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过量表达DXPS和DXR基因对烟草类萜代谢的影响研究

详细摘要第2-8页
摘要第8-9页
缩写符号对照表第9-10页
第一章 前言第10-18页
    1.1 烟草腺毛研究进展第10-13页
        1.1.1 烟草腺毛类型、结构第10-12页
        1.1.2 烟草腺毛分泌物第12-13页
    1.2 烟草类萜代谢的研究进展第13-16页
        1.2.1 类萜的生物合成途径第14-15页
        1.2.2 类萜代谢中的DXPS基因和DXR基因第15-16页
    1.3 研究的目的及意义第16-17页
    1.4 研究的主要内容第17页
    1.5 拟解决的关键问题第17-18页
第二章 不同品种烤烟腺毛及其分泌物的分析第18-37页
    2.1 材料与方法第18-20页
        2.1.1 试验材料第18页
        2.1.2 研究采取的技术路线第18-19页
        2.1.3 试验方法第19-20页
            2.1.3.1 烟草腺毛形态密度的观察第19页
            2.1.3.2 石油醚提取物含量的测定第19页
            2.1.3.3 测定烤烟叶面提取物第19-20页
    2.2 结果与分析第20-35页
        2.2.1 烟草腺毛形态观察和腺毛密度的测定第20-27页
            2.2.1.1 烟草腺毛形态的观察第20-22页
            2.2.1.2 腺毛密度的测定第22-27页
        2.2.2 不同品种烤烟石油醚提取物含量分析第27-30页
        2.2.3 烤烟叶面提取物成分分析第30-35页
            2.2.3.1 烤烟南江3号叶面提取物成分分析第30-31页
            2.2.3.2 烤烟红花大金元叶面提取物成分分析第31-32页
            2.2.3.3 烤烟K326叶面提取物成分分析第32页
            2.2.3.4 烤烟云烟87叶面提取物成分分析第32-34页
            2.2.3.5 烤烟云烟97叶面提取物成分分析第34-35页
            2.2.3.6 五个烤烟品种叶面提取物成分分析第35页
    2.3 小结与讨论第35-37页
第三章 过量表达DXPS和DXR基因对烟草类萜代谢的影响第37-51页
    3.1 试验材料第37-38页
        3.1.1 试验材料第37页
        3.1.2 菌株与载体第37页
        3.1.3 主要试剂第37页
        3.1.4 主要缓冲液配方第37-38页
    3.2 研究采取的技术路线第38-39页
    3.3 试验方法第39-44页
        3.3.1 DXPS和DXR基因的化学合成设计第39页
        3.3.2 pSH737-DXPS-DXR载体构建第39页
        3.3.3 质粒DNA的提取第39页
        3.3.4 感受态细胞制备及转化第39-40页
            3.3.4.1 大肠杆菌感受态细胞制备与转化第39-40页
            3.3.4.2 根癌农杆菌菌株LBA4404感受态的制备及DNA转化第40页
        3.3.5 烟草遗传转化第40页
        3.3.6 转基因烟草植株检测第40-42页
            3.3.6.1 转基因烟草植株的PCR检测第40-41页
            3.3.6.2 转基因植株GUS组织化学检测第41页
            3.3.6.3 转基因植株的Southern blot检测第41-42页
        3.3.7 转基因植株的总RNA提取及目的基因的RT-PCR分析第42-43页
            3.3.7.1 总RNA提取第42-43页
            3.3.7.2 c DNA合成第43页
            3.3.7.3 RT-PCR检测目的基因表达第43页
        3.3.8 GC-MS测定转基因烟草叶面提取物第43-44页
    3.4 结果与分析第44-50页
        3.4.1 DXPS –NOS和 35S-DXR基因的设计与合成第44页
        3.4.2 pSH737-DXPS-DXR载体的构建第44-47页
        3.4.3 转基因植物的的获得第47-48页
        3.4.5 转基因植株的PCR检测第48页
        3.4.6 转基因植株的Southern blot检测第48-49页
        3.4.7 转基因植株的RT-PCR检测第49页
        3.4.8 转基因株系叶面提取物主要组成成分分析第49-50页
    3.5 小结与讨论第50-51页
第四章 结论与展望第51-52页
    4.1 小结第51页
    4.2 存在的问题第51页
    4.3 展望第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-56页
附录第56-58页
    公开发表论文情况第57-58页

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