| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 符号说明 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 第一章 二甲双胍破坏SMAD3/TRIB3信号轴抑制黑色素瘤的发生发展 | 第18-43页 |
| 1.1 实验材料 | 第18-26页 |
| 1.1.1 质粒载体 | 第18页 |
| 1.1.2 细胞系及原代培养 | 第18-19页 |
| 1.1.3 实验试剂 | 第19-25页 |
| 1.1.4 仪器 | 第25-26页 |
| 1.2 实验方法 | 第26-30页 |
| 1.2.1 细胞传代和培养 | 第26页 |
| 1.2.2 细胞转染 | 第26-27页 |
| 1.2.3 细胞增殖(EdU) | 第27页 |
| 1.2.4 细胞侵袭 | 第27页 |
| 1.2.5 siRNA序列 | 第27-28页 |
| 1.2.6 萤光素酶报告基因测定 | 第28页 |
| 1.2.7 免疫共沉淀 | 第28-29页 |
| 1.2.8 免疫荧光 | 第29页 |
| 1.2.9 人类黑色素瘤组织芯片 | 第29页 |
| 1.2.10 小鼠肿瘤生长和转移模型 | 第29-30页 |
| 1.2.11 统计分析 | 第30页 |
| 1.3 实验结果 | 第30-41页 |
| 1.3.1 二甲双胍通过降低TRIB3的蛋白表达抑制黑色素瘤发生发展 | 第30-32页 |
| 1.3.2 过表达TRIB3反转二甲双胍抑制黑色素瘤的作用 | 第32-35页 |
| 1.3.3 二甲双胍通过抑制SMAD3的转录活性抑制TRIB3的表达 | 第35-39页 |
| 1.3.4 二甲双胍通过抑制SMAD3/TRIB3轴抑制黑色素瘤生长和转移 | 第39-41页 |
| 1.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第二章 二甲双胍抑制KAT5/TRIB3/SMAD3正反馈调节环 | 第43-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第43页 |
| 2.1.1 质粒载体 | 第43页 |
| 2.1.2 免疫共沉淀所用试剂 | 第43页 |
| 2.2 实验方法 | 第43-44页 |
| 2.2.1 免疫共沉淀 | 第43-44页 |
| 2.2.2 表面等离子体共振分析 | 第44页 |
| 2.2.3 免疫组化 | 第44页 |
| 2.3 实验结果 | 第44-53页 |
| 2.3.1 二甲双胍对SMAD3磷酸化和乙酰化的作用 | 第44-48页 |
| 2.3.2 KAT5介导SMAD3的乙酰化 | 第48-50页 |
| 2.3.3 二甲双胍破坏KAT5/TRIB3/SMAD3的正反馈调节环 | 第50-53页 |
| 2.4 讨论 | 第53-55页 |
| 第三章 二甲双胍抑制KAT5介导的SMAD3的K333乙酰化 | 第55-63页 |
| 3.1 实验材料 | 第55页 |
| 3.1.1 质粒载体 | 第55页 |
| 3.2 实验方法见第一章和第二章 | 第55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-61页 |
| 3.3.1 KAT5介导SMAD3 K333位乙酰化维持了SMAD3的转录活性 | 第55-58页 |
| 3.3.2 二甲双胍通过抑制SMAD3 K333位乙酰化抑制黑色素瘤发生发展 | 第58-60页 |
| 3.3.3 二甲双胍抑制黑色素瘤发生发展的机制总结 | 第60-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第71-72页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第72页 |
