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牙鲆变态过程中microRNA的表达及其功能分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-16页
第一章 前言第16-37页
   ·牙鲆变态发育第16-20页
     ·牙鲆仔稚鱼发育阶段划分第16-17页
     ·牙鲆变态发育中的形态学变化第17-18页
     ·牙鲆变态发育机制的研究第18-20页
   ·microRNA 研究概述第20-36页
     ·miRNA 的生物形成和作用机制第20-22页
     ·miRNAs 的特征第22-23页
     ·miRNA 的鉴定及研究方法第23-31页
     ·miRNA 的靶基因研究第31-33页
     ·miRNA 的功能第33-36页
     ·miRNA 的研究展望第36页
   ·研究目的和意义第36-37页
第二章 牙鲆变态发育中miRNA 的鉴定第37-59页
   ·材料与方法第37-48页
     ·牙鲆仔鱼实验和样品采集第37页
     ·RNA 提取第37-38页
     ·Solexa 测序样品准备第38-41页
     ·Small RNA 的Solexa 测序及数据分析第41-43页
     ·miRNA precursors(pre-miRNAs)的PCR 扩增及测序分析第43-45页
     ·miRNA 的定量 PCR 检测第45-47页
     ·Northern blot 检测miRNA第47-48页
     ·miRNA targets 的生物信息学预测第48页
   ·结果第48-57页
     ·牙鲆变态发育中总RNA 的提取第48-49页
     ·牙鲆变态发育中小RNA 的Solexa 测序第49页
     ·牙鲆变态发育中miRNA 的鉴定第49-50页
     ·牙鲆miRNAs 前体的扩增第50-53页
     ·牙鲆miRNAs 在仔稚鱼发育过程中的表达检测第53-54页
     ·牙鲆miRNAs 的系统进化第54-56页
     ·牙鲆miRNAs 的靶位点预测第56-57页
   ·讨论第57-59页
第三章 牙鲆变态发育中miRNA 的差异表达分析第59-68页
     ·材料与方法第59-61页
     ·动物实验和RNA 提取第59页
     ·microRNA 芯片实验第59-61页
     ·荧光定量PCR 检测第61页
   ·结果第61-66页
     ·miRNA 芯片结果分析第61-63页
     ·牙鲆变态发育中miRNA 的差异表达筛选第63-66页
   ·讨论第66-68页
第四章 牙鲆变态过程中muscle-specific miRNAs 和MRFs 的表达及作用分析第68-88页
   ·材料与方法第69-71页
     ·动物实验和样品采集第69页
     ·牙鲆变态期仔鱼的形态学观察第69页
     ·RNA 提取第69页
     ·反转录及荧光定量PCR第69-71页
     ·牙鲆miR-1、miR-133a 和miR-206a 的靶基因预测第71页
   ·结果第71-84页
     ·牙鲆变态发育中的形态学变化第71-72页
     ·牙鲆变态发育中总RNA 的提取第72-73页
     ·miR-1、miR-133a 和miR-206a 在牙鲆变态过程中的表达第73-75页
     ·牙鲆变态中TH 对miR-1、miR-133a 和miR-206a 的表达调控第75-77页
     ·miR-1、miR-133a 和miR-206a 在牙鲆成鱼不同组织中的表达第77-79页
     ·MRFs 在牙鲆变态发育过程中的表达第79页
     ·牙鲆变态中TH 对MRFs 的表达调控第79-82页
     ·牙鲆miR-1、miR-133a 和miR-206a 的靶基因预测第82-84页
   ·讨论第84-88页
总结第88-90页
 主要结论第88-89页
 主要创新点第89页
 需要进一步解决的问题第89-90页
参考文献第90-100页
附录第100-109页
 附录一 牙鲆变态过程中miRNA 的鉴定及差异表达miRNA 筛选简表第100-107页
 附录二 试剂、仪器第107-108页
  1. 主要仪器设备第107页
  2. 主要试剂及工具酶第107-108页
 附录三 中英文缩略表(Abbreviations)第108-109页
致谢第109-110页
作者简介第110页

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