易位 | 第24-27页 |
1.4.3.1 染色体断裂-融合的自发易位 | 第24-25页 |
1.4.3.2 小麦5B染色体缺失材料的利用 | 第25页 |
1.4.3.3 利用ph基因诱导易位 | 第25页 |
1.4.3.4 辐射诱导易位 | 第25-26页 |
1.4.3.5 利用黑麦单体附加系作为工具诱导易位 | 第26-27页 |
1.5 黑麦染色质在小麦基因组中的重组 | 第27-29页 |
1.5.1 小麦-黑麦染色体易位系 | 第27页 |
1.5.2 小麦-黑麦1RS.1BL易位系的起源与利用 | 第27-29页 |
1.5.3 1RS.1BL易位系在育种中面临的问题和解决思路 | 第29页 |
1.6 小麦中的抗条锈病基因 | 第29-32页 |
1.7 小麦籽粒中的储藏蛋白分类 | 第32-38页 |
1.7.1 醇溶蛋白的分类组成及对品质的影响 | 第33-35页 |
1.7.2 谷蛋白的分类组成及对品质的影响 | 第35-38页 |
1.7.2.1 HMW-GS的分类组成及对品质的影响 | 第35-37页 |
1.7.2.2 LMW-GS的分类组成及对品质的影响 | 第37-38页 |
1.8 黑麦碱的组成分类及其对小麦品质的影响 | 第38-39页 |
1.9 穗发芽的机制及其对小麦品质的影响 | 第39-41页 |
1.9.1 休眠特性对穗发芽的影响 | 第39页 |
1.9.2 α-淀粉酶活性对穗发芽的影响 | 第39-40页 |
1.9.3 穗发芽的鉴定 | 第40-41页 |
2. 材料与方法 | 第41-65页 |
2.1 实验材料 | 第41-42页 |
2.2 实验方法 | 第42-65页 |
2.2.1 细胞学实验方法 | 第42页 |
2.2.2 基因组原位杂交(GISH) | 第42-44页 |
2.2.3 荧光原位杂交(FISH、ND-FISH) | 第44-46页 |
2.2.4 小麦、黑麦gDNA的提取 | 第46-47页 |
2.2.5 特殊分子标记分析 | 第47-48页 |
2.2.5.1 分子标记的序列与扩增 | 第47-48页 |
2.2.5.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第48页 |
2.2.6 SSR分子标记分析 | 第48-51页 |
2.2.6.1 SSR分子标记的序列与扩增 | 第48-50页 |
2.2.6.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第50-51页 |
2.2.7 ω-黑麦碱基因Sec-1的克隆 | 第51-54页 |
2.2.7.1 感受态细胞的制备 | 第51-52页 |
2.2.7.2 扩增片段的回收纯化 | 第52页 |
2.2.7.3 目的DNA片段与载体的连接 | 第52-53页 |
2.2.7.4 转化 | 第53页 |
2.2.7.5 挑菌落、菌落PCR及检测 | 第53-54页 |
2.2.7.6 序列测定及分析 | 第54页 |
2.2.8 醇溶蛋白电泳分析方法(A-PAGE) | 第54-56页 |
2.2.8.1 A-PAGE相关试剂的制备 | 第55页 |
2.2.8.2 醇溶蛋白提取方法 | 第55页 |
2.2.8.3 A-PAGE电泳方法 | 第55-56页 |
2.2.9 小麦高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)的鉴定 | 第56-58页 |
2.2.9.1 相关试剂的配置 | 第56-57页 |
2.2.9.2 高分子量谷蛋白亚基电泳分析方法 | 第57-58页 |
2.2.10 小麦低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)电泳分析 | 第58-59页 |
2.2.10.1 所需试剂的配置 | 第58页 |
2.2.10.2 蛋白质提取 | 第58-59页 |
2.2.11 小麦籽粒品质性状测定 | 第59页 |
2.2.12 穗发芽抗性的鉴定 | 第59-60页 |
2.2.12.1 整穗发芽率鉴定 | 第59-60页 |
