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利用酵母双杂交技术筛选与马铃薯StNAC262互作的功能基因

缩略词表第5-6页
摘要第6-7页
Summary第7-8页
第一章 文献综述第9-22页
    1.1 马铃薯根系与干旱第9-11页
        1.1.1 马铃薯根系的研究意义第9-10页
        1.1.2 干旱对马铃薯根系生长的影响第10-11页
    1.2 NAC转录因子第11-17页
        1.2.1 NAC基因的研究概述第11-12页
        1.2.2 NAC的分类第12-13页
        1.2.3 NAC的功能研究第13-15页
            1.2.3.1 植物次生生长第13页
            1.2.3.2 器官边界形成和顶端分生组织形成第13-14页
            1.2.3.3 植株衰老第14页
            1.2.3.4 激素调控和信号转导第14页
            1.2.3.5 矿质元素营养和营养物质的转运第14页
            1.2.3.6 参与生物胁迫中植物的防御响应第14-15页
        1.2.4 NAC的功能研究进展第15-17页
    1.3 植物蛋白质的亚细胞定位研究概况第17-19页
        1.3.1 植物蛋白质的亚细胞定位研究意义第17-18页
        1.3.2 蛋白质亚细胞定位的方法第18-19页
    1.4 蛋白互作研究的概况第19-20页
        1.4.1 蛋白互作的研究意义第19-20页
        1.4.2 蛋白互作的原理第20页
    1.5 本研究目的和意义第20-22页
第二章 StNAC262基因的生物信息学分析及亚细胞定位第22-35页
    2.1 材料第22页
        2.1.1 菌株及载体第22页
        2.1.2 主要试剂及培养基第22页
        2.1.3 主要仪器设备第22页
    2.2 试验方法第22-29页
        2.2.1 烟草的培养第22-23页
        2.2.2 StNAC262基因的生物信息学分析第23页
        2.2.3 StNAC262基因亚细胞定位载体的构建第23-27页
        2.2.4 植物表达载体pEGFP-NAC262转化农杆菌第27-28页
        2.2.5 菌落PCR鉴定第28页
        2.2.6 农杆菌烟草的遗传转化第28页
        2.2.7 亚细胞定位的荧光观察第28-29页
    2.3 结果与分析第29-33页
        2.3.1 StNAC的生物信息学分析第29-31页
            2.3.1.1 马铃薯StNAC262基因进化分析第29-30页
            2.3.1.2 马铃薯StNAC262蛋白质特性及亲水性的预测第30页
            2.3.1.3 马铃薯StNAC262蛋白质二级结构和三级结构的预测第30-31页
        2.3.2 StNAC262基因的PCR扩增第31页
        2.3.3 植物表达载体pEGFP-NAC262的双酶切鉴定第31-32页
        2.3.4 植物瞬时表达载体亚细胞定位荧光观察第32-33页
    2.4 小结与讨论第33-35页
第三章 诱饵载体pGBKT7-NAC的构建及毒性和自激活检测第35-44页
    3.1 材料第35-36页
        3.1.1 菌株和质粒载体第35页
        3.1.2 常用试剂及试剂盒第35页
        3.1.3 常用试剂及培养基的配制第35页
        3.1.4 主要仪器设备第35-36页
    3.2 方法第36-40页
        3.2.1 诱饵载体pGBKT7-NAC的构建第36-38页
        3.2.2 诱饵载体pGBKT7-NAC的毒性和自激活验证第38-40页
    3.3 结果与分析第40-42页
        3.3.1 StNAC262基因的扩增第40页
        3.3.2 诱饵载体pGBKT7-NAC重组质粒的双酶切鉴定第40-41页
        3.3.3 诱饵载体pGBKT7-NAC的毒性和自激活验证第41-42页
    3.4 小结与讨论第42-44页
第四章 酵母双杂交筛选与pGBKT7-NAC互作的基因第44-51页
    4.1 材料第44-45页
        4.1.1 菌株和质粒载体第44页
        4.1.2 主要试剂及药品第44页
        4.1.3 引物设计第44-45页
    4.2 方法第45-46页
        4.2.1 共转化法筛选pGBKT7-NAC互作的基因第45页
        4.2.2 阳性克隆的鉴定第45-46页
    4.3 结果及分析第46-50页
        4.3.1 诱饵载体与文库质粒共转化结果第46-48页
        4.3.2 阳性克隆质粒的PCR检测结果第48页
        4.3.3 阳性克隆质粒的测序及序列比对结果第48-50页
    4.4 小结与讨论第50-51页
第五章 结论与展望第51-52页
参考文献第52-60页
附录 常用试剂及培养基的配制第60-62页
致谢第62-63页
作者介绍第63-64页
导师简介第64-65页

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