| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 甜菜M14品系的特点及其研究现状 | 第10-11页 |
| 1.1.1 甜菜M14品系的获得 | 第10页 |
| 1.1.2 甜菜M14品系研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 植物咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2.1 木质素的作用及以咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶的关系 | 第11-12页 |
| 1.2.2 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.3 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶的功能 | 第13-14页 |
| 1.3 cDNA末端快速扩增技术 | 第14-16页 |
| 1.3.1 经典RACE技术介绍 | 第14-15页 |
| 1.3.2 SMART RACE技术的优势 | 第15-16页 |
| 1.4 实时荧光定量PCR的介绍 | 第16-18页 |
| 1.4.1 实时荧光定量PCR的简介 | 第16页 |
| 1.4.2 实时荧光定量PCR的原理 | 第16-17页 |
| 1.4.3 两种应用广泛的实时荧光定量PCR标记方法的介绍 | 第17-18页 |
| 1.5 本试验的研究内容及意义 | 第18页 |
| 1.6 本试验技术路线 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-40页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株及质粒载体 | 第20页 |
| 2.1.3 试剂及试剂盒 | 第20页 |
| 2.1.4 试验所需常用试剂、培养基 | 第20-21页 |
| 2.1.5 试验所需引物 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-40页 |
| 2.2.1 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因全长的获得 | 第22-26页 |
| 2.2.2 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因组织表达分析 | 第26-27页 |
| 2.2.3 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因原核表达体系研究 | 第27-32页 |
| 2.2.4 BvM14-CCoAOMT基因在烟草中过量表达及功能鉴定 | 第32-38页 |
| 2.2.5 BvM14-CCoAOMT蛋白的亚细胞定位 | 第38-40页 |
| 第3章 结果与分析 | 第40-71页 |
| 3.1 甜菜M14品系BvMl4-CCoAOMT基因cDNA全长的获得 | 第40-42页 |
| 3.1.1 甜菜M14品系根、茎、叶、花RNA的获得 | 第40页 |
| 3.1.2 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因3’末端的获得 | 第40-41页 |
| 3.1.3 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因5’末端的获得 | 第41-42页 |
| 3.1.4 BvM14-CCoAOMT基因全长的RT-PCR验证 | 第42页 |
| 3.2 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因的生物信息学分析 | 第42-45页 |
| 3.2.1 BvM14-CCoAOMT基因全长的序列分析 | 第42-43页 |
| 3.2.2 BvM14-CCoAOMT蛋白多重序列比对 | 第43-44页 |
| 3.2.3 BvM14-CCoAOMT蛋白的系统发育分析 | 第44-45页 |
| 3.3 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因组织表达分析 | 第45-50页 |
| 3.3.1 BvM14-CCoAOMT基因实时荧光定量PCR特异性扩增效率的分析 | 第45-46页 |
| 3.3.2 BvM14-CCoAOMT基因实时荧光定量PCR产物特异性检测 | 第46-48页 |
| 3.3.3 BvM14-CCoAOMT基因的组织特异表达定量分析 | 第48-49页 |
| 3.3.4 BvM14-CCoAOMT基因组织特异性表达结果验证 | 第49-50页 |
| 3.4 BvM14-CCoAOMT基因原核表达体系的研究 | 第50-56页 |
| 3.4.1 原核表达载体pET28a-BvM14-CCoAOMT的构建 | 第50-52页 |
| 3.4.2 BvM14-CCoAOMT蛋白的原核诱导表达 | 第52-53页 |
| 3.4.3 原核表达的BvM14-CCoAOMT融合蛋白的Western Blot鉴定 | 第53-55页 |
| 3.4.4 原核表达的BvM14-CCoAOMT酶活力的测定 | 第55-56页 |
| 3.5 BvM14-CCoAOMT基因在烟草中过量表达及功能鉴定 | 第56-68页 |
| 3.5.1 真核表达载体pBI121-BvM14-CCoAOMT的构建 | 第56-58页 |
| 3.5.2 植物表达载体pBI121-BvM14-CCoAOMT转化农杆菌 | 第58-59页 |
| 3.5.3 利用叶盘侵染法获得T_0代转基因烟草植株 | 第59页 |
| 3.5.4 T_0代转基因烟草植株的分子生物学检测 | 第59-61页 |
| 3.5.5 T_1代转基因烟草抗性鉴定 | 第61-68页 |
| 3.6 BvM14-CCoAOMT蛋白的亚细胞定位 | 第68-71页 |
| 3.6.1 表达载体pCAMBIA1300-BvM14-CCoAOMT-gfp的获得 | 第68-71页 |
| 第4章 讨论 | 第71-73页 |
| 4.1 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因5’末端的获得 | 第71页 |
| 4.2 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因组织特异性表达分析 | 第71页 |
| 4.3 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因与木质素含量的关系 | 第71-72页 |
| 4.4 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因提高转基因植物的耐盐和耐旱性 | 第72页 |
| 4.5 甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT蛋白的亚细胞定位分析 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 附录 | 第82-84页 |
| 攻读学位论文期间发表的学术论文 | 第84-86页 |