2.2.12.2 发芽指数测定 | 第60页 |
2.2.13 α-淀粉酶活力的测定 | 第60-63页 |
2.2.13.1 相关试剂的配置: | 第61页 |
2.2.13.2 α-淀粉酶酶液的提取: | 第61-62页 |
2.2.13.3 麦芽糖标准曲线的制作 | 第62页 |
2.2.13.4 α-淀粉酶酶活力的测定 | 第62-63页 |
2.2.13.5 α-淀粉酶酶活力计算 | 第63页 |
2.2.13.6 麦芽糖标准曲线 | 第63页 |
2.2.14. 田间农艺性状调查 | 第63-64页 |
2.2.15 抗病性鉴定 | 第64-65页 |
3. 结果与分析 | 第65-111页 |
3.1 A42912和威宁黑麦R3杂交后代T917-15和T917-26的鉴定分析 | 第65-69页 |
3.1.1 细胞学鉴定 | 第65-66页 |
3.1.2 A-PAGE鉴定 | 第66-68页 |
3.1.3 分子标记鉴定 | 第68-69页 |
3.2 MY11和矮杆黑麦杂交后代中1RS.1BL易位系的鉴定分析 | 第69-76页 |
3.2.1 1RS.1BL易位系T1245-5 | 第69-72页 |
3.2.1.1 细胞学鉴定 | 第69-71页 |
3.2.1.2 A-PAGE鉴定 | 第71页 |
3.2.1.3 分子标记鉴定 | 第71-72页 |
3.2.2 新易位系RT1163-4、RT1217-1、RT1249和新代换系RS1200-3的鉴定分析 | 第72-76页 |
3.2.2.1 ND-FISH细胞学鉴定 | 第72-74页 |
3.2.2.2 A-PAGE鉴定 | 第74页 |
3.2.2.3 分子标记鉴定 | 第74-76页 |
3.3 MY11和白粒黑麦杂交后代中1RS.1BL易位系T857-7、T852-29的鉴定分析 | 第76-79页 |
3.3.1 细胞学分析 | 第76-77页 |
3.3.2 A-PAGE鉴定分析 | 第77-78页 |
3.3.3 分子标记鉴定 | 第78-79页 |
3.4 1RS随体缺失的1RS.1BL易位系T1245-6和T757-8的鉴定分析 | 第79-86页 |
3.4.1 细胞学分析 | 第80-81页 |
3.4.2 A-PAGE鉴定分析 | 第81-82页 |
3.4.3 分子标记鉴定 | 第82-86页 |
3.4.3.1 1BS分子标记鉴定 | 第82-83页 |
3.4.3.2 多个ω-黑麦碱引物鉴定 | 第83页 |
3.4.3.3 1RS上特殊分子标记鉴定 | 第83-85页 |
3.4.3.4 1RS上TSM分子标记鉴定 | 第85-86页 |
3.5 6BS随体缺失的1RS.1BL易位系T852-31的鉴定分析 | 第86-88页 |
3.5.1 细胞学分析 | 第86-87页 |
3.5.2 A-PAGE鉴定分析 | 第87-88页 |
3.6 MY11和白粒黑麦杂交后代中特殊小麦15-262和15-263的鉴定分析 | 第88-93页 |
3.6.1 细胞学分析 | 第88-89页 |
3.6.2 A-PAGE鉴定分析 | 第89-90页 |
3.6.3 分子标记鉴定 | 第90-93页 |
3.6.3.1 GliB1和GluB3鉴定 | 第91-92页 |
3.6.3.2 1BS上SSR引物的鉴定 | 第92-93页 |
3.7 A42912和威宁黑麦R3杂交后代T917-26和T917-15的1RS染色体臂遗传多样性及品质特性分析 | 第93-98页 |
3.7.1 1RS上TSM引物的遗传多样性鉴定 | 第93-94页 |
3.7.2 ω-黑麦碱编码基因Sec-1的序列比对 | 第94-95页 |
3.7.3 A42912、T917-15和T917-26穗发芽抗性的鉴定 | 第95页 |
3.7.4 A42912、T917-15和T917-26淀粉酶活性的测定 | 第95-96页 |
3.7.5 A42912、T917-15和T917-26的谷蛋白鉴定 | 第96-97页 |
3.7.6 A42912、T917-15和T917-26加工品质的测定 | 第97-98页 |
