| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩略词表 | 第16-17页 |
| 实验一 rdHSV-1-VEGF165-BMP4骨缺损修复载体构建 | 第17-29页 |
| 前言 | 第17页 |
| 1 实验材料和方法 | 第17-25页 |
| 1.1 主要仪器 | 第17-18页 |
| 1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 1.3 细胞株 | 第19页 |
| 1.4 VEGF165、BMP4基因的克隆 | 第19-22页 |
| 1.5 VEGF165及BMP4基因病毒表达载体的构建 | 第22-24页 |
| 1.6 HSV-1-VEGF165-BMP4病毒载体滴度的测定 | 第24页 |
| 1.7 病毒载体VEGF及BMP4的Western blotting鉴定 | 第24-25页 |
| 2 实验结果 | 第25-27页 |
| 2.1 总RNA浓度 | 第25页 |
| 2.2 VEGF、BMP4基因及载体鉴定结果 | 第25-26页 |
| 2.3 复制缺陷型病毒载体VEGF、BMP4表达鉴定 | 第26页 |
| 2.4 病毒滴度 | 第26-27页 |
| 3 讨论 | 第27-28页 |
| 4 结论 | 第28-29页 |
| 实验二 HSV-1-VEGF165-BMP4 转染 MSCs 细胞及其表达的鉴定 | 第29-43页 |
| 前言 | 第29-30页 |
| 1 实验材料和方法 | 第30-35页 |
| 1.1 实验试剂 | 第30页 |
| 1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
| 1.3 实验动物 | 第31页 |
| 1.4 实验试剂配制 | 第31-32页 |
| 1.5 兔骨髓间质干细胞(MSCs)的体外分离及培养 | 第32-33页 |
| 1.6 HSV-1-VEGF165-BMP4感染MSCs细胞 | 第33页 |
| 1.7 重组病毒感染MSCs的实验分组 | 第33页 |
| 1.8 HSV-1重组病毒对MSCs细胞增殖的影响 | 第33-34页 |
| 1.9 MSCs细胞中VEGF165和MBP4的表达 | 第34-35页 |
| 1.10 统计分析方法 | 第35页 |
| 2 结果 | 第35-39页 |
| 2.1 日本大耳白兔MSCs细胞转染后的形态学观察 | 第35页 |
| 2.2 HSV-1-VEGF165-BMP4病毒感染MSCs细胞效率的观察 | 第35-36页 |
| 2.3 HSV-1-VEGF165-BMP4病毒感染对MSCs细胞增殖的影响 | 第36-37页 |
| 2.4 VEGF165及BMP4基因在MSCs细胞中的表达 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-42页 |
| 4 结论 | 第42-43页 |
| 实验三 HSV-1-VEGF165-BMP4感染MSCs细胞体外及体内成骨能力的检测 | 第43-58页 |
| 前言 | 第43页 |
| 1 实验材料和方法 | 第43-47页 |
| 1.1 主要试剂 | 第43-44页 |
| 1.2 主要仪器 | 第44页 |
| 1.3 HSV-1-VEGF165-BMP4感染MSCs后成骨能力的检测 | 第44-46页 |
| 1.4 组织工程骨的体外构建 | 第46页 |
| 1.5 BG/MSCs复合物培养Hoechst比色法检测MSCs的增殖能力 | 第46-47页 |
| 1.6 BG/MSCs复合物培养电镜扫描观察 | 第47页 |
| 1.7 碱性磷酸酶(ALP)的检测 | 第47页 |
| 1.8 骨胶原蛋白表达的检测 | 第47页 |
| 1.9 骨钙素的检测 | 第47页 |
| 1.10 统计学方法 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-53页 |
| 2.1 细胞成骨能力检测结果 | 第47-51页 |
| 2.2 BG/MSCs细胞复合物体外培养后MSCs增殖能力 | 第51-52页 |
| 2.3 MSCs细胞在支架上生长情况的电镜观察 | 第52页 |
| 2.4 MSCs细胞与BG复合物体外培养后ALP活性 | 第52-53页 |
| 2.5 MSCs细胞与BG复合物体外培养后骨胶原及骨钙素分泌情况 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 实验四 HSV-1-VEGF165-BMP4组织工程骨复合生物活性玻璃修复兔榜骨缺损的研究 | 第58-73页 |
| 前言 | 第58页 |
| 1 实验材料和方法 | 第58-62页 |
| 1.1 主要仪器及器材 | 第58-59页 |
| 1.2 主要试剂 | 第59页 |
| 1.3 动物模型的制备 | 第59-60页 |
| 1.4 实验分组 | 第60页 |
| 1.5 各组治疗后的大体观察 | 第60-61页 |
| 1.6 X线观察 | 第61页 |
| 1.7 骨密度检测 | 第61页 |
| 1.8 生物力学检测 | 第61页 |
| 1.9 组织学检测 | 第61页 |
| 1.10 统计分析 | 第61-62页 |
| 2 结果 | 第62-68页 |
| 2.1 大耳白兔术后治疗观察 | 第62页 |
| 2.2 X线观察 | 第62-64页 |
| 2.3 X射线阻射密度分析 | 第64-65页 |
| 2.4 骨密度检测 | 第65页 |
| 2.5 生物力学测试 | 第65页 |
| 2.6 组织学评分 | 第65-66页 |
| 2.7 组织形态学观察 | 第66-68页 |
| 3 讨论 | 第68-72页 |
| 4 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-88页 |
| 综述 | 第88-103页 |
| 参考文献 | 第95-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
