中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第11-19页 |
参考文献 | 第13-19页 |
第一部分 AD.RGD-AFP-E1A-IL24 双基因共表达重组腺病毒载体的构建及鉴定 | 第19-34页 |
1 材料与方法 | 第20-24页 |
1.1 材料 | 第20页 |
1.2 仪器 | 第20-21页 |
1.3 方法 | 第21-24页 |
2 实验结果 | 第24-32页 |
2.1 构建转移载体的鉴定 | 第24-29页 |
2.2 同源重组腺病毒质粒的构建和鉴定结果 | 第29-30页 |
2.3 重组腺病毒的包装和扩增 | 第30-31页 |
2.4 重组腺病毒的RT-PCR鉴定 | 第31-32页 |
3 讨论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-34页 |
第二部分 RGD修饰的重组腺病毒与无RGD修饰的重组腺病毒的比较 | 第34-46页 |
1 材料和方法 | 第34-37页 |
1.1 材料 | 第34-35页 |
1.2 仪器 | 第35页 |
1.3 方法 | 第35-37页 |
2 实验结果 | 第37-42页 |
2.1 高效价重组腺病毒的获得 | 第37页 |
2.2 带有RGD修饰的腺病毒载体较普通腺病毒有更高的感染效率 | 第37-39页 |
2.3 不同感染复数(MOI)的腺病毒对细胞生长影响的MTT鉴定 | 第39-41页 |
2.4 各重组腺病毒诱导细胞凋亡的流式细胞仪检测结果 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
第三部分 AD.RGD-AFP-E1A-IL-24 对肝癌细胞的靶向性研究 | 第46-57页 |
1 材料和方法 | 第47-49页 |
1.1 材料 | 第47页 |
1.2 仪器 | 第47页 |
1.3 方法 | 第47-49页 |
2 实验结果 | 第49-54页 |
2.1 AFP在各细胞系中的表达水平 | 第49-50页 |
2.2 以AFP为启动子的重组腺病毒具选择性复制的能力 | 第50-51页 |
2.3 以AFP为启动子的重组腺病毒选择性生长抑制作用的MTT鉴定 | 第51-53页 |
2.4 以AFP为启动子的重组腺病毒选择性诱导细胞凋亡的检测结果 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
第四部分 单双基因重组腺病毒对肝癌细胞生长抑制效应的体外实验研究 | 第57-68页 |
1 材料和方法 | 第57-60页 |
1.1 材料 | 第57-58页 |
1.2 仪器 | 第58页 |
1.3 方法 | 第58-60页 |
2 实验结果 | 第60-66页 |
2.1 PCR鉴定E1A和/或IL-24 基因在HepG2 细胞中的转录 | 第60-61页 |
2.2 Western blot鉴定E1A和/或IL-24 基因在HepG2 细胞中的表达 | 第61-62页 |
2.3 生长抑制作用的MTT鉴定 | 第62-63页 |
2.4 各重组腺病毒诱导细胞凋亡的流式细胞仪检测结果 | 第63-64页 |
2.5 Bax、Bcl-2、p53、p21 和Survivin等表达因子的RT-PCR测定 | 第64-65页 |
2.6 Cleaved Caspase-3 蛋白的Western-Bolt测定 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-68页 |
综述:整合素蛋白受体和RGD在肿瘤的基因治疗中的应用 | 第68-76页 |
1 背景 | 第68页 |
2 整合素蛋白 | 第68-69页 |
3 整合素蛋白与病理学 | 第69页 |
4 肿瘤的靶向治疗 | 第69-70页 |
5 靶向整合素用于肿瘤治疗 | 第70页 |
6 腺病毒用于靶向治疗 | 第70-71页 |
7 增加腺病毒转染肿瘤细胞的策略 | 第71页 |
8 溶瘤腺病毒的临床应用 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-76页 |
发表和待发表的论文 | 第76-77页 |
缩略词表 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-80页 |