3.8 MY11和矮杆黑麦杂交后代RT1163-4、RT1217-1、RT1249和RS1200-3的遗传多样性及抗病性、农艺性状和部分品质特性分析 | 第98-101页 |
3.8.1 RT1163-4、RT1217-1、RT1249和RS1200-3的1RS染色体臂遗传多样性鉴定 | 第98页 |
3.8.2 RT1163-4、RT1217-1、RT1249和RS1200-3的农艺性状 | 第98-99页 |
3.8.3 RT1163-4、RT1217-1、RT1249和RS1200-3抗病性的鉴定 | 第99-100页 |
3.8.4 RT1163-4、RT1217-1、RT1249和RS1200-3穗发芽抗性鉴定 | 第100-101页 |
3.9 MY11和矮杆黑麦杂交后代T1245-5和T1245-6的品质相关特性分析 | 第101-104页 |
3.9.1 MY11、T1245-5和T1245-6的谷蛋白鉴定 | 第101-102页 |
3.9.2 MY11、T1245-5和T1245-6的抗穗发芽鉴定 | 第102-103页 |
3.9.3 MY11、T1245-5和T1245-5淀粉酶活性的测定 | 第103-104页 |
3.10 MY11和白粒黑麦杂交后代T857-7和T857-8的品质相关特性分析 | 第104-106页 |
3.10.1 MY11、T857-7和T857-8的谷蛋白鉴定 | 第104-105页 |
3.10.2 MY11、T857-7和T857-8的抗穗发芽鉴定 | 第105页 |
3.10.3 MY11、T857-7和T857-8淀粉酶活性的测定 | 第105-106页 |
3.11 MY11和白粒黑麦杂交后代T852-29和T852-31的品质相关特性分析 | 第106-108页 |
3.11.1 MY11、T852-29和T852-31的谷蛋白鉴定 | 第106-107页 |
3.11.2 MY11、T852-29和T852-31的抗穗发芽鉴定 | 第107页 |
3.11.3 MY11、T852-29和T852-31淀粉酶活性的测定 | 第107-108页 |
3.12 MY11和白粒黑麦杂交后代15-262和15-263的品质相关特性分析 | 第108-111页 |
3.12.1 MY11、15-262和15-263的谷蛋白鉴定 | 第108-109页 |
3.12.2 MY11、15-262和15-263的抗穗发芽鉴定 | 第109页 |
3.12.3 MY11、15-262和15-263淀粉酶活性的测定 | 第109-111页 |
4. 讨论 | 第111-124页 |
4.1 遗传多样性的小麦-黑麦1RS.1BL初级易位系的选育和鉴定技术的改良 | 第111-113页 |
4.2 遗传多样性的1RS.1BL易位染色体在小麦加工品质上的效应 | 第113-114页 |
4.3 遗传多样性的1RS.1BL易位染色体在农艺性状和抗病性上的效应 | 第114-116页 |
4.4 遗传多样性的1RS.1BL易位染色体在穗发芽抗性上的效应 | 第116页 |
4.5 小麦遗传背景中的黑麦染色体臂1RS的遗传多样性的育种和进化意义 | 第116-117页 |
4.6 小麦-黑麦特殊易位系的选育、鉴定和在精细物理学作图中的意义 | 第117-120页 |
4.6.1 ω-黑麦碱表达缺失的1RS.1BL易位系T917-26 | 第117-118页 |
4.6.2 1RS随体缺失的易位系T1245-6和T857-8 | 第118-119页 |
4.6.3 6BS随体缺失的1RS.1BL易位系T852-31 | 第119页 |
4.6.4 1BS随体缺失的小麦15-262和1BS缺失的小麦15-263 | 第119-120页 |
4.7 小麦和黑麦染色体随体是基因富集区 | 第120-121页 |
4.8 多样化外源基因引入小麦基因组中及其进化意义 | 第121页 |
4.9 染色体易位诱导的伴生突变及其表达的育种学和进化意义 | 第121-123页 |
4.10 小麦-黑麦的易位作为植物种属间遗传相互关系研究的模式体系 | 第123-124页 |
5. 研究展望 | 第124-125页 |
参考文献 | 第125-140页 |
博士期间发表的论文 | 第140-141页 |
致谢 | 第141页 |