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RGD修饰、AFP启动子介导的E1A和IL-24双基因腺病毒载体用于肝癌基因治疗的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
引言第11-19页
    参考文献第13-19页
第一部分 AD.RGD-AFP-E1A-IL24 双基因共表达重组腺病毒载体的构建及鉴定第19-34页
    1 材料与方法第20-24页
        1.1 材料第20页
        1.2 仪器第20-21页
        1.3 方法第21-24页
    2 实验结果第24-32页
        2.1 构建转移载体的鉴定第24-29页
        2.2 同源重组腺病毒质粒的构建和鉴定结果第29-30页
        2.3 重组腺病毒的包装和扩增第30-31页
        2.4 重组腺病毒的RT-PCR鉴定第31-32页
    3 讨论第32-33页
    参考文献第33-34页
第二部分 RGD修饰的重组腺病毒与无RGD修饰的重组腺病毒的比较第34-46页
    1 材料和方法第34-37页
        1.1 材料第34-35页
        1.2 仪器第35页
        1.3 方法第35-37页
    2 实验结果第37-42页
        2.1 高效价重组腺病毒的获得第37页
        2.2 带有RGD修饰的腺病毒载体较普通腺病毒有更高的感染效率第37-39页
        2.3 不同感染复数(MOI)的腺病毒对细胞生长影响的MTT鉴定第39-41页
        2.4 各重组腺病毒诱导细胞凋亡的流式细胞仪检测结果第41-42页
    3 讨论第42-43页
    参考文献第43-46页
第三部分 AD.RGD-AFP-E1A-IL-24 对肝癌细胞的靶向性研究第46-57页
    1 材料和方法第47-49页
        1.1 材料第47页
        1.2 仪器第47页
        1.3 方法第47-49页
    2 实验结果第49-54页
        2.1 AFP在各细胞系中的表达水平第49-50页
        2.2 以AFP为启动子的重组腺病毒具选择性复制的能力第50-51页
        2.3 以AFP为启动子的重组腺病毒选择性生长抑制作用的MTT鉴定第51-53页
        2.4 以AFP为启动子的重组腺病毒选择性诱导细胞凋亡的检测结果第53-54页
    3 讨论第54-55页
    参考文献第55-57页
第四部分 单双基因重组腺病毒对肝癌细胞生长抑制效应的体外实验研究第57-68页
    1 材料和方法第57-60页
        1.1 材料第57-58页
        1.2 仪器第58页
        1.3 方法第58-60页
    2 实验结果第60-66页
        2.1 PCR鉴定E1A和/或IL-24 基因在HepG2 细胞中的转录第60-61页
        2.2 Western blot鉴定E1A和/或IL-24 基因在HepG2 细胞中的表达第61-62页
        2.3 生长抑制作用的MTT鉴定第62-63页
        2.4 各重组腺病毒诱导细胞凋亡的流式细胞仪检测结果第63-64页
        2.5 Bax、Bcl-2、p53、p21 和Survivin等表达因子的RT-PCR测定第64-65页
        2.6 Cleaved Caspase-3 蛋白的Western-Bolt测定第65-66页
    3 讨论第66-67页
    参考文献第67-68页
综述:整合素蛋白受体和RGD在肿瘤的基因治疗中的应用第68-76页
    1 背景第68页
    2 整合素蛋白第68-69页
    3 整合素蛋白与病理学第69页
    4 肿瘤的靶向治疗第69-70页
    5 靶向整合素用于肿瘤治疗第70页
    6 腺病毒用于靶向治疗第70-71页
    7 增加腺病毒转染肿瘤细胞的策略第71页
    8 溶瘤腺病毒的临床应用第71-72页
    参考文献第72-76页
发表和待发表的论文第76-77页
缩略词表第77-78页
致谢第78-80页

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