| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 中英文对照 | 第8-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-12页 |
| 第2章 材料与方法 | 第12-19页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第12-13页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第12-13页 |
| 2.1.2 细胞与载体 | 第13页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第13页 |
| 2.2 实验方法及操作流程 | 第13-18页 |
| 2.2.1 pcDNA3.1/pri-miR-148a 基因表达载体构建方法、步骤见参考文献 | 第13页 |
| 2.2.2 AsPC-1 细胞培养 | 第13页 |
| 2.2.3 AsPC-1 细胞的转染 | 第13-14页 |
| 2.2.4 AsPC-1 细胞的 RNA 提取 | 第14页 |
| 2.2.5 利用 RT 反应及实时荧光定量 PCR 检测 DNMT1mRNA 的变化 | 第14-16页 |
| 2.2.6 Western Blotting 检测 pri-miR-148a 对 DNMT1 的影响 | 第16-17页 |
| 2.2.7 MTT 法检测细胞的增殖活性 | 第17页 |
| 2.2.8 流式细胞仪检测细胞周期 | 第17页 |
| 2.2.9 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 2.3 资料分析和数据处理 | 第18-19页 |
| 第3章 实验结果 | 第19-25页 |
| 3.1 样本细胞总 RNA 提取及质量鉴定结果 | 第19页 |
| 3.2 实时荧光定量 PCR 检测 DNMTl 基因 mRNA 表达水平的变化 | 第19-20页 |
| 3.3 Western Blotting 检测 pri-miR-148a 对 DNMT1 蛋白的影响 | 第20-21页 |
| 3.4 MTT 法检测细胞的增殖活性 | 第21-22页 |
| 3.5 DNMT1 基因表达抑制后对细胞周期的影响 | 第22-23页 |
| 3.6 流式细胞仪检测凋亡结果分析 | 第23-25页 |
| 第4章 讨论 | 第25-31页 |
| 第5章 结论与展望 | 第31-32页 |
| 5.1 结论 | 第31页 |
| 5.2 展望 | 第31-32页 |
| 致谢 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第36-37页 |
| 综述 | 第37-42页 |
| 参考文献 | 第41-42页 |
