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RNAi筛选鉴定KAT8是肺癌存活的重要分子

提要第4-7页
中文摘要第7-10页
Abstract第10-13页
前言第17-19页
第1章 综述第19-39页
    1.1 组蛋白乙酰基转移酶(HAT)与肿瘤第19-32页
        1.1.1 组蛋白乙酰基转移酶的分类和结构第19-21页
        1.1.2 组蛋白乙酰基转移酶的功能第21-25页
        1.1.3 组蛋白乙酰基转移酶的研究方法第25页
        1.1.4 组蛋白乙酰基转移酶在肿瘤发生发展中的作用第25-32页
            1.1.4.1 赖氨酸乙酰化:染色体解聚进行基因转录第25-27页
            1.1.4.2 组蛋白乙酰基转移酶在癌症中的双重作用第27-28页
            1.1.4.3 组蛋白乙酰基转移酶作为肿瘤抑制因子第28-29页
            1.1.4.4 组蛋白乙酰基转移酶作为致癌基因第29-31页
            1.1.4.5 组蛋白乙酰基转移酶作为生物标志物第31-32页
    1.2 RNAI 筛选在肿瘤基因治疗的研究现状及进展第32-39页
        1.2.1 SIRNA 文库在肿瘤治疗方面的应用第34-35页
        1.2.2 治疗的挑战第35-36页
        1.2.3 SIRNA 治疗的进展第36-39页
第2章 材料和方法第39-73页
    2.1 实验材料第39-42页
        2.1.1 主要试剂第39页
        2.1.2 主要仪器第39-40页
        2.1.3 质粒和菌株第40页
        2.1.4 细胞株第40页
        2.1.5 主要试剂的配制第40-42页
    2.2. 实验方法第42-71页
        2.2.1 制备人乙酰基转移酶(HAT)RNAi 慢病毒文库第42-61页
        2.2.2 shRNA 慢病毒包装第61-63页
        2.2.3 慢病毒感染目的细胞第63-64页
        2.2.4 MTS 检测第64页
        2.2.5 肺癌相关基因筛选第64-65页
        2.2.6 有效 shRNA 靶点筛查第65-68页
        2.2.7 FACS 检测细胞周期的改变第68-69页
        2.2.8 Western blot 检测细胞增殖周期相关蛋白第69-71页
    2.3 统计学处理第71-73页
第3章 结果第73-92页
    3.1 人乙酰基转移酶(HAT)RNAI 慢病毒文库第73-82页
        3.1.1 重组质粒的鉴定第73-76页
            3.1.1.1 表达人乙酰基转移酶 shRNA 重组质粒的 PCR 鉴定第73-75页
            3.1.1.2 表达人乙酰基转移酶 shRNA 重组质粒的酶切鉴定第75-76页
        3.1.2 阳性人乙酰基转移酶 shRNA 重组质粒慢病毒包装第76-79页
        3.1.3 人乙酰基转移酶 shRNA 慢病毒文库感染 A549 细胞第79-82页
    3.2 RNAI 筛选第82-85页
        3.2.1 A549 细胞中 HATs 慢病毒库 MTS 筛选结果第82-85页
    3.3 KAT8 SHRNA 有效片段的筛选第85-87页
        3.3.1 KAT8 基因 shRNA 质粒转染 293T 细胞的转染效率第85-86页
        3.3.2 KAT8 shRNA 慢病毒感染 A549 细胞感染效率第86页
        3.3.3 KAT8 shRNA 慢病毒对 A549 细胞增殖的影响第86-87页
    3.4 KAT8 沉默效率检测第87-89页
        3.4.1 KAT8 沉默后 A549 细胞 KAT8 mRNA 表达情况第87-88页
        3.4.2 qPCR 检测基因 KAT8 的沉默效率第88页
        3.4.3 KAT8 沉默后 A549 细胞 KAT8 蛋白表达情况第88-89页
    3.5 阳性基因功能研究第89-92页
        3.5.1 FACS 检测细胞周期改变第89-90页
        3.5.2 Western blot 检测 KAT8 沉默后对细胞周期相关蛋白表达的影响第90-92页
第4章 讨论第92-99页
结论第99-101页
参考文献第101-117页
攻读博士期间发表文章第117-119页
致谢第119页

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