| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 前言 | 第12-29页 |
| 1.1 木质素生物质转化研究 | 第12-18页 |
| 1.1.1 植物细胞壁的组成 | 第13页 |
| 1.1.2 木质纤维素的主要成分 | 第13-16页 |
| 1.1.3 木质纤维素生物冶炼的前处理 | 第16-17页 |
| 1.1.4 木质素生物质生物冶炼的酶解催化 | 第17页 |
| 1.1.5 嗜热微生物及高温纤维素酶在生物炼制过程中的应用 | 第17-18页 |
| 1.2 木质素生物质降解酶系 | 第18-23页 |
| 1.2.1 产纤维素酶系微生物的多样性 | 第19页 |
| 1.2.2 纤维素酶的组成 | 第19-20页 |
| 1.2.3 纤维素酶的水解机制 | 第20-22页 |
| 1.2.4 纤维素酶的协同降解机制 | 第22-23页 |
| 1.3 纤维素酶结构与生物信息学相关研究进展 | 第23-27页 |
| 1.3.1 纤维素酶序列与功能多样性 | 第24-25页 |
| 1.3.2 纤维素酶三级结构 | 第25-26页 |
| 1.3.3 纤维素酶结构与功能的关系 | 第26-27页 |
| 1.3.4 纤维素酶蛋白的结晶与结构解析 | 第27页 |
| 1.4 论文立题依据 | 第27-29页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第29-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 实验菌种、质粒及试剂 | 第29页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.2 生物信息学及结构生物相关软件及网站 | 第30-31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-36页 |
| 2.3.1 全质粒 PCR 构建 CbCel9A 突变体 | 第31页 |
| 2.3.2 野生型 CbCel9A 及突变体的培养、表达及纯化 | 第31-32页 |
| 2.3.33 , 5-二硝基水杨酸比色法（DNS 法）测定纤维素酶活力 | 第32页 |
| 2.3.4 热稳定性测定及 DSC 扫描实验 | 第32-33页 |
| 2.3.5 蛋白质结晶条件筛选与优化 | 第33页 |
| 2.3.6 晶体 X-ray 衍射与数据收集 | 第33-34页 |
| 2.3.7 分子置换法解析晶体结构及晶体结构精修 | 第34页 |
| 2.3.8 GH9 家族序列和蛋白结构的收集及处理 | 第34页 |
| 2.3.9 GH9 家族糖苷水解酶蛋白序列分析 | 第34-35页 |
| 2.3.10 GH9 家族糖苷水水解酶“活性中心架构”潜在序列谱构建 | 第35页 |
| 2.3.11 全家族序列背景下“活性中心架构”氨基酸频率统计 | 第35-36页 |
| 第3章 突变体功能测定与 N8 结构解析 | 第36-64页 |
| 3.1 实验结果与讨论 | 第36-62页 |
| 3.1.1 野生型 CbCel9A 蛋白质序列信息分析及突变体设计 | 第36-37页 |
| 3.1.2 高温纤维素酶 CbCel9A 与突变体的分子克隆、表达、纯化 | 第37-39页 |
| 3.1.3 野生型 CbCel9A 与系列突变体酶学性质对比分析 | 第39-40页 |
| 3.1.4 野生型 CbCel9A 与突变体 N8 的催化动力学与热稳定性 | 第40-42页 |
| 3.1.5 CbCel9A 及突变体 N8 的结晶 | 第42页 |
| 3.1.6 突变体 N8 晶体衍射数据的收集与处理 | 第42-44页 |
| 3.1.7 突变体 N8 结构模型的解析及质量评估 | 第44-45页 |
| 3.1.8 突变体 N8 整体结构描述 | 第45-48页 |
| 3.1.9 突变体 N8 催化结构域（CD）结构特征 | 第48-52页 |
| 3.1.10 突变体 N8 糖类结合模块（CBM）结构概述 | 第52-53页 |
| 3.1.11 突变体 N8 同源结构分析 | 第53-57页 |
| 3.1.12 突变体 N8 结构稳定性因素分析 | 第57-59页 |
| 3.1.13 变体 N8 稳定性机制 | 第59-62页 |
| 3.2 本章小结 | 第62-64页 |
| 第4章 糖苷水解酶 GH9 家族活性中心架构构建 | 第64-72页 |
| 4.1 实验结果与讨论 | 第64-71页 |
| 4.1.1 GH9 家族糖苷水解酶系统发育树 | 第64-65页 |
| 4.1.2 GH9 家族糖苷水解酶催化结构域结构表面电势分析 | 第65-66页 |
| 4.1.3 GH9 家族糖苷水解酶活性中心架构潜在位点 | 第66-67页 |
| 4.1.4 活性中心架构潜在位点序列谱的生成 | 第67-71页 |
| 4.2 本章小结 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
| 硕士期间待发表文章 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
