摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第7-20页 |
1. 小鼠突变品系的快速积累 | 第7-8页 |
2. 细胞有丝分裂中的同源重组现象 | 第8-11页 |
·有丝分裂同源重组的重要生物学意义 | 第8-9页 |
·有丝分裂重组中的杂合性缺失现象 | 第9-10页 |
·有丝分裂同源重组模型建立的生物学依据 | 第10-11页 |
3. 模式生物研究中各种有丝分裂重组模型的应用 | 第11-16页 |
·果蝇中遗传镶嵌体模型的建立和应用 | 第11-12页 |
·小鼠中有丝分裂同源重组模型的建立和应用 | 第12-16页 |
4. 有丝分裂中的反向姐妹染色单体重组现象 | 第16-17页 |
5. 淋巴系统是进行有丝分裂重组分析的优秀模型 | 第17-18页 |
6. 选题的目的和意义 | 第18-20页 |
第二章 小鼠免疫系统中单倍体细胞的建立与分析 | 第20-40页 |
1. 背景介绍 | 第20-21页 |
2. 材料和方法 | 第21-27页 |
·通过染色体删除诱导杂合性缺失的生物学模型 | 第21-22页 |
·iloxP序列设计 | 第22页 |
·3T3染色体删除细胞系的建立 | 第22-23页 |
·条件型染色体删除转基因小鼠的建立 | 第23-24页 |
·利用反向PCR进行转座子插入定位 | 第24页 |
·3T3细胞和小鼠淋巴细胞流式细胞仪分析 | 第24-25页 |
·骨髓B淋巴细胞体外刺激培养 | 第25页 |
·AnnexinV早期细胞凋亡分析 | 第25页 |
·CFSE细胞有丝分裂分析 | 第25页 |
·淋巴细胞染色体组型分析 | 第25-26页 |
·细胞转染和反转录病毒感染 | 第26页 |
·流式细胞仪信号通道名称和解释 | 第26-27页 |
·PCR引物和抗体 | 第27页 |
3. 结果 | 第27-38页 |
·3T3细胞中的反向姐妹染色单体重组和结果分析 | 第27-29页 |
·条件型染色体删除转基因小鼠的基因组定位结果 | 第29-30页 |
·反向姐妹染色单体重组导致淋巴细胞特异性的染色体标记变化 | 第30-33页 |
·反向姐妹染色单体重组在小鼠基因组内能被普遍诱导 | 第33-34页 |
·染色体组型分析显示染色体断裂和部分单倍体细胞的产生 | 第34-36页 |
·部分单倍体淋巴细胞具有正常的分裂能力和存活能力 | 第36-38页 |
4. 讨论和小结 | 第38-40页 |
第三章 运用部分单倍体淋巴细胞研究E2A和HEB在淋巴细胞发育过程中的功能 | 第40-54页 |
1. 背景介绍 | 第40-41页 |
2. 材料和方法 | 第41-42页 |
·E2A和HEB条件型基因剔除小鼠的建立和杂合性缺失分析 | 第41-42页 |
·小鼠淋巴细胞流式细胞仪分析和平均荧光强度检测 | 第42页 |
·细胞计数和统计 | 第42页 |
·PCR引物和抗体 | 第42页 |
3. 结果 | 第42-51页 |
·淋巴细胞发育的各个阶段都可以检测到部分单倍体细胞 | 第42-44页 |
·染色体断裂和部分缺失导致发育各个阶段的淋巴细胞数目减少 | 第44-45页 |
·E2A在B细胞发育早期的组织特异性缺失导致B细胞发育中断 | 第45-46页 |
·E2A在B细胞发育早期的杂合性缺失导致祖B细胞和前B细胞明显减少 | 第46-50页 |
·HEB在胸腺T细胞的杂合性缺失导致双阴性T细胞增加和双阳性T细胞减少 | 第50-51页 |
4. 讨论和小结 | 第51-54页 |
第四章 小鼠1号染色体有丝分裂同源重组模型的建立与分析 | 第54-62页 |
1. 背景介绍 | 第54-55页 |
2. 材料和方法 | 第55-57页 |
·小鼠1号染色体同源重组模型的建立 | 第55-56页 |
·HOR1小鼠(lovp,cd45.1/loxp,cd45.2)的培育和重组模型的建立 | 第56-57页 |
·PCR引物和抗体 | 第57页 |
3. 结果 | 第57-60页 |
·在HOR1小鼠T淋巴细胞内成功检测到有丝分裂重组现象 | 第57-58页 |
·HOR1小鼠T淋巴细胞有丝分裂重组效率统计 | 第58-60页 |
4. 讨论和小结 | 第60-62页 |
第五章 运用1号染色体同源重组模型研究DHX9在小鼠T细胞发育中的功能 | 第62-77页 |
1. 背景介绍 | 第62-63页 |
2. 材料和方法 | 第63-66页 |
·DHX9插入突变小鼠的建立 | 第63-64页 |
·DHX9组织特性细胞同源重组模型的建立和小鼠培育 | 第64-65页 |
·AnnexinV早期细胞凋亡分析 | 第65页 |
·小鼠外周T淋巴细胞体外培养和刺激 | 第65页 |
·RT-PCR | 第65-66页 |
·PCR引物和抗体 | 第66页 |
3. 结果 | 第66-75页 |
·DHX9纯合突变小鼠胚胎致死 | 第66页 |
·DHX9杂合突变小鼠的T淋巴细胞发育基本正常 | 第66-69页 |
·小鼠胸腺中DHX9纯合突变T细胞的相对比例降低 | 第69-70页 |
·小鼠外周DHX9纯合突变细胞易产生凋亡 | 第70-75页 |
4. 讨论和小结 | 第75-77页 |
总结和展望 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
发表论文 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-86页 |