中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
前言 | 第12-25页 |
1.1 水稻细菌性条斑病的研究 | 第12-14页 |
1.1.1 水稻细菌性条斑病发病区域 | 第12页 |
1.1.2 水稻细菌性条斑病菌的形态特征 | 第12-13页 |
1.1.3 水稻细菌性条斑病的发病特征 | 第13页 |
1.1.4 水稻细菌性条斑病抗病基因的研究 | 第13-14页 |
1.2 水稻白叶枯病的研究 | 第14-17页 |
1.2.1 水稻白叶枯病发病区域 | 第14页 |
1.2.2 水稻白叶枯病菌的侵染方式 | 第14-15页 |
1.2.3 水稻白叶枯病发病特征 | 第15页 |
1.2.4 水稻抗白叶枯病基因的研究 | 第15-17页 |
1.3 植物免疫系统 | 第17-20页 |
1.3.1 病原相关分子模式触发的免疫反应(PTI) | 第17-19页 |
1.3.2 R基因介导的抗病反应(ETI) | 第19-20页 |
1.4 植物bHLH家族基因研究 | 第20-23页 |
1.4.1 bHLH结构特点及分类 | 第20-21页 |
1.4.2 水稻bHLH转录因子功能 | 第21-23页 |
1.5 CRISPR/Cas9技术 | 第23-24页 |
1.6 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-33页 |
2.1 植物材料 | 第25页 |
2.2 菌株和载体 | 第25页 |
2.3 核酸操作 | 第25-28页 |
2.3.1 植物基因组DNA提取 | 第25-26页 |
2.3.2 植物总RNA提取 | 第26页 |
2.3.3 质粒提取 | 第26页 |
2.3.4 DNA片段的纯化和乙醇沉淀 | 第26-27页 |
2.3.5 DNA片段与载体酶切、连接反应和热激转化 | 第27页 |
2.3.6 PCR鉴定克隆载体和转基因植株的阳性 | 第27页 |
2.3.7 RT-PCR和qRT-PCR | 第27-28页 |
2.4 亚细胞定位 | 第28-29页 |
2.5 转录激活活性检测 | 第29页 |
2.6 水稻基因的克隆与转化 | 第29-32页 |
2.6.1 RNAi载体的构建 | 第29-30页 |
2.6.2 超量表达载体的构建 | 第30页 |
2.6.3 CRISPR/Cas9载体的构建 | 第30-31页 |
2.6.4 农杆菌介导的遗传转化 | 第31页 |
2.6.5 转基因植株的阳性鉴定 | 第31-32页 |
2.7 病原菌的接种与病情调查 | 第32-33页 |
2.7.1 水稻细菌性条斑病接种和病情分析 | 第32页 |
2.7.2 水稻条斑病菌生长数量统计 | 第32页 |
2.7.3 水稻白叶枯病菌接种和病情分析 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-47页 |
3.1 OsbHLH81基因结构分析 | 第33页 |
3.2 OsbHLH81受病原菌诱导表达分析 | 第33-34页 |
3.3 OsbHLH81的亚细胞定位 | 第34-35页 |
3.4 OsbHLH81转录激活活性检测 | 第35-36页 |
3.5 转基因植株的获得 | 第36-38页 |
3.5.1 抑制和超量表达载体构建 | 第36-37页 |
3.5.2 水稻遗传转化和阳性材料的获得 | 第37-38页 |
3.6 转基因植株的抗性鉴定 | 第38-45页 |
3.6.1 抑制OsbHLH81基因能增强水稻对细菌性条斑病的抗性 | 第38-41页 |
3.6.2 超量表达OsbHLH81基因削弱了水稻对条斑病的抗性 | 第41-43页 |
3.6.3 抗病相关基因的表达量检测 | 第43-44页 |
3.6.4 抑制OsbHLH81增强对白叶枯的抗性 | 第44-45页 |
3.7 OsbHLH81基因敲除的突变体能增强对RS105的抗性 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
4.1 OsbHLH81转录因子和抗病功能探究 | 第47-48页 |
4.2 OsbHLH81所参与的抗病信号路径的探究 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
附录Ⅰ | 第59-60页 |
附录II | 第60-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第63页 |